上海金畔生物科技有限公司供应酵母蛋白小量提取试剂盒 Jinpan P1140量大优惠,咨询 :
酵母蛋白小量提取试剂盒 Jinpan P1140
上海金畔生物科技有限公司供应酵母蛋白小量提取试剂盒 Jinpan P1140量大优惠,咨询 : 2743691513
酵母蛋白小量提取试剂盒
一,试剂盒组份
组份 |
(50T) |
(100T) |
酵母裂解液 |
50mL |
100mL |
玻璃珠 |
3g |
6g |
PMSF(100X) |
1ml |
1ml |
β-巯基乙醇 |
1ml |
1ml |
二,说明
酵母蛋白小量提取试剂盒用于从酵母细胞中分提取可溶性各种蛋白。提取的蛋白可用于各种常规实验。如PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。酵母裂解液中不含任何去污剂,可用各种方法测定蛋白含量。
三,操作步骤
1. 酵母常规培养。
2. 离心收集酵母。大概50-100ul的积压体积。*弃上清。
3. 加入酵母裂解液,吹打重重悬。再次离心,弃上清(此步的目的是将酵母洗一下,也可以省掉此步)。
4. 在酵母菌中,再加入0.5ml裂解液,加入5ul PMSF,5ulβ–巯基乙醇(在通风处操作)。加入50mg左右的玻璃珠,预冷,涡流10min(每涡流1min,可以冰上冷却1min)。
5. 离心,取上清。进行下一步实验或者-70℃储存。
四,注意事项
1,不同的酵母可能须涡流时间不同,可根据实际情况延长或者缩短时间。(比如蛋白浓度高低,蛋白降解情况等。)
2,如果一个月内能够用完,可将β–巯基乙醇按照百分之一的量一次性全部加入酵母裂解液中。2-8度保存。
3,因为是采用物理方法破解酵母壁,所以对于酶等一些易失活蛋白可能并不适合。
4,为了你的实验安全,请戴手套操作。并注意通风。