天恩泽即用型高保真PCR试剂盒

天恩泽即用型高保真PCR试剂盒 90708-1.5,产品简介:
产品品牌:天恩泽
产品名称:即用型高保真PCR试剂盒
英文名称:Instant HiFi PCR Kit
产品货号:90708-1.5
产品规格:1.5 mL
产品价格:150元

天恩泽即用型高保真PCR试剂盒 90708-1.5

我们上海金畔生物公司作为天恩泽公司的代理商,先简单介绍一下天恩泽公司:

北京天恩泽公司的目标是研发出技术先进、质量稳定、价格合理的试剂精品。公司的创立宗旨是技术至上、质量至上、服务至上,公司的产品研发团队均为高学历并在海外有长期的科研经验;公司的管理团队已在行业内拥有超过20年管理经验;同样,公司的运营团队也有丰富的执行经验。

北京天恩泽公司充分了解客户的需求,并努力创新以满足客户不断发展的需求。我们将与我们的客户共同成长,成为生物技术领域中zhuoyue产品和服务的jijia提供者。

DNAout、RNAout、Erasol、天净沙、克必隆、归去来、好亦多均为天恩泽基因注册商标(试剂类)。

我们上海金畔生物科技有限公司作为天恩泽公司的代理,为客户提供,正规进口,保证原装正品,货期稳定,折扣好的服务标准。

天恩泽即用型高保真PCR试剂盒 90708-1.5,产品简介:

产品品牌:天恩泽

产品名称:即用型高保真PCR试剂盒

英文名称:Instant HiFi PCR Kit

产品货号:90708-1.5

产品规格:1.5 mL

产品价格:150元

运输:低温运输,-20℃保存

保存:负20℃

有效期:1年

货期:1-2天

天恩泽即用型高保真PCR试剂盒 90708-1.5,产品特点:

本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液,含有除引物、模板以外的所有 PCR试剂,包括 Pfu DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、

上样染料等,特别适合于高保真 PCR 反应。

1. Pfu DNA 聚合酶是使用bijiaoguang泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的 10 倍。

2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便,简化了 PCR 的准备工作。

3. PCR 反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少,有利于减少污染,降低实验误差。

4. 本产品含电泳染料,PCR反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。

5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。

6. 适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验,得到的 PCR 产物可用于平末

端克隆。

规格及成分

成份

编号

塑料袋包装

2×高保真PCR MagicMix

90708a

1.5 mL(黄盖)

使用手册

90708sc

1

运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为12 个月。

自备试剂:模板和引物。

使用方法:

将本产品与用户自备的模板,引物混合液按下列推荐使用量(30 uL 反应体系) 加入PCR管中即可进行PCR,反应结束后直接取5-15 uL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是 30 uL,各成分需要按比例增加或减少。

2×高保真 PCR MagicMix

15 uL

DNA 模板(自备)

 

哺乳动物基因组 DNA

0.5-1 ug

酵母基因组

DNA 5-500 ng

细菌基因组 DNA

0.5-50 ng

质粒 DNA

5-500 pg

PCR回收pian段

1-100 pg

PCR 引物(自备)

10-20 pmol each

补水到

30 uL

放入 PCR仪中进行PCR。由于含有电泳示踪剂(注意:不是溴化乙锭等 DNA染料),故PCR结束后可以取5-10 uL 直接上样电泳, 红色染料电泳速度相当于50 bp DNApian段。

参考扩增条件:

预变性

94

4 min

PCR (30 个循环)

94

30 s

50

30 s

68

0.5kb/ min

延伸

68

10 min

注意:

1. 本产品的Pfu DNA聚合酶比Taq DNA聚合酶的延伸反应速率低,因此我们推荐的扩增延伸反应时间为每 kb 需2 分种。

2. Pfu 酶3’ -5’外切酶活性可降解引物,所以强烈建议在冰上配置完成 PCR 反应液后,立即放入 PCR仪中进行扩增,扩增完毕后立即进行电泳检测。

3. 本产品扩增产物为平末端,不可以直接进行 TA 克隆,可以使用克必隆 B 载体(CAT#:51104)进行克隆。如需要进行TA 克隆,建议对PCR产物纯化后,用加A 试剂盒(CAT#:60105)加 A后再进行 TA 克隆。

4. 由于 Pfu 无 5’到 3’外切酶的活性,所以本试剂盒不能用于实时荧光PCR 。

疑难解答

Q:为何 Pfu DNA Polymerase 扩增效率不如Taq DNA Polymerase?

A:一是由于Pfu DNA Polymerase 具有 3’-5’的外切活性,所以在合成过程中,该酶会随时校对新添加的核苷酸是否配对,影响了合成效率;二是它能通过3’-5’的外切活性使引物部分降解,降低引物结合模板的能力,进而影响扩增效率。三是上面提到的尿嘧叮抑制作用。

Q:使用本产品时还有哪些注意事项?

A: 1.引物长度和浓度一般应比常规的 PCR 长和高(考虑到被Pfu DNA Polymerase的3’-5’的外切活性降解的因素);

2.在反应前加Pfu DNA Polymerase。

相关资料

常见耐热 DNA 聚合酶的保真性

DNA 聚合酶名称

错配率 (X10-6)

jingque度 (1/错配率)

单成分酶Pfu Ultra

0.4±0.04

2,500,000

Pfu,PfuTurbo

1.3±0.2

770,000

Tgo

2.2±0.1

450,000

Deep Vent

2.7±0.2

370,000

Vent

2.8±0.9

360,000

Platinum Pfx

3.5±1.0

290,000

Taq

8.0±3.9

125,000

酶混合物 Herculase

2.8±0.5

360,000

 

 

 

TaqPlus Precision

4.0±1.3

250,000

Platinum Taq High Fidelity

5.8±0.3

170,000

Fidelity Advantage HF

6.1±0.07

160,000

 

注:Pfu Ultra和Pfu,PfuTurbo都是来源于Pyrococcus furiosis,各文献中报道的数据间可能有差异,这跟实验体系的不同有关。

关联产品:PCR抑制物清除剂(CAT#:60804)

以下是天恩泽品牌部分热销产品,如需其他品牌产品请咨询本店客服:

品牌

产品货号

货品名称

规格

天恩泽

200101-50

第二代病毒采运试剂盒(低敏型)原拭子病毒采运试剂盒,核酸诊断用

50次/盒

天恩泽

200201-50

第三代免提核酸提取病毒采运试剂盒

50次/盒

天恩泽

200601-50

荧光及可视化LAMP试剂盒

50次/盒

天恩泽

200603-50

荧光及可视化RT-LAMP试剂盒

50次/盒

天恩泽

200108-2.5L

xinguan病毒灭活液A型

2.5L/

天恩泽

91103-250

非冻型拭子病毒保存液

250ml/

天恩泽

15-81920

SARS-CoV-2冠状病毒N基因探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

50次/盒

天恩泽

16-81920

SARS-CoV-2冠状病毒N基因荧光及可视化RT-LAMP试剂盒

50次/盒

天恩泽

15-23000

African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

50次/盒

天恩泽

16-23000

African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒LAMP试剂盒

50次/盒

天恩泽

15-29420

Yersinia pestis鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒

50次/盒

天恩泽

71201-50

柱式动物RNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

71001-50

柱式病毒RNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

60705-50

一管式植物DNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

3070-100

动物RNA提取试剂盒(TRIzol)

100mL/

天恩泽

81027-50

TRIzol伴侣

50次/套

天恩泽

70701-50

柱式病毒DNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

3674-50

一管式病毒DNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

90404-50

柱式植物RNA提取试剂盒2.0

50次/套

天恩泽

60802-50

柱式细菌DNA提取试剂盒

50次/盒

天恩泽

71203-50

柱式植物RNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

60602-50

柱式植物DNA提取试剂盒

50次/套

天恩泽

90315-250

非冻型尿液DNA保存液

250mL/

天恩泽

3660-250

非冻型组织DNA保存液

250mL/

天恩泽

3060-250

非冻型组织RNA保存液

250m/

天恩泽

90805-10

即用型PCR试剂盒3.0

1ml×10/盒

天恩泽

90708-1.5

即用型高保真PCR试剂盒

1.5mL/

天恩泽

90408-1

2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix)

1ml/

天恩泽

190303-1

2X 探针法qPCR Mix (TaqMan探针法荧光定量PCR试剂盒)

1ml/

天恩泽

101005-100

即用型易错PCR试剂盒

100次/套

天恩泽

160903-100

可调式易错PCR试剂盒

100次/套

天恩泽

3090-250

天净沙RNase清除剂A型(原固相RNase清除剂)

250mL/

天恩泽

3091-1.5

天净沙RNase清除剂B型(原液相RNase清除剂)

1.5mL/

天恩泽

140648-250

PCR污染清除剂

250 mL/

天恩泽

70902-1.5

PCR级甜菜碱溶液,5M

1.5mL/

天恩泽

100805B-250

Tris饱和酚-lvfang-yiwuchun混合液(DNA提取用)

250ml/

天恩泽

130502-50

无内毒素水

50mL/

天恩泽

160251-250

4%中性甲醛固定液

250mL/

天恩泽

100302-100

包涵体蛋白溶解及复性套装

100次/次

天恩泽

200604

核酸释放剂(DNA-RNA通用型)

300次/盒

天恩泽

61202-10

天净沙核酸释放剂

10mL/

天恩泽

70303-1.5

绿如蓝核酸染料(UV)

1.5mL/

天恩泽

70503

DNA电泳分子量标准系列

50次/管

天恩泽

小师弟

高压快速电泳预制胶

10块/盒