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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶
T4 RNA 连接酶 2,截短型 收藏
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相关产品
通用 miRNA 克隆接头
特性
将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上,用于 cDNA 文库构建
将单链腺苷化引物连接至 RNA 上,用于链特异 cDNA 文库构建
将单链腺苷化引物连接至 RNA 上,用于链特异 cDNA 文库构建
概述
T4 RNA 连接酶 2,截短型(T4 Rnl2 截短型)可特异性地将 5´ 端预腺苷化的 DNA 或 RNA连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP,但需要预腺苷化底物。 T4 Rnl2 截短型的表达来自E. coli 质粒,该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同, T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化,因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA的 3´ 端。该酶即 Rnl2(1-249),可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化,因为此酶只能利用腺苷化的引物,因此可以降低连接背景。
来源
携带 T4 RNA 连接酶 2, 截短型基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件
1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,1 mM DTT],25℃ 温育。热失活:65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000
50% PEG 8000
质保声明
无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。
单位定义
200 单位指 20 μl 反应体系中, 25℃ 条件下, 1 小时将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端[miRNA 通用性克隆接头(NEB#S1315) ]末端所需的酶量。单位活性检测条件见www.neb-china.com 或 www.neb.com。
浓度
200,000 units/ml。
参考文献
有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。