热敏磷酸酶 货 号 #M0289L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

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热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L

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#M0289L
5,000 units
3,209.00

#M0289S
1,000 units
769.00

#M0289V
500 units
409.00

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特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化,防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶 在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活,因此,在连接或末端标记之前,可以不用去除热敏磷酸酶。  

来源

克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株,该基因最初克隆于质粒 pNI 中,后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。  

反应条件

1X 热敏磷酸酶反应缓冲液
[50 mM Bis Tris-丙烷 HCl,1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2(pH 6.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 5 分钟。  

质保声明

热敏磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。   

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟能使 1 μg 经 HindIII(产生 5´ 突出末端)、EcoRV(产生平齐末端)或 PstI(产生 5´ 凹陷末端)消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95% 的 DNA 再环化(通过转化 E. coli 细胞来检测)。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

5,000 units/ml。  

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。   

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

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热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L 热敏磷酸酶                货   号                  #M0289L

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5,000 units
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500 units
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特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化,防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶 在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活,因此,在连接或末端标记之前,可以不用去除热敏磷酸酶。 

来源

克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株,该基因最初克隆于质粒 pNI 中,后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。 

反应条件

1X 热敏磷酸酶反应缓冲液
[50 mM Bis Tris-丙烷 HCl,1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2(pH 6.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:80℃ 加热 2 分钟。 

质保声明

热敏磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

 
1 μg 经内切酶消化产生 5´ 凹陷末端的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95% 的 DNA 再环化(通过转化 E. coli 细胞来检测)。单位活性检测条件请联系我们。
 

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

热敏核酸外切酶 I 货 号 #M0568L-NEB酶试剂

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

热敏核酸外切酶 I                              收藏

热敏核酸外切酶 I                货   号                  #M0568L 热敏核酸外切酶 I                货   号                  #M0568L 热敏核酸外切酶 I                货   号                  #M0568L 热敏核酸外切酶 I                货   号                  #M0568L

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15,000 units
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特性

去除 DNA 测序或 SNP 分析前 PCR 反应体系中单链引物

去除巢式 PCR 反应体系中单链引物
从双链 DNA 中去除单链 DNA
 

概述

 具有从 3’→5’方向水解单链 DNA 的外切酶活性。

反应条件

1X NEBuffer 3.1,37℃ 温育。

热失活:80℃ 加热 1 分钟。
 

单位定义

 1 单位指在 37℃ 条件下,100 μl 体系,6 分钟内催化释放 2 nmol 的酸可溶性核苷酸所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

 20,000 units/ml

南极热敏 UDG 货 号 #M0372L-NEB酶试剂

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

南极热敏 UDG                              收藏

南极热敏 UDG                 货   号                  #M0372L 南极热敏 UDG                 货   号                  #M0372L 南极热敏 UDG                 货   号                  #M0372L 南极热敏 UDG                 货   号                  #M0372L 南极热敏 UDG                 货   号                  #M0372L

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#M0372L
500 units
3,689.00

#M0372S
100 units
909.00

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特性

 去除 PCR 残存污染
去除单链或双链 DNA 尿嘧啶碱基
 

概述

南极热敏 UDG (尿嘧啶-DNA 糖基化酶)能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,产生的缺嘧啶位点,在高温或高 pH 下,极易水解断裂。升高温度和 pH 都会影响其水解活性。该产品对高温敏感,50℃ 以上就可以将酶完全失活。 

来源

克隆有来自嗜冷海洋细菌(psychrophilic marine bacterium)UDG 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X 标准 Taq 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,1.5 mM MgCl2(pH 8.3 @25℃)],37℃ 温育。
热失活:50℃ 加热 5 分钟。 

质保声明

南极热敏 UDG 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。检测条件为:50 μl 标准 Taq 反应缓冲液中,37℃ 条件下,30 分钟从含 0.2 μg DNA(104-105 cpm/μg)的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。 

浓度

1,000 units/ml。 

注意事项

南极热敏 UDG 在多数 PCR 反应缓冲液中均有活性,但活性受高离子强度(> 100 mM)抑制。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

热敏蛋白酶 K 货 号 #P8111S-NEB酶试剂

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产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

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热敏蛋白酶 K               货   号                  #P8111S 热敏蛋白酶 K               货   号                  #P8111S 热敏蛋白酶 K               货   号                  #P8111S

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#P8111S
30 units
1,919.00

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特性

  用于抽提质粒和基因组 DNA

用于抽提 RNA
灭活反应中的 RNase、DNase 和酶类产品
去除 DNA 中的酶来提升克隆效率
可用于 PCR 纯化
 

概述

 热敏蛋白酶 K 是经过生物工程改造,能够水解多种肽键的枯草杆菌相关丝氨酸蛋白酶

来源

 克隆自白色侧赤霉菌(Engyodontium album),也称白色念球菌(Tritirachium album)。经过突变提高热敏感性,于乳酸克鲁维酵母中表达(K.lactis)

分子量

 29,000 daltons

反应条件

 热敏蛋白酶 K 在多种缓冲液中均有活性。在pH 7.0 到 9.5 及温度 20℃ 到 40℃之间均能达到很高活性,在含有 EDTA 等螯合剂的缓冲液中也具活性,当反应中加入多达 1% 的 SDS,仍具活性。

单位定义

 1 单位指 105 μl 反应体系中 25℃ 条件下,每分钟从 N-琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Phe-双硝基苯胺中释放 1 μmol 4-硝基苯胺所需的酶量。

浓度

 120 units/ml

热敏 USER® II 酶 货 号 #M5508L-NEB酶试剂

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆 & 合成生物学

热敏 USER® II 酶                              收藏

热敏 USER®  II 酶                 货   号                  #M5508L 热敏 USER®  II 酶                 货   号                  #M5508L 热敏 USER®  II 酶                 货   号                  #M5508L 热敏 USER®  II 酶                 货   号                  #M5508L 热敏 USER®  II 酶                 货   号                  #M5508L

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250 units
4,819.00

#M5508S
50 units
1,199.00

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特性

USER 克隆
RNA 定向测序
NEBNext 接头切割

浓度

 1,000 units/ml

概述

热敏 USER II 酶(尿嘧啶-特异性切除试剂)在尿嘧啶位置产生一个单核苷酸缺口。该酶在 65℃ 以上即可完全失活。
 
热敏 USER II 酶
热敏 USER®  II 酶                 货   号                  #M5508L
热敏 USER II 酶是南极热敏 UDG 和核酸内切酶 III 的混合物。南极热敏 UDG 催化尿嘧啶碱基的切割,形成一个脱碱基(脱嘧啶)位点,但保持磷酸二酯骨架结构完整。核酸内切酶 III 的裂解酶活性使脱碱基位点 3’和 5’端的磷酸二酯键断裂。热敏 USER II 酶(NEB #M5508)与 USER 酶(NEB #M5505)相比,两者产生的 3’末端产物形式不一样,且热敏 USER II 酶在65℃ 条件下 10 分即可完全失活。

反应条件

CutSmart 反应缓冲液。37℃ 温育。
热敏 USER II 酶热失活:65℃ 加热 10 分钟。
 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃条件下,15 分钟使 10 pmol 的含有单一尿嘧啶碱基的 34 mer 寡核苷酸双链产生缺口所需要的酶量。
 

质保声明

热敏 USER II 酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。单位活性检测条件请联系我们。

www.neb.com 或 www.neb-china.com

参考文献

1.  Lindhal, T. et al. (1977). J. Biol. Chem. 252, 3286-3294.
2.  Lindhal, T. (1982). Annu. Rev. Biochem. 51, 61-64.