SP6 RNA 聚合酶 货 号 #M0207S-NEB酶试剂

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SP6 RNA 聚合酶                              收藏

SP6 RNA 聚合酶              货   号                  #M0207S SP6 RNA 聚合酶              货   号                  #M0207S

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相关产品

T3 RNA 聚合酶
T7 RNA 聚合酶
SP6 RNA 聚合酶

特性

 制备放射标记的 RNA 探针
 合成用于体外翻译的 RNA
 合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成 RNA 反义链,调控基因表达  

概述

T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体,可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中,以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性,可进行准确剪切。实验证实,用靶标 DNA 反向转录所产生的反义 RNA 能特异性阻断体内 mRNA 的翻译。由于RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定,因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。 T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株,该菌株携带含可诱导的 lac UV5 启动子及其控制的 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带可表达T3 基因载体。

反应条件

1X RNAPol 反应缓冲液 [40 mM Tris-HClpH 7.9),6 mM MgCl22 mM 亚精胺,1 mM DTT]。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP(不随酶提供)和带有启动子的模板 DNA,在 37 ℃ 温育。

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。  

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下, 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。   

浓度

T3 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;T7 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;SP6 RNA 聚合酶:20,000 units/ml。  

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。   

p19 siRNA 结合蛋白(停产) 货 号 #M0310S-NEB酶试剂

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p19 siRNA 结合蛋白(停产)                              收藏

p19 siRNA 结合蛋白(停产)             货   号                  #M0310S

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停产通知

 产品于 2020年 1 月 2 日停产.

相关产品

几丁质树脂 
几丁质磁珠

特性

 与 siRNA 结合效率高
 可通过几丁质磁珠亲和纯化 siRNA 

概述

p19 siRNA 结合蛋白分子量为 19 kDa,来自于植物香石竹意大利环斑病毒(CIRV)。该蛋白与 siRNA 具有纳摩尔级的亲和力,和 3´ 末端有 2 个核苷酸突出、5´ 末端是磷酸基的 21 nt siRNA 结合力高于其它片段。该蛋白是以二聚体的形式与 siRNA 结合,结合力取决 RNA 片段大小,而与 RNA 序列无关。如果 siRNA 的长度增加 4 个碱基,则与蛋白的亲和力会下降约 100 倍。当 p19 siRNA 结合蛋白在植物体内表达时,能抑制 RNAi 作用。 

来源

p19 siRNA 结合蛋白以融合蛋白的形式在大肠杆菌中克隆和表达。其 N 末端带有 MBP(麦芽糖结合蛋白),C 末端带有 CBD(几丁质结合蛋白)。 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。产品经纯化,琼脂糖凝胶电泳后 EB 染色检测,无 DNA 或 RNA 污染。 

单位定义

1 单位指 25℃ 条件下,1 小时内结合 10 ng 的 siRNA 所需要的蛋白量。单位活性检测条件请联系我们。  

分子量

67 kDa。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

5´ 去腺苷化酶 货 号 #M0331S-NEB酶试剂

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5´ 去腺苷化酶                              收藏

5´ 去腺苷化酶               货   号                  #M0331S 5´ 去腺苷化酶               货   号                  #M0331S 5´ 去腺苷化酶               货   号                  #M0331S

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特性

 DNA 和 RNA 5´ 末端的去腺苷化
 Aprataxin 依赖的 DNA 修复检测
 分析双核苷四磷酸

概述

酵母 去腺苷化酶是组氨酸三聚体(HIT家族中的一员,属于组氨酸三聚体核苷结合蛋白Hint)的分支。它是 aprataxin 在酵母中的直系同源物。人 aprataxin 的突变会导致神经系统疾病,如共济失调伴眼动失用症 I。通过从 DNA 端去除 AMPAMP-DNA 水解酶活性),人源 腺苷化酶可以去除未连接中间体,它还可以通过去除 3´ –磷酸和 3´ –磷酸乙醇酸修复 DNA 端损伤。人 aprataxin 作用于小分子,如核苷多磷酸双腺苷四磷酸(AppppA)和 lysyl-AMP

去腺苷化酶是由酿酒酵母(S. cerevisiae)的 HNT3基因编码。 NEB 研究显示该蛋白能从 DNA RNA末端去腺苷化,余下 末端磷酸。它也能切割 AppppA 生成 ATP AMP。未检测出其对 lysylAMP 有作用。

 

来源

从携带编码酿酒酵母 5´ 去腺苷化酶质粒的 E. coli 菌株中纯化而得。 

反应条件

20 μl 反应体系:1X NEBuffer 2 [50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],5–50 pmol 腺苷化 DNA (AMPDNA),30℃ 温育。
热失活:70℃ 20 分钟。 

单位定义

1 单位指 30℃ 条件下,10 分钟从 5´ 腺苷化 DNA 寡聚体中去除 10 pmol AMP 所需的酶量。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

Poly(U) 聚合酶 货 号 #M0337S-NEB酶试剂

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Poly(U) 聚合酶                              收藏

Poly(U) 聚合酶               货   号                  #M0337S Poly(U) 聚合酶               货   号                  #M0337S Poly(U) 聚合酶               货   号                  #M0337S

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相关产品

小鼠 RNase 抑制剂
rNTP 套装

特性

 用 UTP 标记 RNA
 为 RNA 添加 poly(U) 尾,用于克隆
 研究 RNA 转染至真核细胞的稳定性和翻译效率
 2´ O-甲基的 3´ 修饰末端添加 poly(A) 尾 

概述

Poly(U) 聚合酶催化 UTP 或 ATP 转化的 UMP 或 AMP 添加到 RNA 3´ 端,该反应不依赖模板的存在。 

来源

重组 E. coli ,携带有 Schizosaccharomyces pombe Cid1 的 Poly(U) 聚合酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 2
[50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],加入 1 mM UTP(不随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,10 分钟催化 1 nmol 的 UMP 掺入 RNA 所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

2,000 units/ml。

注意事项

在 NEBuffer 2 中 Poly(U) 聚合酶将催化 UTP 或 ATP 转化成 UMP 或 AMP 添加到 RNA 3´ 端。Poly(U) 加尾长度随 UTP 和引物浓度而变化。低引物浓度下(< 100 pmol) Poly(U) 聚合酶的掺入率十分高。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

RNA 5´ 焦磷酸水解酶(RppH) 货 号 #M0356S-NEB酶试剂

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RNA 5´ 焦磷酸水解酶(RppH)                              收藏

RNA 5´ 焦磷酸水解酶(RppH)               货   号                  #M0356S RNA 5´ 焦磷酸水解酶(RppH)               货   号                  #M0356S RNA 5´ 焦磷酸水解酶(RppH)               货   号                  #M0356S

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特性

 将 5´ 三磷酸 RNA 转化为单磷酸 RNA
 制备用于连接的 5´ 磷酸 RNA
 分析 RNA 5´ 末端修饰 

概述

细菌 RNA 5´ 焦磷酸水解酶(RppH)能从 末端三磷酸化的 RNA 中去除焦磷酸盐产生 单磷RNARppH 蛋白又叫 NudH/YgdP,可以将二腺苷五磷酸 (diadenosine penta-phosphate) 分解成 ADPATP
 

来源

纯化自携带有 RppH 基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X NEBuffer 2 [10 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM DTT,10 mM MgCl2,( pH 7.9 @ 25℃ ) ],37℃ 温育。 

随酶提供的试剂

10X NEBuffer 2。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下,30 分钟内将 1 μg 300-mer RNA 转录产物转化成 XRN-1 可消化的 RNA 所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶 货 号 #M0366S-NEB酶试剂

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mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶                              收藏

mRNA 帽结构 2 mRNA 帽结构 2

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特性

 提高 RNA 的翻译效率
 改善 mRNA 在显微注射和转染后的表达 

概述

该酶能在 RNA 5´ 末端紧邻帽结构的第一个核苷酸的 2´ -O 上添加甲基基团。利用 S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体,使带帽 Cap O 甲基化为 Cap 1。 

来源

纯化自携带牛痘病毒 mRNA 帽结构 2´ –O-甲基转移酶基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X 加帽缓冲液
[50 mM Tris-HCl,5 mM KCl,1 mM DTT,1 mM MgCl2,(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。 

单位定义

1 单位是指在 37℃ 的条件下,1 小时内将 10 pmol 80 nt 的带帽 RNA 转录子甲基化所需酶量。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品性能和应用的相关文献请联系我们。  

T3 RNA 聚合酶 货 号 #M0378S-NEB酶试剂

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T3 RNA 聚合酶                              收藏

T3 RNA 聚合酶              货   号                  #M0378S T3 RNA 聚合酶              货   号                  #M0378S

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相关产品

T7 RNA 聚合酶
SP6 RNA 聚合酶

特性

 制备放射性标记的 RNA 探针
 合成用于体外翻译的 RNA
 合成用于 RNA 结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成 反义 RNA,调控基因表达 

概述

T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体,可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中,以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性,可进行准确剪切。实验证实,用靶标 DNA 反向转录所产生的反义 RNA 能特异性阻断体内 mRNA 的翻译。由于RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定,因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。 T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株,该菌株携带含可诱导的 lac UV5 启动子及其控制的 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带可表达T3 基因载体。

反应条件

1X RNAPol 反应缓冲液 [40 mM Tris-HClpH 7.9),6 mM MgCl22 mM 亚精胺,1 mM DTT]。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP(不随酶提供)和带有启动子的模板 DNA,在 37 ℃ 温育。

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下, 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

T3 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;T7 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;SP6 RNA 聚合酶:20,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

RtcB 连接酶 货 号 #M0458S-NEB酶试剂

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RtcB 连接酶                              收藏

RtcB 连接酶                货   号                  #M0458S RtcB 连接酶                货   号                  #M0458S RtcB 连接酶                货   号                  #M0458S RtcB 连接酶                货   号                  #M0458S

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#M0458S
25 次反应
909.00

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特性

    连接单链 RNA 或单链 DNA 3´ –酸基团或 2´ ,3´ –环磷酸基团连接到单链 RNA 5´ –羟基上

含有匹配末端的单链 RNA 环化

 

 

概述

来源于 E. coli RtcB 连接酶能将单链线性RNA 分子中的 3´ –磷酸基或 2´ , 3´ –环磷酸基团与另一个 RNA 分子的 5´ –羟基进行连接。连接反应需有 GTP MnCl2 的参与,并在反应过程中会形成反应中间体鸟苷酸。如底物末端含有 2´ , 3´ –环磷酸基团,需先行水解成 3´ –磷酸基,然后再通过 GMP 进行 末端活化和连接。

 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有 His 标签的 RtcB 连接酶基因。

 

反应条件

1X RtcB 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH8.3 @ 2), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT],补加0.1 mM GTP 1 mM MnCl237℃ 温育。

 

 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

 

浓度

15 μM  

参考文献

 有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.neb-china.com www.neb.com  

yDcpS 货 号 #M0463S-NEB酶试剂

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yDcpS                              收藏

yDcpS                货   号                  #M0463S yDcpS                货   号                  #M0463S yDcpS                货   号                  #M0463S yDcpS                货   号                  #M0463S

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20 µl (4,000 U)
3,229.00

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特性

*   mRNA 帽结构去除,可用带标记的 GTP 类似物进行重新加帽
*   初级转录本 5’ 末端的生物素修饰
*   Recappable-seq

概述

 yDcpS 是脱帽酶,来源于酿酒酵母(S. cerevisiae),可水解 mRNAm7G 帽结构中 gamma 和 beta 位磷酸基团之间的磷酸二酯键,产物为二磷酸化的 5’末端和 m7GMP。yDcpS 可使全长 mRNA 脱帽,留下的 5’二磷酸末端可用牛痘病毒加帽酶重新加帽。

反应条件

 1X yDcpS 反应缓冲液,37℃ 温育。

浓度

 200,000 units/ml

耐热 RNase H 货 号 #M0523S-NEB酶试剂

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耐热 RNase H                              收藏

耐热 RNase H                货   号                  #M0523S 耐热 RNase H                货   号                  #M0523S 耐热 RNase H                货   号                  #M0523S 耐热 RNase H                货   号                  #M0523S

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250 units
1,719.00

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特性

 耐热 RNase H                货   号                  #M0523S

概述

 耐热 RNaseH 特异性识别并切割 RNA-DNA 杂交体中 RNA 序列的磷酸二酯键,同时保持DNA 序列完整。这种热稳定的核酸酶具有与大肠杆菌 RNaseH 相同的酶学性质,但在更高的温度下具有活性。


反应条件:1X RNase H 反应缓冲液,50℃ 温育。
单位定义:1 单位指 50 μl 反应体系中,50℃ 条件下,20 分钟从 40 pmol荧光标记的 25 bp RNA-DNA 杂交链中水解得到 1 nmol 核糖核苷酸所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。www.neb-china.com 或www.neb.com 。
 
浓度:5,000 units/ml

 

Sce 假尿嘧啶合成酶 I 货 号 #M0526S-NEB酶试剂

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Sce 假尿嘧啶合成酶 I                              收藏

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5,000 pmol
919.00

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特性

 Ÿ   Sce PUS1 用于在体外将单链 RNA 中尿嘧啶转化为假尿嘧啶

Ÿ   Sce PUS1 是一款独立的酶,不需要 RNA 向导或辅助因子即可修饰 RNA

Ÿ   使用 Sce PUS1 对特定序列进行假尿苷修饰可以替代通过 RNA 聚合酶随机掺入修饰核苷酸的方法

产品说明

 该酶是创新酶(Enzyme for Innovation, EFI)。创新酶工程由 NEB 发起,旨在为科研界提供独一无二的酶,从而为新的创新应用的发现创造条件。这些酶均具有独特的功能和特性。

Sce 假尿嘧啶合成酶 ISce PUS1)可将单链 RNA 中尿嘧啶转化为假尿嘧啶,对单链 RNA 中尿嘧啶的转化率高于双链 RNA。最佳底物为≥15 nt无特殊结构的 RNA

Sce 假尿嘧啶合成酶 I            货   号                  #M0526S

E. coli RNA 聚合酶,核心酶 货 号 #M0550S-NEB酶试剂

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E. coli RNA 聚合酶,核心酶                              收藏

E. coli RNA 聚合酶,核心酶             货   号                  #M0550S

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100 units
2,129.00

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E. coli RNA 聚合酶, 核心酶

E. coli RNA 聚合酶, 全酶

特性

 E. coli 启动子启动的 RNA 合成
 转录起始研究
 PURExpress 体外转录 

概述

E. coli RNA 聚合酶,核心酶由 5 种亚基组成,分别为 α、α、β´ 、β、和 ω。此酶无 σ 因子,因此不会对细菌和噬菌体 DNA 启动子特异性启动转录。本酶保留了从非特异性启动序列转录 RNA 的功能。添加 σ 因子后,本酶可从特定细菌和噬菌体的特异启动子启动合成 RNA。核心酶分子量约 400 kDa。
E. coli RNA 聚合酶,全酶由核心酶和 σ 因子 70 组成,能从 σ 因子 70 特定的细菌和噬菌体启动子处起始合成RNA。 

来源

大肠杆菌 RNA 聚合酶,核心酶是由大肠杆菌 BL21 分离而得。σ 因子 70 是由携带 σ 因子 70 克隆基因的大肠杆菌纯化而来。 

反应条件

40 mM Tris-HCl,pH 7.5,150 mM KCl,10 mM MgCl2,0.01% Triton-X-100,1 mM DTT,每种 rNTP 各 0.5 mM 和 DNA 模板。37℃ 温育。 

质保声明

无 DNA 内、外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位是指在 37℃ 条件下,10 分钟内可将 1 nmol NTP 掺入 RNA 所需的酶量,单位活性检测条件请联系我们。 www.neb-china.com 或 www.neb.com 。 

浓度

1,000 units/ml。 

E. coli RNA 聚合酶,全酶 货 号 #M0551S-NEB酶试剂

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E. coli RNA 聚合酶,全酶                              收藏

E. coli RNA 聚合酶,全酶             货   号                  #M0551S

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相关产品

E. coli RNA 聚合酶, 核心酶

E. coli RNA 聚合酶, 全酶
 

特性

 E. coli 启动子启动的 RNA 合成
 转录起始研究
 PURExpress 体外转录 

概述

E. coli RNA 聚合酶,核心酶由 5 种亚基组成,分别为 α、α、β´ 、β、和 ω。此酶无 σ 因子,因此不会对细菌和噬菌体 DNA 启动子特异性启动转录。本酶保留了从非特异性启动序列转录 RNA 的功能。添加 σ 因子后,本酶可从特定细菌和噬菌体的特异启动子启动合成 RNA。核心酶分子量约 400 kDa。
E. coli RNA 聚合酶,全酶由核心酶和 σ 因子 70 组成,能从 σ 因子 70 特定的细菌和噬菌体启动子处起始合成RNA。  

来源

大肠杆菌 RNA 聚合酶,核心酶是由大肠杆菌 BL21 分离而得。σ 因子 70 是由携带 σ 因子 70 克隆基因的大肠杆菌纯化而来。  

反应条件

40 mM Tris-HCl,pH 7.5,150 mM KCl,10 mM MgCl2,0.01% Triton-X-100,1 mM DTT,每种 rNTP 各 0.5 mM 和 DNA 模板。37℃ 温育。  

质保声明

无 DNA 内、外切酶和 RNase 污染。  

单位定义

1 单位是指在 37℃ 条件下,10 分钟内可将 1 nmol NTP 掺入 RNA 所需的酶量,单位活性检测条件请联系我们。 www.neb-china.com 或 www.neb.com 。  

浓度

1,000 units/ml。  

NudC 焦磷酸酶 货 号 #M0607S-NEB酶试剂

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NudC 焦磷酸酶                              收藏

NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S

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#M0607S
250 pmol
889.00

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特性

·对含 ADP 的、非经典启动核苷酸,如 NAD+ 和 NADH 进行脱帽,生成可连接的 5′ 末端为单磷酸的基团
·水解 NADH 生成 AMP 和还原型烟酰胺单磷酸核苷(NMNH);水解 NAD+ 产生 AMP和烟酰胺单磷酸核苷(NMN+
·水解二磷酸二核苷酸和含有 ADP 基团的代谢辅助因子,如 AppA、FAD、辅酶 A 等
·当 NAD+ 是 RNA 的 5’ 启动核苷酸时,可用于 NAD+ 脱帽或去除 NAD
·适用于基于连接方法的研究,如 5’ RACE 和 RNA 测序,以检测和鉴定含有非经典启动核苷酸的RNA
 
该酶是一种创新酶(EFI,Enzyme for Innovation)。EFI 是由 NEB 发起的一个项目,旨在为科学界提供独特的酶,以期发现新应用。这类酶既有趣又特别。

概述

 NudC 是 NUDIX 焦磷酸酶家族中的一员,可高效水解带 NAD+ 帽 和 NADH 帽的 RNA,生成连接可用的带 5′ 单磷酸末端的 RNA(NAD+ 脱帽或去除 NAD)(1)。研究表明:nudC 基因的缺失增加了大肠杆菌中 NAD+ 帽化 RNA 的比例(2)

 
该酶还能以不同的效率水解含 ADP 基团的小分子,如 NADH、NAD+、AppA、ADP-核糖、ADP-葡萄糖和代谢辅助因子,如 FAD、辅酶 A 和乙酰辅酶 A(3 和未发表结果)。由于其对各种二核苷酸和代谢辅因子的活性,该酶有望通过对帽的焦磷酸化水解作用和核苷酸产物的分析,来识别带有非经典帽结构的 RNA,或使用基于 5′ 连接的方法(如 RNA 测序或 5′ RACE(4))来识别带有 5′ 单磷酸末端的 RNA。
NudC 焦磷酸酶                 货   号                  #M0607S
随酶提供的试剂
NEBuffer™ 3.1
100 mM DTT
 
浓度
10 µM
 
单位定义
在 1X NEBuffer 3.1 和 5 mM DTT 的反应条件中,加入 1 µM NudC,37℃ 温育 30 分钟,能将 200 µM 或更多 NAD+ 水解成 NMN+ 和 AMP。
 
反应条件
1X NEBuffer™ 3.1,补加 5 mM DTT,37℃ 温育。

热失活
65℃ 加热 10 分钟。
 
储存温度
-20℃
 
质保声明 
NudC 焦磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。
 
参考文献

1.  Frick D.N. and Bessman M.J. (1995).  J. Biol. Chem. 270, 1529-1534.

2.  Cahová, H. et al. (2015). Nature. 519, 374-377.

3.  Höfer K. et al. (2016). Nat Chem Biol. 12, 730-734.

4.  Vvedenskaya I.O., et al (2018). Mol Cell. 70, 553-564.e9.

 

 

mRNA 脱帽酶 货 号 #M0608S-NEB酶试剂

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mRNA 脱帽酶                              收藏

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#M0608S
2,000 U
1,179.00

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特性

 mRNA 脱帽酶可使带有 m7G 帽结构的 mRNA 脱帽,产生 5’单磷酸末端。

  ·有效替代烟草酸焦磷酸酶(TAP

  ·去除 Cap 0 Cap 1 的效率相同

  ·适用于 5RLM-RACE RNA-seq

  ·1 µl 的酶可在 15 min 内将 20 µg mRNA1.7 kb)完成脱帽

产品信息

 mRNA 脱帽酶可以将 mRNA 5’末端的 7-甲基鸟苷帽(m7G)结构去除,产生 5’单磷酸末端并释放 m7GDPmRNA 脱帽酶能够使各种长度的 mRNA 脱帽,对 Cap 0 Cap 1 的去除效率相同。mRNA 脱帽酶也可将 5’三磷酸末端转化为 5’单磷酸,但转化效率相对较低。5’单磷酸化的 RNA 可用于多种下游应用,包括 5RNA 连接酶介导的 RACERNA-seq 5→3’核酸外切酶消化。

mRNA 脱帽酶(MDE)和烟草酸焦磷酸酶(TAP)脱帽活性的比较

mRNA 脱帽酶            货   号                  #M0608S

A)用 mRNA 脱帽酶(MDE)或其它品牌的烟草酸焦磷酸酶(TAP)对 500 nM 5’加帽 RNA25 nt)溶液进行脱帽反应。每种酶使用各自适合的反应缓冲液,且反应体积相同。其它品牌的 TAP 浓度未知,经比较显示 0.3 nM MDE 1 µl TAP 活性相当。脱帽反应后的反应产物使用毛细管电泳分析。需要注意的是,在阴性对照中,所用的合成底物中都存在 10%的三磷酸 RNA。(图 B)测试了在其它条件不变的情况下,引入不同长度、不同种类末端的 RNA,是否会影响 MDE 的活性,在反应中添加 500 ng Jurkat 细胞总 RNA。结果显示:MDE 的脱帽活性不受影响,而 TAP 活性则显着降低,这说明 MDE 的脱帽能力在该测试条件下更稳定。

随酶提供的试剂

 

 

储存温度 (°C)

浓度

mRNA Decapping Enzyme Reaction Buffer

   

 

储存温度

 

-20°C

Hi-T7 RNA 聚合酶 货 号 #M0658S-NEB酶试剂

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Hi-T7 RNA 聚合酶                              收藏

Hi-T7 RNA 聚合酶                货   号                  #M0658S Hi-T7 RNA 聚合酶                货   号                  #M0658S Hi-T7 RNA 聚合酶                货   号                  #M0658S Hi-T7 RNA 聚合酶                货   号                  #M0658S

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#M0658S
5,000 units
1,019.00

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特性

Hi-T7 RNA 聚合酶                货   号                  #M0658S

反应条件

 1X RNAPol 反应缓冲液。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP(不随酶提供)和带有启动子的模板 DNA。于 37℃( T3、T7 和 SP6 )或 50℃(Hi-T7)条件下温育。

概述

 T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体,可将目的基因序列克隆到T3、 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中,以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。


Hi-T7 RNA 耐热聚合酶是经基因工程改造的热启动 T7 RNA 聚合酶。Hi-T7 使用 T7 RNA 聚合酶启动子。在合成过程中,可提高加帽效率并消除 dsRNA 副产物的产生
 

单位定义

 1 单位指在 37℃50℃(Hi-T7)条件下,1 小时内将 1 nmol ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.neb-china.com www.neb.com

浓度

 T3 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;T7 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;SP6 RNA 聚合酶:20,000 units/ml; Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶:50,000 units/ml。

牛痘病毒加帽系统 货 号 #M2080S-NEB酶试剂

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牛痘病毒加帽系统                              收藏

牛痘病毒加帽系统              货   号                  #M2080S 牛痘病毒加帽系统              货   号                  #M2080S

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#M2080S
400 units
1,539.00

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相关产品

 
 

小鼠 RNase 抑制剂

特性

 体内或体外翻译前 mRNA 的加帽
 标记 mRNA 5´ 末端

概述

牛痘病毒加帽体系利用牛痘病毒加帽酶及其它组份,将 7-甲基鸟苷帽结构(Cap 0)加到 RNA 的 5´ 末端。在真核生物中,该类末端帽结构影响到 mRNA 的稳定、转运和翻译。使用酶促反应为 RNA 加帽是一种简单有效的方法,对用于体外转录、转染和显微注射的 RNA,能改善其稳定性和翻译能力。另外,反应中所用到的标记 GTP 还能提供一种便捷的标记方法,将 5´ 末端带有三磷酸的任何 RNA 进行标记。
牛痘病毒加帽酶由两个亚基(D1 和 D12)组成,具有三种酶活性(D1 亚基具有 RNA 三磷酸酶和鸟苷转移酶活性;D12 亚基具有鸟嘌呤甲基转移酶活性),所有这些活性都是添加一个完整的 Cap 0 结构,即 m7Gppp (5´ ) N 所必需的。加帽反应不仅高效而且方向正确,不像共转录会添加上一些帽类似物。 

来源

携带牛痘病毒(WR)加帽酶基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X 加帽反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),5 mM KCl,1 mM DTT,1 mM MgCl2],37℃ 温育。 

提供的试剂

牛痘病毒加帽酶
加帽缓冲液(10X)
GTP 溶液(10 mM)
SAM 溶液(32 mM) 

质保声明

无单链或双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下,1 小时内将 10 pmol (α-32P) GTP 掺入到一条 80 个核苷酸的转录产物上所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

多重 PCR 5X 预混液 货 号 #M0284S-NEB酶试剂

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 常规 PCR

多重 PCR 5X 预混液                              收藏

多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S

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100 次反应 (50 μl 反应体系)
2,729.00

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Taq DNA 聚合酶(提供标准 Taq 缓冲液)
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Taq DNA 聚合酶信息

多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S

概述

Taq DNA 聚合酶是一种耐热聚合酶,具有 5´ →3´ 聚合酶活性和 5´ 结构特异性核酸内切酶活性。该酶是 PCR 中应用最广泛的酶。为了便于各种 PCR 反应,Taq DNA 聚合酶配套有不同的反应缓冲液。标准 Taq缓冲液专门针对已有的 PCR 平台所设计,它是 DHPLC 和高通量实验的理想选择。NEB 设计的 ThermoPol 缓冲液能够提高反应产量,即使是在苛刻的条件下也表现不凡。更为方便的是,Taq DNA 聚合酶还有试剂盒以及预混液两种剂型可供选择。此外还提供了 Quick-Load Taq 2X 预混液剂型,可用于直接凝胶上样。

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为了加样方便,Taq 与 Taq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择。Taq 2X 预混液还有 Quick-Load 的形式,可用于直接凝胶上样。Taq PCR 试剂盒包含 Taq DNA 聚合酶、dNTP 混合液、缓冲液、MgCl和紫色 Quick-Load 2-Log DNA Ladder。
 
多重 PCR 5X 预混液配方经过专门优化可以提高多重 PCR 反应的表现。

浓度

5,000 units/ml。

Taq 缓冲液选择表

多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S

ElectroLigase® 电转连接酶 货 号 #M0369S-NEB酶试剂

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

ElectroLigase® 电转连接酶                              收藏

ElectroLigase® 电转连接酶                货   号                  #M0369S ElectroLigase® 电转连接酶                货   号                  #M0369S ElectroLigase® 电转连接酶                货   号                  #M0369S ElectroLigase® 电转连接酶                货   号                  #M0369S

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#M0369S
50 次反应
1,489.00

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特性

 电转化的最佳连接酶
 载体构建
 接头连接
 片段组装
 文库构建
 TA 克隆 

概述

电转连接酶由 T4 DNA 连接酶和经过优化的即用型 2X 缓冲液组成,其缓冲液内含专属连接增强剂,不含 PEG。该组合专门用于促进各种 DNA 末端(平末端、粘性末端、TA 末端)的高效连接。无需脱盐和纯化,电转连接酶可直接用于电转化的细胞。因为其缓冲液在 -20℃ 储存时为液体状态,所以使用时无需解冻,从而简化了反应起始步骤。通过优化酶和缓冲液的比例,室温下即可快速连接所有末端类型的 DNA。即使当 DNA 量少且浓度低时仍可进行亚克隆连接,从而节省了用户宝贵的 DNA 样品。此外,无需稀释和纯化,反应液可直接转化多种电转感受态大肠杆菌。 

来源

纯化自重组 E. coli 菌株,含有编码 T4 DNA 连接酶的基因。 

反应条件

11 μl 反应体系,加入 1X 电转连接酶反应缓冲液、DNA 底物和 1 μl 电转连接酶,25℃ 温育 30 分钟。 

质保声明

电转连接酶经过严格的质量控制检测,以确保最高的纯度和反应效率。详情请联系我们。 

注意事项

该产品在 -20℃ 储存时为液体状态。 

Bst DNA 聚合酶,全长 货 号 #M0328S-NEB酶试剂

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst DNA 聚合酶,全长                              收藏

Bst DNA 聚合酶,全长               货   号                  #M0328S Bst DNA 聚合酶,全长               货   号                  #M0328S Bst DNA 聚合酶,全长               货   号                  #M0328S

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#M0328S
500 units
759.00

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特性

 DNA 等温扩增
 引物延伸
 
Bst DNA 聚合酶,全长               货   号                  #M0328S

概述

全长的 Bst DNA 聚合酶来源于 Bacillus stearothermophilus,它具有 5´→3´ 聚合酶活性和双链特异的 5´→3´ 核酸外切酶活性,但缺失 3´→5´ 核酸外切酶活性。 

来源

携带有 Bacillus stearothermophilus 基因的 E. coli 菌株。 

浓度

5,000 units/ml。

热失活

80℃ 20 分钟。

使用注意

 

建议反应温度不要超过 70℃。Bst DNA 聚合酶,全长不能用于热循环测序或 PCR。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。