mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶 货 号 #M0366S-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶                              收藏

mRNA 帽结构 2 mRNA 帽结构 2

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#M0366S
2,000 units
669.00

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特性

 提高 RNA 的翻译效率
 改善 mRNA 在显微注射和转染后的表达 

概述

该酶能在 RNA 5´ 末端紧邻帽结构的第一个核苷酸的 2´ -O 上添加甲基基团。利用 S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体,使带帽 Cap O 甲基化为 Cap 1。 

来源

纯化自携带牛痘病毒 mRNA 帽结构 2´ –O-甲基转移酶基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X 加帽缓冲液
[50 mM Tris-HCl,5 mM KCl,1 mM DTT,1 mM MgCl2,(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。 

单位定义

1 单位是指在 37℃ 的条件下,1 小时内将 10 pmol 80 nt 的带帽 RNA 转录子甲基化所需酶量。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品性能和应用的相关文献请联系我们。  

mRNA 脱帽酶 货 号 #M0608S-NEB酶试剂

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#M0608S
2,000 U
1,179.00

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特性

 mRNA 脱帽酶可使带有 m7G 帽结构的 mRNA 脱帽,产生 5’单磷酸末端。

  ·有效替代烟草酸焦磷酸酶(TAP

  ·去除 Cap 0 Cap 1 的效率相同

  ·适用于 5RLM-RACE RNA-seq

  ·1 µl 的酶可在 15 min 内将 20 µg mRNA1.7 kb)完成脱帽

产品信息

 mRNA 脱帽酶可以将 mRNA 5’末端的 7-甲基鸟苷帽(m7G)结构去除,产生 5’单磷酸末端并释放 m7GDPmRNA 脱帽酶能够使各种长度的 mRNA 脱帽,对 Cap 0 Cap 1 的去除效率相同。mRNA 脱帽酶也可将 5’三磷酸末端转化为 5’单磷酸,但转化效率相对较低。5’单磷酸化的 RNA 可用于多种下游应用,包括 5RNA 连接酶介导的 RACERNA-seq 5→3’核酸外切酶消化。

mRNA 脱帽酶(MDE)和烟草酸焦磷酸酶(TAP)脱帽活性的比较

mRNA 脱帽酶            货   号                  #M0608S

A)用 mRNA 脱帽酶(MDE)或其它品牌的烟草酸焦磷酸酶(TAP)对 500 nM 5’加帽 RNA25 nt)溶液进行脱帽反应。每种酶使用各自适合的反应缓冲液,且反应体积相同。其它品牌的 TAP 浓度未知,经比较显示 0.3 nM MDE 1 µl TAP 活性相当。脱帽反应后的反应产物使用毛细管电泳分析。需要注意的是,在阴性对照中,所用的合成底物中都存在 10%的三磷酸 RNA。(图 B)测试了在其它条件不变的情况下,引入不同长度、不同种类末端的 RNA,是否会影响 MDE 的活性,在反应中添加 500 ng Jurkat 细胞总 RNA。结果显示:MDE 的脱帽活性不受影响,而 TAP 活性则显着降低,这说明 MDE 的脱帽能力在该测试条件下更稳定。

随酶提供的试剂

 

 

储存温度 (°C)

浓度

mRNA Decapping Enzyme Reaction Buffer

   

 

储存温度

 

-20°C

Oligo d(T)18 mRNA 引物 货 号 #S1316S-NEB酶试剂

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Oligo d(T)18 mRNA 引物                              收藏

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#S1316S
5.0 A260 units
1,009.00

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概述

Oligo d(N)n 引物适用于 mRNA 的扩增和测序,能与 mRNA 的 3´ -poly A 尾或带尾的 cDNA 退火。

注意:#S1316 5´ 末端未磷酸化。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

mRNA 磁性分离试剂盒 货 号 #S1550S-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

mRNA 磁性分离试剂盒                              收藏

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#S1550S
25 次分离反应
3,959.00

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可单独出售的组份

Oligo d(T)25 磁珠
#S1419S   25 mg   ¥2,409

相关产品:

6 孔磁性分离架
#S1506S   6 孔 (1.5 ml)   ¥2,259

12 孔磁性分离架
#S1509S   12 孔 (1.5 ml)   ¥3,559

特性

 适用于自动化、高通量分离
 无需有机溶剂
 无需从洗脱液中沉淀 poly(A)+ 转录物
 1 小时内即可获得完整 poly(A)+ RNA
 无基因组 DNA 污染 

概述

NEB 的 mRNA 磁性分离试剂盒可用于从细胞或组织中分离完整的 poly(A)+ RNA,此过程不需要酚和其它有机溶剂。该技术的原理是将 Oligo d(T)25 与 1 μm 顺磁性磁珠耦联后,以此为固相支持物直接结合 poly(A)+ RNA。利用此方法可以进行多个样本的分离,也适用于自动化高通量分离。此外,磁性分离技术可得到较小体积的完整 RNA 洗脱液,不需要再从洗脱液中沉淀 poly(A)+ 转录物。因此在 1 小时内就能分离得到体现原始样品中 mRNA 分布特性的完整 poly(A)+ RNA。Oligo d(T)25 磁珠可再生 3 次,实验者可选择将分离到的 mRNA 洗脱下来或直接以结合于 mRNA 上的 dT DNA 为引物来进行 cDNA 第一链合成。 

mRNA 磁性分离试剂盒            货   号                  #S1550S

分离 poly(A)+ RNA 分离试验显示分离结果一致性好,分离范围宽:将细胞数递减的 HEPG2 细胞( 5 X 105 – 1 X 103),直接在微量滴定板上进行裂解/结合,然后加入磁珠分离 mRNA。使用 ProtoScript M-MuLV 第一链 cDNA 合成试剂盒(NEB #E6300),以 oligo(dT) 为引物将 mRNA 的十分之一反转录成 cDNA,并使用特异引物 qPCR 检测低丰度的管家基因;肽基脯氨酰异构酶。

 

mRNA 磁性分离试剂盒包括

– Oligo d(T)25 磁珠
– 裂解/结合缓冲液
– 洗涤缓冲液 I、 II 、III 和洗脱缓冲液 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块 货 号 #E7490L-NEB酶试剂

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产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于所有测序平台/模块和酶

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#E7490L
96 次反应
3,049.00

#E7490S
24 次反应
849.00

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概述

NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块可以从分离的总 RNA 中提取完整的 poly(A)+ RNA。这个技术的原理是将 Oligod(T)25 与 1 μm 顺磁性磁珠偶联后,以此为固相支持物直接结合 poly(A)+ RNA。利用此方法可以进行多个样本的分离,也适用于自动化高通量分离。此外,磁性分离技术可得到较小体积的完整 RNA 洗脱液,不需要再从洗脱液中沉淀 poly(A)+ RNA。因此在 1 小时内就能分离得到体现原始样品中 mRNA分布特性的完整 poly(A)+ RNA。 

mRNA 磁性分离模块包括

– NEBNext Oligo d(T)25 磁珠

– NEBNext RNA 结合缓冲液(2X)

– NEBNext 洗脱缓冲液

– 无核酸酶污染的水
– NEBNext Tris 缓冲液 

NEBNext RNA 文库制备试剂——订购信息

NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块            货   号                  #E7490L

NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块            货   号                  #E7490L

NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块 货 号 #E7490L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – 二代测序 RNA 文库制备试剂

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#E7490L
96 次反应
3,049.00

#E7490S
24 次反应
849.00

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概述

NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块可以从分离的总 RNA 中提取完整的 poly(A)+ RNA。这个技术的原理是将 Oligod(T)25 与 1 μm 顺磁性磁珠偶联后,以此为固相支持物直接结合 poly(A)+ RNA。利用此方法可以进行多个样本的分离,也适用于自动化高通量分离。此外,磁性分离技术可得到较小体积的完整 RNA 洗脱液,不需要再从洗脱液中沉淀 poly(A)+ RNA。因此在 1 小时内就能分离得到体现原始样品中 mRNA分布特性的完整 poly(A)+ RNA。 

mRNA 磁性分离模块包括

– NEBNext Oligo d(T)25 磁珠
– NEBNext RNA 结合缓冲液(2X)
– NEBNext 洗脱缓冲液
– 无核酸酶污染的水
– NEBNext Tris 缓冲液  

NEBNext RNA 文库制备试剂——订购信息

NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块            货   号                  #E7490L

NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块            货   号                  #E7490L