天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50,产品简介:产品品牌:天恩泽产品名称:荧光及可视化LAMP试剂盒产品规格:50次产品货号:200601-50运输:低温保存:-20℃
天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50
我们上海金畔生物公司作为天恩泽公司的代理商,先简单介绍一下天恩泽公司:
北京天恩泽公司的目标是研发出技术先进、质量稳定、价格合理的试剂精品。公司的创立宗旨是技术至上、质量至上、服务至上,公司的产品研发团队均为高学历并在海外有长期的科研经验;公司的管理团队已在行业内拥有超过20年管理经验;同样,公司的运营团队也有丰富的执行经验。
北京天恩泽公司充分了解客户的需求,并努力创新以满足客户不断发展的需求。我们将与我们的客户共同成长,成为生物技术领域中zhuoyue产品和服务的jijia提供者。
DNAout、RNAout、Erasol、天净沙、克必隆、归去来、好亦多均为天恩泽基因注册商标(试剂类)。
我们上海金畔生物科技有限公司作为天恩泽公司的代理,为客户提供,正规进口,保证原装正品,货期稳定,折扣好的服务标准。
天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50,产品简介:
产品品牌:天恩泽
产品名称:荧光及可视化LAMP试剂盒
产品规格:50次
产品货号:200601-50
产品价格:1390元
运输:低温
保存:-20℃
有效期:1年
货期:1-3天
天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50,产品说明:
本产品是根据本公司的双染料LAMP技术开发的荧光和可见光双模式 LAMP扩增及检测试剂盒,它既可以用于荧光LAMP 扩增及检测,也可以用于 可视化LAMP 扩增及检测,适用于各种针对核酸的快速定性检测。本产品具有 下列特点:
1. 一般60分钟内出结果(取决于靶分子浓度),比PCR快约1小时。
2. 对20 μL的反应体系,可以样品加样量达到14 μL。
3. 含可见光和荧光染料,既可以用金属浴和水浴扩增用可见光肉眼判断结果, 也可用荧光PCR仪进行实时荧光检测。
4. 内含的dUTP-UNG可防交叉污染。
5. 特异性比PCR高,因为LAMP 扩增使用4-6条引物而不是两条。
6. 灵敏性可达10拷贝/反应以下(随引物而不同),故假阴性率更低。
7. 本产品跟北京天恩泽的多种免提取试剂盒(如免提病毒保存液)兼容。
8. 只可用于科研,只可进行定性检测,不能用于定量检测。
9. 本产品只适用于LAMP 检测,不适用于进行RT-LAMP检测。
10. 本产品足够50次20 μL体系的荧光及可视化LAMP 扩增。
天恩泽 荧光及可视化LAMP试剂盒 200601-50,产品规格:
成分 |
编号 |
5孔塑料盒包装 |
4×荧光及可视化LAMP MagicMix |
200601a |
250 μL(绿盖) |
4×阳性对照模板-引物混合物 |
130923a |
50 μL(黄盖) |
使用手册 |
200601sc |
1份 |
运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
自备试剂 :LAMP模板及LAMP引物、PCR级石蜡油(仅对使用金属浴或水浴者)。
准备工作:如果使用水浴锅或金属浴,需要在实验启动前打开并调到65℃。如 果用金属浴,还必须在孔中加水以填充金属孔和反应管间的空隙。本公司发现 很多水浴锅或金属浴温度不准,故建议先用阳性对照和阴性对照测试所用仪器 在60℃、62.5℃、65℃、67.5℃和70℃五个温度下扩增效果,选择阳性和阴 性颜色差异ji大的温度进行扩增。
一、样品DNA的制备 1. 用自选方法纯化样品DNA,本试剂盒跟市场上大多数DNA提取试剂盒兼 容,可以选购本公司的各种免提取试剂盒。 2. 如果有 N 个样品,则至少需要做 N+2 个样品制备,包括一个制备阳性对 照(制备时加入自备的跟要检测的靶分子相同的阳性对照模板,一起经历提取过程)和一个制备阴性对照(用水替代样品)。ran后N+2个样品一起 进行DNA提取操作,得到N+2个DNA样品。
二、配制并测试自备的20×LAMP引物混合液 3. 用超纯水将自备的6种(或4种)LAMP 引物干粉稀释到母液浓度(100 μM),然后按下表配制100μL的20×LAMP 引物混合液,此混合液足够 100次20 μL体系的LAMP扩增。如果需要配制的20×LAMP 引物混合 液体积异于 100 μL,则各成分的用量请按比例调整。引物混合液可以在 -20℃放置2年。
引物名称 |
母液浓度 |
加母液量 |
在20×LAMP引 物混合液中的浓度 |
FIP引物 |
100 μM |
32 μL |
32 μM |
BIP引物 |
100 μM |
32 μL |
32 μM |
F3引物 |
100 μM |
4 μL |
4 μM |
B3引物 |
100 μM |
4 μL |
4 μM |
Loop F |
100 μM |
8 μL |
8 μM |
Loop B |
100 μM |
8 μL |
8 μM |
超纯水 |
|
12 μL |
|
注意:总体积为100 μL。如果自备的LAMP引物不含Loop引物,则按上 表配制时Loop用超纯水替代,使得总体积为100 μL。 4. 测试引物的非特异扩增:在加模板和不加模板(至少1000拷贝/反应)的 LAMP 系统中测试引物效果,引物选择标准可以自己掌握,可以选择无模 板反应的Ct值比有模板反应的Ct值大60以上(每个循环1 分钟)的引 物对。根据结果设定判断阴性和阳性结果的阈值(本产品只用于定性)。 如果没有 qPCR仪器,只能用肉眼检测,则无需设定阈值,届时靠跟阳性 对照和阴性对照管的颜色来判断。
LAMP扩增(20 μL体系)
反应设置:如果有 N+2 个 DNA 纯化样品,则可以设置 N+5 个LAMP 扩 增,增加扩增阳性对照、无模板对照和无引物对照各1个。在 N+5个0.2mL 的PCR管中加入下列成分:
成分 |
N+2个 样品管 |
无模板 对照管 |
无引物 对照管 |
扩增阳性 对照管 |
4×荧光及可视化 LAMP MagicMix |
各5 μL |
5 μL |
5 μL |
5 μL |
自备20×引物混合液 |
各1 μL |
|
1 μL |
– |
自备N+2 个 样品DNA |
较多14 μL |
同样品管 |
|
– |
4×阳性对照 模板-引物混合物 |
– |
– |
|
5 μL |
超纯水 |
补到20μL |
补到20μL |
14 μL |
10 μL |
6. 混匀后进行扩增,可以根据实验室条件选择下列两种方式进行扩增和检测。
7. 如使用金属浴、水浴或普通无热盖 PCR 仪,则每管加 30μL 石蜡油,再 65℃保温120分钟。如不加石蜡油,保温期间水分蒸发,会有非特异扩增。
8. 如果使用荧光定量 PCR 仪:聚合温度设为 65℃,1 次循环 1 分钟,120 个循环,每分钟在FAM通道采集一次荧光信号。 三、结果分析及解读 9. 阈值设定:在*分钟荧光值会升高再稳定,故只能取第10到15分钟 的荧光值作阈值。此现象估计是常温下可见光染料和荧光染料结合并对后 者有淬灭作用,加热到65℃后两种染料分开,淬灭逐渐解除,荧光逐渐升 高,10分钟后稳定。没加可见光染料的反应无此现象。 10. 所有阳性对照有阳性结果(Ct 在60以内或反应液呈蓝色),所有阴性对 照有阴性结果(Ct 大于60 或反应液呈淡蓝色),否则提取实验或扩增实 验无效。需要寻找原因或跟厂家联系,暂时不需要分析样品的结果。 11. 如果阳性和阴性对照结果正常,则实验有效,可以分析样品的情况。如果 肉眼观察,样品管的颜色接近扩增阳性对照管则说明有扩增有靶分子,如 果接近无模板和无引物的阴性对照,则说明无扩增无靶分子。反应结果示 例如下(9为阴性,10为阳性)
12. 如果是用荧光PCR仪,样品Ct将小于阈值则为阳性,大于阈值则为阴性。
13. 当实时荧光检测和可视化检测同时使用时,如果不一致,以实时荧光LAMP 的数据为准。一般可视化结果滞后实时荧光检测结果20-30分钟,也就是 说,在 qPCR 仪上第 30 分钟时呈现阳性的样品,其颜色变化在第 50-60 分钟时才能观察到。
关联产品:免核酸纯化病毒保存液,PCR级石蜡油
以下是天恩泽品牌部分热销产品,如需其他品牌产品请咨询本店客服:
品牌 |
产品货号 |
货品名称 |
规格 |
天恩泽 |
200101-50 |
第二代病毒采运试剂盒(低敏型)原拭子病毒采运试剂盒,核酸诊断用 |
50次/盒 |
天恩泽 |
200201-50 |
第三代免提核酸提取病毒采运试剂盒 |
50次/盒 |
天恩泽 |
200601-50 |
荧光及可视化LAMP试剂盒 |
50次/盒 |
天恩泽 |
200603-50 |
荧光及可视化RT-LAMP试剂盒 |
50次/盒 |
天恩泽 |
200108-2.5L |
xinguan病毒灭活液A型 |
2.5L/瓶 |
天恩泽 |
91103-250 |
非冻型拭子病毒保存液 |
250ml/瓶 |
天恩泽 |
15-81920 |
SARS-CoV-2冠状病毒N基因探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
50次/盒 |
天恩泽 |
16-81920 |
SARS-CoV-2冠状病毒N基因荧光及可视化RT-LAMP试剂盒 |
50次/盒 |
天恩泽 |
15-23000 |
African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 |
50次/盒 |
天恩泽 |
16-23000 |
African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒LAMP试剂盒 |
50次/盒 |
天恩泽 |
15-29420 |
Yersinia pestis鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒 |
50次/盒 |
天恩泽 |
71201-50 |
柱式动物RNA提取试剂盒 |
50次/套 |
天恩泽 |
71001-50 |
柱式病毒RNA提取试剂盒 |
50次/套 |
天恩泽 |
60705-50 |
一管式植物DNA提取试剂盒 |
50次/套 |
天恩泽 |
3070-100 |
动物RNA提取试剂盒(TRIzol) |
100mL/瓶 |
天恩泽 |
81027-50 |
TRIzol伴侣 |
50次/套 |
天恩泽 |
70701-50 |
柱式病毒DNA提取试剂盒 |
50次/套 |
天恩泽 |
3674-50 |
一管式病毒DNA提取试剂盒 |
50次/套 |
天恩泽 |
90404-50 |
柱式植物RNA提取试剂盒2.0 |
50次/套 |
天恩泽 |
60802-50 |
柱式细菌DNA提取试剂盒 |
50次/盒 |
天恩泽 |
71203-50 |
柱式植物RNA提取试剂盒 |
50次/套 |
天恩泽 |
60602-50 |
柱式植物DNA提取试剂盒 |
50次/套 |
天恩泽 |
90315-250 |
非冻型尿液DNA保存液 |
250mL/瓶 |
天恩泽 |
3660-250 |
非冻型组织DNA保存液 |
250mL/瓶 |
天恩泽 |
3060-250 |
非冻型组织RNA保存液 |
250m/瓶 |
天恩泽 |
90805-10 |
即用型PCR试剂盒3.0 |
1ml×10/盒 |
天恩泽 |
90708-1.5 |
即用型高保真PCR试剂盒 |
1.5mL/瓶 |
天恩泽 |
90408-1 |
2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix) |
1ml/管 |
天恩泽 |
190303-1 |
2X 探针法qPCR Mix (TaqMan探针法荧光定量PCR试剂盒) |
1ml/管 |
天恩泽 |
101005-100 |
即用型易错PCR试剂盒 |
100次/套 |
天恩泽 |
160903-100 |
可调式易错PCR试剂盒 |
100次/套 |
天恩泽 |
3090-250 |
天净沙RNase清除剂A型(原固相RNase清除剂) |
250mL/瓶 |
天恩泽 |
3091-1.5 |
天净沙RNase清除剂B型(原液相RNase清除剂) |
1.5mL/套 |
天恩泽 |
140648-250 |
PCR污染清除剂 |
250 mL/瓶 |
天恩泽 |
70902-1.5 |
PCR级甜菜碱溶液,5M |
1.5mL/管 |
天恩泽 |
100805B-250 |
Tris饱和酚-lvfang-yiwuchun混合液(DNA提取用) |
250ml/瓶 |
天恩泽 |
130502-50 |
无内毒素水 |
50mL/瓶 |
天恩泽 |
160251-250 |
4%中性甲醛固定液 |
250mL/瓶 |
天恩泽 |
100302-100 |
包涵体蛋白溶解及复性套装 |
100次/次 |
天恩泽 |
200604 |
核酸释放剂(DNA-RNA通用型) |
300次/盒 |
天恩泽 |
61202-10 |
天净沙核酸释放剂 |
10mL/瓶 |
天恩泽 |
70303-1.5 |
绿如蓝核酸染料(UV) |
1.5mL/管 |
天恩泽 |
70503 |
DNA电泳分子量标准系列 |
50次/管 |
天恩泽 |
小师弟 |
高压快速电泳预制胶 |
10块/盒 |