上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
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一种亲和介质，能少量分离纯化与 CBD（Chitin Binding Domain）融合的目的蛋白。由于该磁珠有一个磁力核心，因此可以从细胞培养上清液中磁力分离与 CBD 融合的蛋白。再生之后磁珠不会影响结合能力。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
一种亲和介质，能少量分离纯化与 MBP（麦芽糖结合蛋白）相融合的目的蛋白。本品通过将 Amylose 共价耦联到一种顺磁颗粒上而形成，由于该共价结合可以在很宽的 pH 范围内保持稳定，使得 Amylose 磁珠可以从细胞培养上清液中分离 MBP 融合蛋白。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
Amylose 磁珠以 25 mg/ml 的浓度悬浮贮存于含 20% 乙醇的水溶液中。
几丁质磁珠是直径约为 50-70 μm 的顺磁微粒。
Amylose 磁珠是直径约为 10 μm 的超顺磁微粒。
100 μl 几丁质磁珠能结合 30-50 μg CBD 融合蛋白。
1 mg Amylose 磁珠能结合 10-20 μg MBP 融合蛋白。
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该产品已停产，替代产品： 抗 MBP 单克隆抗体（NEB #E8032）
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该产品可直接替换 NEB #E8200，pMAL™ 蛋白融合表达系统
在 NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统中，pMAL-c6T 载体提供了一种将克隆基因或开放阅读框编码的蛋白质表达和纯化的方法。首先，将目标克隆基因插入大肠杆菌编码麦芽糖结合蛋白（MBP）的 malE 基因框架下游；这样构建的载体可表达 MBP 融合蛋白（2,3）。pMAL-c6T 载体表达 N 端标记六组氨酸的 malE 基因（缺少分泌信号序列，并且经改造可以与直链淀粉更紧密地结合），其后是 TEV 蛋白酶识别序列、多克隆酶切位点和三位终止密码子。pMAL-c6T 载体在细胞质中表达 MBP 融合蛋白。这种方法使用“tac”强启动子和 malE 翻译起始信号，从而能够使克隆序列进行高水平表达（4,5）。然后，利用 MBP 与麦芽糖的亲和特性，使用直链淀粉树脂对融合蛋白进行一步纯化（6）。
试剂盒组分
随产品提供如下试剂
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名称 |
储存温度(℃) |
浓度 |
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pMAL-c6T DNA |
200 µg/ml |
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Amylose Resin
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4 |
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TEV Protease
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-20 |
10,000 units/ml |
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TEV Protease Reaction Buffer |
-20 |
10 X |
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Anti-MBP Monoclonal Antibody |
-20 |
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MBP6 Protein |
-20 |
40 µg/ml |
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MBP6-TEV-Paramyosin ΔSal |
-20 |
5 mg/ml |
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E. coli ER2523 (NEB Express) (Glycerol Stock) |
-20 |
-20℃