Qiagen 12163质粒大提试剂盒

上海金畔生物科技有限公司供应Qiagen 12163质粒大提试剂盒量大优惠,咨询 :

Qiagen 12163质粒大提试剂盒

QIAGEN Plasmid Maxi Kit
纯化zui高产量可达500 μg的转染级别纯度的质粒或科斯质粒DNA
纯度相当于2倍氯化铯梯度离心
高重现性的产量和转染级别纯度
经济实惠
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QIAGEN Plasmid Kits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级纯质粒DNA。该试剂盒可制备多至20 μg (Mini)、100 μg (Midi)、500 μg (Maxi)、2.5 mg (Mega)或10 mg (Giga)的质粒DNA。离心法进行裂解液澄清和异丙醇沉淀。
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传统的QIAGEN Plasmid Giga Kits应用重力流阴离子交换柱QIAGEN-tip 500 高效纯化质粒DNA,也单独提供QIAGEN-tips 500。QIAGEN Plasmid Maxi Kit 特性
预期产量*柱子容量培养体积†
Up to 500 µg500 µg100 ml -500 ml

* 实际产量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌、培养基和培养体积。
† 培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌和培养基。
原理
QIAGEN *的阴离子交换柱于核酸纯化,其的抽提性能可确保DNA纯度相当于甚至高于两次CsCl梯度离心的产物(见图”QIAGEN Plasmid kits制备超纯的质粒DNA)。预装的QIAGEN柱子以重力流方式纯化,不会流干,将质粒制备所需的手工操作时间降至zui少。整个质粒纯化系统避免了苯酚、氯仿、ethidium bromide和CsCl等有毒物质,将对用户和环境的危害降至zui低。
操作步骤
应用QIAGEN Plasmid Kits纯化过程中,通过离心取出细菌裂解液。然后将澄清的裂解液装入阴离子交换柱,在适当的低盐浓度和pH值条件下,阴离子交换柱会选择性地结合质粒DNA。RNA、蛋白质、代谢物和其他小分子杂质通过中盐浓度洗涤去除,应用高盐浓度缓冲夜洗脱超纯的质粒DNA(见流程图)通过异丙醇沉淀浓缩并脱盐DNA,离心法收集 DNA。
应用
QIAGEN Plasmid Kits 纯化所得的质粒DNA非常适合于诸如转染(见图”转染效率 Vs. 质粒纯化方法”)、克隆、手动或自动测序(包括毛细管测序)和体外转录等应用。
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Qiagen 12145纯化转染级质粒试剂盒100T

Qiagen 12145 纯化转染级质粒试剂盒高通量纯化血液或无细胞体液中的总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA,病毒DNA,zui高可达60 μg总DNA

快速纯化高品质,即用型DNA
无有机提取或乙醇沉淀
持续的高产量
*去除污染物和下游反应抑制物
 
Qiagen 12145 纯化转染级质粒试剂盒用于处理多至200 μl 的人全血, midi kits 处理量为0.3-2 ml,maxi kits为3-10 ml。QIAamp Mini、Midi 和Maxi离心管可在离心机或真空底座上制备样品。QIAamp DNA Blood Mini Kit 可在QIAcube上全自动进行DNA纯化。
 
Qiagen 12145 纯化转染级质粒试剂盒
Qiagen 28306 QIAquick Nucleotide Removal Kit (250) 从酶促反应物中回收纯化  
Qiagen 28304 QIAquick Nucleotide Removal Kit (50) 从酶促反应物中回收纯化  
Qiagen 28704 QIAquick Gel Extraction Kit (50) 胶回收试剂盒  
Qiagen 28706 QIAquick Gel Extraction Kit (250) 胶回收试剂盒  
Qiagen 30210 Ni-NTA Agarose (25 ml) 6His蛋白纯化柱料  
Qiagen 51104 QIAamp DNA Blood Mini Kit (50) 血液DNA提取试剂盒  
Qiagen 51106 QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) 血液DNA提取试剂盒  
Qiagen 51183 QIAamp DNA Blood Midi Kit (20) 血液DNA提取试剂盒  
Qiagen 51185 QIAamp DNA Blood Midi Kit (100) 血液中提试剂盒  
Qiagen 51304 QIAamp DNA Mini Kit (50) 人类组织和细胞DNA提取试剂盒  
Qiagen 51306 QIAamp DNA Mini Kit (250) 人类组织和细胞DNA提取试剂盒  
Qiagen 52304 QIAamp RNA Blood Mini Kit (50) 新鲜全血样本胞内RNA的分离纯化  
Qiagen 52904 QIAamp Viral RNA Mini Kit (50) RNA病毒提取试剂盒  
Qiagen 52906 QIAamp Viral RNA Mini Kit (250) RNA病毒提取试剂盒  
Qiagen 56404 QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (50) 从石蜡包埋组织中纯化DNA试剂盒  
Qiagen 59104 EpiTect Bisulfite Kit (48) 甲基化转化试剂盒  
Qiagen 69104 DNeasy Plant Mini Kit (50) 从植物细胞和组织或真菌样本中纯化总DNA  
Qiagen 69504 DNeasy Blood & Tissue Kit (50) 血液,组织DNA提取试剂盒  
Qiagen 69506 DNeasy Blood & Tissue Kit (250) 血液,组织DNA提取试剂盒  
Qiagen Qiagen 70022 Oligotex mRNA Mini Kit (12) 从总RNA、细胞核组织中纯化及体外转录产物回收

12143 QIAGEN 纯化zui高产量可达100ug的转染级别纯度的质粒或科斯质粒DNA • 纯度相当于2倍氯化铯梯度离心 • 高重现性的产量和转染级别纯度 • 经济实惠 •使用LyseBlue,获得*的裂解和zui大的DNA产量 产品描述 QIAGEN PlasmidKits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级纯质粒DNA。该试剂盒可制备多至20 μg (Mini)、100 μg (Midi)、500 μg(Maxi)、2.5 mg (Mega)或10 mg (Giga)的质粒DNA。离心法进行裂解液澄清和异丙醇沉淀。

Qiagen 12145纯化转染级质粒试剂盒100T

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Qiagen 12145纯化转染级质粒试剂盒100T

Qiagen 12145 纯化转染级质粒试剂盒高通量纯化血液或无细胞体液中的总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA,病毒DNA,zui高可达60 μg总DNA

快速纯化高品质,即用型DNA
无有机提取或乙醇沉淀
持续的高产量
*去除污染物和下游反应抑制物
 
Qiagen 12145 纯化转染级质粒试剂盒用于处理多至200 μl 的人全血, midi kits 处理量为0.3-2 ml,maxi kits为3-10 ml。QIAamp Mini、Midi 和Maxi离心管可在离心机或真空底座上制备样品。QIAamp DNA Blood Mini Kit 可在QIAcube上全自动进行DNA纯化。
 
Qiagen 12145 纯化转染级质粒试剂盒
Qiagen 28306 QIAquick Nucleotide Removal Kit (250) 从酶促反应物中回收纯化  
Qiagen 28304 QIAquick Nucleotide Removal Kit (50) 从酶促反应物中回收纯化  
Qiagen 28704 QIAquick Gel Extraction Kit (50) 胶回收试剂盒  
Qiagen 28706 QIAquick Gel Extraction Kit (250) 胶回收试剂盒  
Qiagen 30210 Ni-NTA Agarose (25 ml) 6His蛋白纯化柱料  
Qiagen 51104 QIAamp DNA Blood Mini Kit (50) 血液DNA提取试剂盒  
Qiagen 51106 QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) 血液DNA提取试剂盒  
Qiagen 51183 QIAamp DNA Blood Midi Kit (20) 血液DNA提取试剂盒  
Qiagen 51185 QIAamp DNA Blood Midi Kit (100) 血液中提试剂盒  
Qiagen 51304 QIAamp DNA Mini Kit (50) 人类组织和细胞DNA提取试剂盒  
Qiagen 51306 QIAamp DNA Mini Kit (250) 人类组织和细胞DNA提取试剂盒  
Qiagen 52304 QIAamp RNA Blood Mini Kit (50) 新鲜全血样本胞内RNA的分离纯化  
Qiagen 52904 QIAamp Viral RNA Mini Kit (50) RNA病毒提取试剂盒  
Qiagen 52906 QIAamp Viral RNA Mini Kit (250) RNA病毒提取试剂盒  
Qiagen 56404 QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (50) 从石蜡包埋组织中纯化DNA试剂盒  
Qiagen 59104 EpiTect Bisulfite Kit (48) 甲基化转化试剂盒  
Qiagen 69104 DNeasy Plant Mini Kit (50) 从植物细胞和组织或真菌样本中纯化总DNA  
Qiagen 69504 DNeasy Blood & Tissue Kit (50) 血液,组织DNA提取试剂盒  
Qiagen 69506 DNeasy Blood & Tissue Kit (250) 血液,组织DNA提取试剂盒  
Qiagen Qiagen 70022 Oligotex mRNA Mini Kit (12) 从总RNA、细胞核组织中纯化及体外转录产物回收

12143 QIAGEN 纯化zui高产量可达100ug的转染级别纯度的质粒或科斯质粒DNA • 纯度相当于2倍氯化铯梯度离心 • 高重现性的产量和转染级别纯度 • 经济实惠 •使用LyseBlue,获得*的裂解和zui大的DNA产量 产品描述 QIAGEN PlasmidKits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级纯质粒DNA。该试剂盒可制备多至20 μg (Mini)、100 μg (Midi)、500 μg(Maxi)、2.5 mg (Mega)或10 mg (Giga)的质粒DNA。离心法进行裂解液澄清和异丙醇沉淀。

Qiagen12143 质粒中提试剂盒

上海金畔生物科技有限公司供应Qiagen12143 质粒中提试剂盒量大优惠,咨询 :

12143 QIAGEN 纯化zui高产量可达100ug的转染级别纯度的质粒或科斯质粒DNA • 纯度相当于2倍氯化铯梯度离心 • 高重现性的产量和转染级别纯度 • 经济实惠 •使用LyseBlue,获得*的裂解和zui大的DNA产量 产品描述 QIAGEN PlasmidKits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级纯质粒DNA。该试剂盒可制备多至20 μg (Mini)、100 μg (Midi)、500 μg(Maxi)、2.5 mg (Mega)或10 mg (Giga)的质粒DNA。离心法进行裂解液澄清和异丙醇沉淀。

Qiagen12123 纯化转染级质粒试剂盒

上海金畔生物科技有限公司供应Qiagen12123 纯化转染级质粒试剂盒量大优惠,咨询 :

QIAGEN Plasmid Mini Kit (25) 12123 QIAGEN 纯化多至20 µg转染级纯质粒或科斯质粒DNA •纯化得到相当于2次氯化铯梯度离心得到的DNA纯度 • 重复性好,高产量质粒DNA • 经济实惠 •使用LyseBlue,获得*的裂解和zui大的DNA产量 产品描述 QIAGEN PlasmidKits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级纯质粒DNA。该试剂盒可制备多至20 μg (Mini)、100 μg (Midi)、500 μg(Maxi)、2.5 mg (Mega)或10 mg (Giga)的质粒DNA。离心法进行裂解液澄清和异丙醇沉淀。

Qiagen 80204 AllPrep DNA/RNA Mini Kit

从细胞和组织样本中同时纯化DNA和RNA
•从同一样本中获得高品质DNA和RNA
•从珍稀样本中得到较大量的DNA和RNA
•简短流畅的操作流程,实现快速纯化
•即用型DNA和RNA,用于多种下游应用

从细胞和组织样本中同时纯化DNA和RNA

  • 从同一样本中获得高品质DNA和RNA
  • 从珍稀样本中得到较大量的DNA和RNA
  • 简短流畅的操作流程,实现快速纯化
  • 即用型DNA和RNA,用于多种下游应用

AllPrep DNA/RNA Mini Kit可以从同一个生物样本中同时纯化基因组DNA和总RNA。通过新型的AllPrep DNA离心柱纯化DNA,然后AllPrep柱流出液经过RNeasy MinElute离心柱纯化得到RNA。该试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动运行,最多可处理107个细胞或30 mg的组织样本。

Performance

简单的流程可从同一样本中纯化高品质DNA和RNA。纯化得到的基因组DNA的平均长度为15–30 kb,适用于多重PCR(参见”Multiplex PCR of 8 targets”)。纯化得到高品质的总RNA,RIN值接近10,表明RNA是完整的(参见”Simultaneous purification of total RNA and genomic DNA”和”High-quality total RNA”)。AllPrep DNA/RNA纯化技术纯化得到的基因组DNA和总RNA在下游分析中可获得可靠的定量结果(参见”Wide dynamic range”)。

Principle

AllPrep DNA/RNA Mini Kit用于从单个细胞或组织样本中纯化基因组DNA和总RNA。由于无需将样本分为两份单独进行纯化,可获得较大产量的DNA和RNA。经纯化的DNA和RNA可分别洗脱并直接用于多种下游应用。

Procedure

简单的流程可在35分钟内从同一样本中纯化高品质DNA和RNA(参见”AllPrep DNA/RNA procedure”)。培养细胞和易裂解组织均可处理,应用新型AllPrep DNA离心柱纯化基因组DNA,RNeasy MinElute离心柱纯化总RNA。另可选择补充操作流程纯化蛋白质。纯化所得蛋白是变性的,可用于诸如SDS-PAGE、Western印迹和2D凝胶电泳等应用。对于经常从单一样本中纯化DNA、RNA和蛋白质的实验,可使用AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit。

在Buffer RLT Plus(AllPrep DNA/RNA Mini Kit中提供)中破碎并匀浆组织时,可能出现很多泡沫。可在开始破碎和匀浆前,在Buffer RLT Plus加入Reagent DX(单独订购),终浓度为0.5%(v/v),即可有效消除泡沫。Reagent DX已经过精密测试,对于RNA纯度和诸如real-time RT-PCR等下游应用没有影响。添加了Reagent DX的Buffer RLT Plus可在室温(15–25ºC)下至少保存9个月。

Applications

纯化的基因组DNA的平均长度为15–30 kb,取决于匀浆情况,适合多种应用,包括:Southern印迹、斑点杂交和狭缝印迹、DNA甲基化分析、PCR和多重PCR。

经纯化的总RNA可即用于多种应用,包括:RT‑PCR和real‑time RT‑PCR、差异显示、cDNA合成、Northern印迹、斑点杂交和狭缝印迹、微阵列分析。

另可选择补充操作流程纯化蛋白质。纯化所得蛋白是变性的,可用于以下应用:SDS-PAGE 、Western印迹、2D凝胶电泳。 

 

Features

Specifications

应用 PCR, real-time PCR, microarray, blotting
洗脱体积 100 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Cells, tissue
处理 Manual (centrifugation)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Genomic DNA, total RNA
样本量 1 x 10e7/30 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 35 minutes
产量 Varies

Qiagen 69504/69506

从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA
•为各种类型样本提供标准化的纯化方法
•即使是特殊类型起始样本也可以获得高产量DNA
•高品质DNA
•经过优化的操作方法适合处理多种起始样本
•可选择离心柱方式或96孔板高通量方式

从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA

  • 为各种类型样本提供标准化的纯化方法
  • 即使是特殊类型起始样本也可以获得高产量DNA
  • 高品质DNA
  • 经过优化的操作方法适合处理多种起始样本
  • 可选择离心柱方式或96孔板高通量方式

DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅胶膜技术的离心柱或96孔板方式快速方便的纯化DNA。大多数样本可直接用蛋白酶K消化处理,无需机械破碎,减少了手动操作时间。为特殊样本提供优化的纯化方法,获得高重复性、高纯度的DNA,用于生物研究、基因型分析和兽医病理研究。DNA纯化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。

 

Performance

高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能够从动物血液和组织样本中纯化大量的总DNA(参见下表和”DNA yields”)。优化的实验方案可确保非标准样本的高产量,如动物毛发(参见”Genotyping of horses”)和培养细胞、固定的组织,或者革兰氏阳性和阴性细菌。*的在线实验方案参考文库,可从酵母、昆虫、毛发和其他类型样本中纯化DNA。

使用DNeasy Blood & Tissue Kits从动物组织中纯化的DNA产量
样本来源 样本量 DNA(µg)
哺乳动物血液 100 µl 3–6
鸟类血液 5 µl 9–40
HeLa细胞 2 x 106 15–25
肝脏 25 mg 10–30
25 mg 15–30
肾脏 25 mg 15–30
脾脏 10 mg 5–30
小鼠尾 1.2 cm(尾部) 10–25
大鼠尾 0.6 cm(尾部) 20–40
猪耳 25 mg 10–30
马毛 10根毛发 2–4
鱼鳍 20 mg 10–20
鱼卵(鲭鱼) 10 mg 5–10
 

DNeasy Blood & Tissue Kits简化了从多种样本类型中纯化DNA的流程,包括在生命科学、兽医学和基因分型研究应用中常见的动物种类(参见”High-quality DNA”)。纯化得到的DNA不含PCR抑制剂,能在标准多重(参见”Efficient 16plex PCR”)real-time PCR(参见”Real-time PCR”)中进行灵敏的检测。DNeasy Blood & Tissue Kits确保了可靠的实验结果,从转基因小鼠的实验室分析(参见”High-throughput purification”)到家畜的育种项目(参见”Genotyping of pigs”)和种系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地扩大常规的检测应用的规模。

Principle

DNeasy Blood & Tissue Kit适用于从不同的样本中,包括新鲜或冷冻的动物组织和细胞、血液或者细菌,快速纯化总DNA(如,基因组、线粒体和病原体等)。

DNeasy膜整合了硅胶膜的结合特性,经简单显微离心技术或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System处理即可。在高浓度离液盐的环境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中设计的缓冲液条件,旨在使DNA特异性吸附到硅胶膜上,并且优化去除污染物和酶抑制剂。

纯化过程不需要苯酚或CHCl3抽提或乙醇沉淀,仅涉及少量手工步骤。这使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常适合同时处理多个样本。对于高通量的应用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能够同时处理96或192个样本。

Procedure

可靠的硅胶膜技术,利用便捷的离心柱或96孔板形式,确保了快速可重复的DNA纯化,不再需要有机抽提和乙醇沉淀(参见”DNeasy Mini and 96 procedures”)。样本首先用蛋白酶K裂解。调整缓冲条件,以提供*的DNA结合条件并将裂解物上样到DNeasy Mini离心柱或DNeasy 96孔板上。在离心过程中,DNA选择性地结合到DNeasy膜上,污染物通过。余下的污染物和酶抑制剂将在两个高效的洗涤步骤中被去除。然后,用水或缓冲液将DNA洗脱,待用。  

DNeasy Mini离心柱预装在收集管中,并且单独封存,确保方便和安全。使用DNeasy Mini离心柱的纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动进行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式进行高通量处理。

Applications

DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品质DNA,可直接用于多种下游分析,包括:

  • 生命科学研究
  • 家畜育种
  • 种系基因分型研究
  • 兽医病理分析研究
  • 常规的应用检测

 

Features

Specifications

应用 PCR, real-time PCR, genotyping
洗脱体积 100–200 µl
规格 96-well plate, spin column
主要样本类型 Blood, tissue
处理 Manual
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 DNA
样本量 100 µl/25 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 20 minutes – 1 hour
产量 6 µg/30 µg

 

相关产品      
商品编号 商品品名 规格 品牌
69506 血液和组织总DNA提取 250T Qiagen
69504 血液和组织总DNA提取 50T Qiagen

Qiagen 12391 EndoFree Plasmid Giga Kit

纯化得到至多10 mg的无内毒素高转染级纯质粒或柯斯质粒DNA
•纯化得到的DNA内毒素水平低于0.1 EU/µg
•纯化流程快,同时去除内毒素
•获得高产量、高拷贝质粒DNA
•使用LyseBlue,获得*的裂解和高产量的DNA

纯化得到至多10 mg的无内毒素高转染级纯质粒或柯斯质粒DNA

  • 纯化得到的DNA内毒素水平低于0.1 EU/µg
  • 纯化流程快,同时去除内毒素
  • 获得高产量、高拷贝质粒DNA
  • 使用LyseBlue,获得*的裂解和高产量的DNA

EndoFree Plasmid Kits基于阴离子交换技术,可快速制备不含内毒素的质粒DNA。QIAfilter Cartridges过滤快速澄清裂解液。制备的DNA纯度超过两次CsCl梯度离心法所得DNA的纯度,适合超转染级纯的应用。EndoFree Plasmid Buffer Set可用于制备10次mega规模或5次giga规模转染级纯质粒或科斯质粒DNA制备。
 

Performance

EndoFree Plasmid Kit将高效的内毒素去除步骤整合到质粒纯化流程中,不需要额外步骤,也不需用亲和柱去除脂多糖。通过QIAfilter Mega-Giga Cartridge过滤细菌裂解液,并使用重力流QIAGEN-tip阴离子交换柱纯化质粒DNA。产量可达10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 μg(Maxi)DNA。纯化的DNA无内毒素(<0.1 EU/µg DNA)。

选用EndoFree Plasmid Mega Kit而非EndoFree Plasmid Giga Kit纯化低拷贝质粒和科斯质粒,将会得到更好的效果,因为后者需要较大的培养体积,而QIAfilter Mega-Giga Cartridge的容量有限。

EndoFree Plasmid Kits去除细菌在裂解过程中释放的内毒素,内毒素会影响原代细胞和敏感培养细胞的DNA转染。从EndoFree Plasmid Kits得到的无内毒素DNA高度适用于可重复且结果可靠的转染(参见”Plasmid purification method versus transfection efficiency”和”Plasmid purity versus transfection efficiency”及表”Endotoxin levels in plasmid preparations”和”EndoFree DNA yields high transfection efficiencies with primary cells”)。QIAGEN超纯无内毒素DNA也适用于基因治疗研究和其他敏感应用。

 

质粒制备中的内毒素水平*
质粒制备方法 内毒素(EU/µg DNA) 平均转染效率
EndoFree Plasmid Kit 0.1 154%
QIAGEN Plasmid Kit 9.3 100%
2x CsCl 2.6 99%
Silica-gel slurry 1230.0 24%
* 宿主菌:大肠杆菌DH5α  质粒:pRSVcat。
† 1  ng LPS = 1.8 EU。 
 根据表中数据计算 。
无内毒素DNA转染原代细胞的高转染率*
DNA纯化方法 转染细胞比例
EndoFree Plasmid Kit 21.0% ± 0.93
QIAGEN Plasmid Kit 8.1% ± 0.57
Silica-gel slurry 5.2% ± 0.74
* 原代兔胃壁细胞转染pEGFP-N2(CLONTECH),pEGFP-N2由所示的方法制备。使用Effectene Transfection Reagent进行转染。该数据是细胞表达GFP的百分率,由转染48小时后绿色荧光细胞数量确定。转染效率是每种纯化方法制备的超过2个不同的DNA中6–9个复制样本的平均值。(数据由C. Chew and J. Parente提供,Department of Molecular Medicine and Genetics, Medical College of Georgia, Augusta, Georgia, USA.)

Principle

纯化的质粒DNA内毒素污染水平取决于所用的纯化方法(参见”Endotoxin levels in plasmid preparations”)。硅胶技术纯化的DNA具有非常高的内毒素水平。QIAGEN、QIAfilter、HiSpeed Plasmid Kits和两次CsCl超速离心可获得相对低水平内毒素的纯DNA。EndoFree Plasmid Buffer Set包含完整的内毒素去除步骤,获得<0.1 EU/µg的质粒DNA。

QIAfilter、HiSpeed和EndoFree Plasmid Kits提供的QIAfilter Cartridges是特殊设计的过滤装置,用于代替细菌细胞碱裂解后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可*去除SDS沉淀,清除细菌裂解液,相比离心可大量节约时间,减少1小时的质粒纯化时间。QIAfilter Mega-Giga Cartridges采用内部真空方式轻松高效的清除大量细菌裂解液(注意:该试剂盒不包含瓶子)。

QIAGEN-tips中*的阴离子交换树脂(不提供EndoFree Plasmid Buffer Set)专为核酸纯化而开发。它的分离性能使得DNA纯度与连续两次CsCl梯度离心获得的DNA纯度相当。由重力流驱动并持续运转的预装QIAGEN-tips,最大限度减少手动制备质粒所需的时间。整个QIAGEN质粒纯化系统不使用有毒物质,如苯酚,CHCl3,溴化乙锭和CsCl,最大限度地减少对用户和环境的危害。

内毒素,又称脂多糖或LPS,是大肠杆菌等革兰氏阴性菌细胞膜的组成部分,如大肠杆菌(参见”Bacterial cell wall”)。内毒素在质粒裂解纯化过程中释放出来,并显著降低内毒素敏感细胞株的转染效率。此外,内毒素与DNA竞争“自由”转染试剂,影响转染实验中质粒DNA的摄取。内毒素也诱导巨噬细胞和B细胞等免疫细胞发生非特异性免疫反应,从而导致转染结果的误读。这些反应包括诱导的蛋白质和脂类,如IL-1和前列腺素等的合成。总体而言,内毒素在转染实验中是不可控变量,影响结果的可重复性,使它们难以对比、解读。在基因治疗研究中,内毒素可造成内毒素休克综合症和激活补体级联,干扰研究。

Procedure

在碱性条件下,细菌细胞裂解,使用QIAfilter Mega-Giga Cartridge清除粗裂解物。将Endotoxin Removal Buffer加入到过滤后的裂解液中。冰浴后,将纯净的裂解物上样到阴离子交换柱上,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA选择性结合。用中盐缓冲液清除RNA、蛋白质、代谢产物和其他低分子量杂质,超纯质粒DNA被高盐缓冲液洗脱(参见”QIAGEN Plasmid Kit procedures”)。最后DNA由异丙醇脱盐、沉淀并且离心回收。

Applications

使用EndoFree Plasmid Kits纯化的DNA适合多种敏感应用,包括:

  • 转染,包括原代、敏感以及悬浮细胞
  • 基因治疗研究
  • 基因沉默
  • 显微注射

 

Features

Specifications

应用 Transfection, gene therapy
起始样本体积 2.5 liters culture volume
质粒类型 High-copy, low-copy, cosmid DNA
处理 Manual (vacuum)
每次处理样本量;通量 1 sample per run
技术 Anion-exchange technology
每次运行时间或处理样本数 310 min
产量 <10 mg

Qiagen 12362 EndoFree Plasmid Maxi Kit

纯化得到至多10 mg的无内毒素高转染级纯质粒或柯斯质粒DNA
•纯化得到的DNA内毒素水平低于0.1 EU/&#181;g
•纯化流程快,同时去除内毒素
•获得高产量、高拷贝质粒DNA
•使用LyseBlue,获得*的裂解和高产量的DNA

纯化得到至多10 mg的无内毒素高转染级纯质粒或柯斯质粒DNA

  • 纯化得到的DNA内毒素水平低于0.1 EU/µg
  • 纯化流程快,同时去除内毒素
  • 获得高产量、高拷贝质粒DNA
  • 使用LyseBlue,获得*的裂解和高产量的DNA

EndoFree Plasmid Kits基于阴离子交换技术,可快速制备不含内毒素的质粒DNA。QIAfilter Cartridges过滤快速澄清裂解液。制备的DNA纯度超过两次CsCl梯度离心法所得DNA的纯度,适合超转染级纯的应用。EndoFree Plasmid Buffer Set可用于制备10次mega规模或5次giga规模转染级纯质粒或科斯质粒DNA制备。

 

Performance

EndoFree Plasmid Kit将高效的内毒素去除步骤整合到质粒纯化流程中,不需要额外步骤,也不需用亲和柱去除脂多糖。通过QIAfilter Mega-Giga Cartridge过滤细菌裂解液,并使用重力流QIAGEN-tip阴离子交换柱纯化质粒DNA。产量可达10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 μg(Maxi)DNA。纯化的DNA无内毒素(<0.1 EU/µg DNA)。

选用EndoFree Plasmid Mega Kit而非EndoFree Plasmid Giga Kit纯化低拷贝质粒和科斯质粒,将会得到更好的效果,因为后者需要较大的培养体积,而QIAfilter Mega-Giga Cartridge的容量有限。

EndoFree Plasmid Kits去除细菌在裂解过程中释放的内毒素,内毒素会影响原代细胞和敏感培养细胞的DNA转染。从EndoFree Plasmid Kits得到的无内毒素DNA高度适用于可重复且结果可靠的转染(参见”Plasmid purification method versus transfection efficiency”和”Plasmid purity versus transfection efficiency”及表”Endotoxin levels in plasmid preparations”和”EndoFree DNA yields high transfection efficiencies with primary cells”)。QIAGEN超纯无内毒素DNA也适用于基因治疗研究和其他敏感应用。

 

质粒制备中的内毒素水平*
质粒制备方法 内毒素(EU/µg DNA) 平均转染效率
EndoFree Plasmid Kit 0.1 154%
QIAGEN Plasmid Kit 9.3 100%
2x CsCl 2.6 99%
Silica-gel slurry 1230.0 24%
* 宿主菌:大肠杆菌DH5α  质粒:pRSVcat。
† 1  ng LPS = 1.8 EU。 
 根据表中数据计算 。
无内毒素DNA转染原代细胞的高转染率*
DNA纯化方法 转染细胞比例
EndoFree Plasmid Kit 21.0% ± 0.93
QIAGEN Plasmid Kit 8.1% ± 0.57
Silica-gel slurry 5.2% ± 0.74
* 原代兔胃壁细胞转染pEGFP-N2(CLONTECH),pEGFP-N2由所示的方法制备。使用Effectene Transfection Reagent进行转染。该数据是细胞表达GFP的百分率,由转染48小时后绿色荧光细胞数量确定。转染效率是每种纯化方法制备的超过2个不同的DNA中6–9个复制样本的平均值。(数据由C. Chew and J. Parente提供,Department of Molecular Medicine and Genetics, Medical College of Georgia, Augusta, Georgia, USA.)

Principle

纯化的质粒DNA内毒素污染水平取决于所用的纯化方法(参见”Endotoxin levels in plasmid preparations”)。硅胶技术纯化的DNA具有非常高的内毒素水平。QIAGEN、QIAfilter、HiSpeed Plasmid Kits和两次CsCl超速离心可获得相对低水平内毒素的纯DNA。EndoFree Plasmid Buffer Set包含完整的内毒素去除步骤,获得<0.1 EU/µg的质粒DNA。

QIAfilter、HiSpeed和EndoFree Plasmid Kits提供的QIAfilter Cartridges是特殊设计的过滤装置,用于代替细菌细胞碱裂解后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可*去除SDS沉淀,清除细菌裂解液,相比离心可大量节约时间,减少1小时的质粒纯化时间。QIAfilter Mega-Giga Cartridges采用内部真空方式轻松高效的清除大量细菌裂解液(注意:该试剂盒不包含瓶子)。

QIAGEN-tips中*的阴离子交换树脂(不提供EndoFree Plasmid Buffer Set)专为核酸纯化而开发。它的分离性能使得DNA纯度与连续两次CsCl梯度离心获得的DNA纯度相当。由重力流驱动并持续运转的预装QIAGEN-tips,最大限度减少手动制备质粒所需的时间。整个QIAGEN质粒纯化系统不使用有毒物质,如苯酚,CHCl3,溴化乙锭和CsCl,最大限度地减少对用户和环境的危害。

内毒素,又称脂多糖或LPS,是大肠杆菌等革兰氏阴性菌细胞膜的组成部分,如大肠杆菌(参见”Bacterial cell wall”)。内毒素在质粒裂解纯化过程中释放出来,并显著降低内毒素敏感细胞株的转染效率。此外,内毒素与DNA竞争“自由”转染试剂,影响转染实验中质粒DNA的摄取。内毒素也诱导巨噬细胞和B细胞等免疫细胞发生非特异性免疫反应,从而导致转染结果的误读。这些反应包括诱导的蛋白质和脂类,如IL-1和前列腺素等的合成。总体而言,内毒素在转染实验中是不可控变量,影响结果的可重复性,使它们难以对比、解读。在基因治疗研究中,内毒素可造成内毒素休克综合症和激活补体级联,干扰研究。

Procedure

在碱性条件下,细菌细胞裂解,使用QIAfilter Mega-Giga Cartridge清除粗裂解物。将Endotoxin Removal Buffer加入到过滤后的裂解液中。冰浴后,将纯净的裂解物上样到阴离子交换柱上,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA选择性结合。用中盐缓冲液清除RNA、蛋白质、代谢产物和其他低分子量杂质,超纯质粒DNA被高盐缓冲液洗脱(参见”QIAGEN Plasmid Kit procedures”)。最后DNA由异丙醇脱盐、沉淀并且离心回收。

Applications

使用EndoFree Plasmid Kits纯化的DNA适合多种敏感应用,包括:

  • 转染,包括原代、敏感以及悬浮细胞
  • 基因治疗研究
  • 基因沉默
  • 显微注射

Qiagen 12381 EndoFree Plasmid Mega Kit

纯化得到至多10 mg的无内毒素高转染级纯质粒或柯斯质粒DNA
•纯化得到的DNA内毒素水平低于0.1 EU/&#181;g
•纯化流程快,同时去除内毒素
•获得高产量、高拷贝质粒DNA
•使用LyseBlue,获得*的裂解和高产量的DNA

纯化得到至多10 mg的无内毒素高转染级纯质粒或柯斯质粒DNA

  • 纯化得到的DNA内毒素水平低于0.1 EU/µg
  • 纯化流程快,同时去除内毒素
  • 获得高产量、高拷贝质粒DNA
  • 使用LyseBlue,获得*的裂解和高产量的DNA

EndoFree Plasmid Kits基于阴离子交换技术,可快速制备不含内毒素的质粒DNA。QIAfilter Cartridges过滤快速澄清裂解液。制备的DNA纯度超过两次CsCl梯度离心法所得DNA的纯度,适合超转染级纯的应用。EndoFree Plasmid Buffer Set可用于制备10次mega规模或5次giga规模转染级纯质粒或科斯质粒DNA制备。

 

Performance

EndoFree Plasmid Kit将高效的内毒素去除步骤整合到质粒纯化流程中,不需要额外步骤,也不需用亲和柱去除脂多糖。通过QIAfilter Mega-Giga Cartridge过滤细菌裂解液,并使用重力流QIAGEN-tip阴离子交换柱纯化质粒DNA。产量可达10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 μg(Maxi)DNA。纯化的DNA无内毒素(<0.1 EU/µg DNA)。

选用EndoFree Plasmid Mega Kit而非EndoFree Plasmid Giga Kit纯化低拷贝质粒和科斯质粒,将会得到更好的效果,因为后者需要较大的培养体积,而QIAfilter Mega-Giga Cartridge的容量有限。

EndoFree Plasmid Kits去除细菌在裂解过程中释放的内毒素,内毒素会影响原代细胞和敏感培养细胞的DNA转染。从EndoFree Plasmid Kits得到的无内毒素DNA高度适用于可重复且结果可靠的转染(参见”Plasmid purification method versus transfection efficiency”和”Plasmid purity versus transfection efficiency”及表”Endotoxin levels in plasmid preparations”和”EndoFree DNA yields high transfection efficiencies with primary cells”)。QIAGEN超纯无内毒素DNA也适用于基因治疗研究和其他敏感应用。

 

质粒制备中的内毒素水平*
质粒制备方法 内毒素(EU/µg DNA) 平均转染效率
EndoFree Plasmid Kit 0.1 154%
QIAGEN Plasmid Kit 9.3 100%
2x CsCl 2.6 99%
Silica-gel slurry 1230.0 24%
* 宿主菌:大肠杆菌DH5α  质粒:pRSVcat。
† 1  ng LPS = 1.8 EU。 
 根据表中数据计算 。
无内毒素DNA转染原代细胞的高转染率*
DNA纯化方法 转染细胞比例
EndoFree Plasmid Kit 21.0% ± 0.93
QIAGEN Plasmid Kit 8.1% ± 0.57
Silica-gel slurry 5.2% ± 0.74
* 原代兔胃壁细胞转染pEGFP-N2(CLONTECH),pEGFP-N2由所示的方法制备。使用Effectene Transfection Reagent进行转染。该数据是细胞表达GFP的百分率,由转染48小时后绿色荧光细胞数量确定。转染效率是每种纯化方法制备的超过2个不同的DNA中6–9个复制样本的平均值。(数据由C. Chew and J. Parente提供,Department of Molecular Medicine and Genetics, Medical College of Georgia, Augusta, Georgia, USA.)

Principle

纯化的质粒DNA内毒素污染水平取决于所用的纯化方法(参见”Endotoxin levels in plasmid preparations”)。硅胶技术纯化的DNA具有非常高的内毒素水平。QIAGEN、QIAfilter、HiSpeed Plasmid Kits和两次CsCl超速离心可获得相对低水平内毒素的纯DNA。EndoFree Plasmid Buffer Set包含完整的内毒素去除步骤,获得<0.1 EU/µg的质粒DNA。

QIAfilter、HiSpeed和EndoFree Plasmid Kits提供的QIAfilter Cartridges是特殊设计的过滤装置,用于代替细菌细胞碱裂解后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可*去除SDS沉淀,清除细菌裂解液,相比离心可大量节约时间,减少1小时的质粒纯化时间。QIAfilter Mega-Giga Cartridges采用内部真空方式轻松高效的清除大量细菌裂解液(注意:该试剂盒不包含瓶子)。

QIAGEN-tips中*的阴离子交换树脂(不提供EndoFree Plasmid Buffer Set)专为核酸纯化而开发。它的分离性能使得DNA纯度与连续两次CsCl梯度离心获得的DNA纯度相当。由重力流驱动并持续运转的预装QIAGEN-tips,最大限度减少手动制备质粒所需的时间。整个QIAGEN质粒纯化系统不使用有毒物质,如苯酚,CHCl3,溴化乙锭和CsCl,最大限度地减少对用户和环境的危害。

内毒素,又称脂多糖或LPS,是大肠杆菌等革兰氏阴性菌细胞膜的组成部分,如大肠杆菌(参见”Bacterial cell wall”)。内毒素在质粒裂解纯化过程中释放出来,并显著降低内毒素敏感细胞株的转染效率。此外,内毒素与DNA竞争“自由”转染试剂,影响转染实验中质粒DNA的摄取。内毒素也诱导巨噬细胞和B细胞等免疫细胞发生非特异性免疫反应,从而导致转染结果的误读。这些反应包括诱导的蛋白质和脂类,如IL-1和前列腺素等的合成。总体而言,内毒素在转染实验中是不可控变量,影响结果的可重复性,使它们难以对比、解读。在基因治疗研究中,内毒素可造成内毒素休克综合症和激活补体级联,干扰研究。

Procedure

在碱性条件下,细菌细胞裂解,使用QIAfilter Mega-Giga Cartridge清除粗裂解物。将Endotoxin Removal Buffer加入到过滤后的裂解液中。冰浴后,将纯净的裂解物上样到阴离子交换柱上,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA选择性结合。用中盐缓冲液清除RNA、蛋白质、代谢产物和其他低分子量杂质,超纯质粒DNA被高盐缓冲液洗脱(参见”QIAGEN Plasmid Kit procedures”)。最后DNA由异丙醇脱盐、沉淀并且离心回收。

Applications

使用EndoFree Plasmid Kits纯化的DNA适合多种敏感应用,包括:

  • 转染,包括原代、敏感以及悬浮细胞
  • 基因治疗研究
  • 基因沉默
  • 显微注射

 

Features

Specifications

应用 Transfection, gene therapy
起始样本体积 2.5 liters culture volume
质粒类型 High-copy, low-copy, cosmid DNA
处理 Manual (vacuum)
每次处理样本量;通量 1 sample per run
技术 Anion-exchange technology
每次运行时间或处理样本数 310 min
产量 <10 mg

Qiagen 12662/12663

超快速纯化至多750 &#181;g转染级纯质粒或柯斯质粒DNA
•少于60分钟制备时间
•无需离心即可澄清裂解液并进行异丙醇沉淀
•在沉淀过程中不会损失DNA
•可纯化至多750 &#181;g高拷贝质粒DNA
•使用LyseBlue,获得*的裂解效果和大的DNA产量

超快速纯化至多750 µg转染级纯质粒或柯斯质粒DNA

  • 少于60分钟制备时间
  • 无需离心即可澄清裂解液并进行异丙醇沉淀
  • 在沉淀过程中不会损失DNA
  • 可纯化至多750 µg高拷贝质粒DNA
  • 使用LyseBlue,获得*的裂解效果和最大的DNA产量

HiSpeed Plasmid Kits使用阴离子交换技术,超快速、大规模纯化得到质粒DNA,无需离心。得到的DNA相当于两次CsCl梯度离心处理得到的纯度,适合转染级纯度的应用。

 

Performance

HiSpeed Plasmid Kits提供QIAfilter Cartridges、HiSpeed Tips和QIAprecipitator模块,用于快速、大规模的制备质粒,无需真空底座。针筒规格的QIAfilter和QIAprecipitator模块取代了传统阴离子交换过程中的离心操作,质粒纯化更加方便、快捷。可从150–250 ml或50 µl – 150 ml的培养体积中纯化多至750 µg(Maxi)、或200 µg(Midi)的高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌和培养基)。HiSpeed Tip支持高流速,确保更快地完成DNA结合、洗涤和洗脱。

此外,HiSpeed tips中新型的阴离子交换树脂广泛用于核酸的纯化。其*的分离特性使得到的DNA的纯度相当于两次氯化铯梯度离心处理得到的纯度。

Principle

QIAfilter Cartridges(参见”QIAfilter Cartridge”)是一种特制的过滤器,于取代细菌细胞碱裂解之后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可去除SDS沉淀,只需很短的离心时间即可澄清细菌裂解液。预装的HiSpeed tips依靠重力流运行,确保不会流干,减少了质粒制备的手工操作时间。

*的QIAprecipitator模块(参见”QIAprecipitator module”)取代了异丙醇沉淀后传统的离心法纯化DNA。异丙醇混合液流过QIAprecipitator的时候DNA会结合上去,然后用TE缓冲液或水将DNA从QIAprecipitator洗脱下来。这一*的模块降低了离心后转移上清液过程丢失DNA的风险。

Procedure

经中和的细菌裂解液放入QIAfilter Cartridge中,几秒内过滤澄清。滤出液放至HiSpeed tip进行质粒DNA 纯化(参见”QIAGEN Plasmid Kit procedures”)。 洗脱所得DNA与异丙醇混合并用注射器装入QIAprecipitator中。经浓缩和脱盐后,直接从QIAprecipitator上用TE缓冲液或水洗脱DNA。

Applications

HiSpeed Plasmid Kits纯化得到超纯转染级纯DNA,适合于多种应用,包括:克隆、测序、转染和质粒介导的基因沉默等。

Features

Specifications

应用 Transfection, cloning, sequencing, gene silencing
起始样本体积 150 µl – 250 ml culture volume
质粒类型 High-copy, cosmid DNA
处理 Manual (filtration)
每次处理样本量;通量 1 sample per run
技术 Anion-exchange technology
每次运行时间或处理样本数 <60 min
产量 <750 µg

 

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商品编号 商品品名 规格 品牌
12662 超快速质粒大提试剂盒 10T Qiagen
12663 超快速质粒大提试剂盒 25T Qiagen

Qiagen 12643 HiSpeed Plasmid Midi Kit

超快速纯化至多750 &#181;g转染级纯质粒或柯斯质粒DNA
•少于60分钟制备时间
•无需离心即可澄清裂解液并进行异丙醇沉淀
•在沉淀过程中不会损失DNA
•可纯化至多750 &#181;g高拷贝质粒DNA
•使用LyseBlue,获得*的裂解效果和zui大的DNA产量

超快速纯化至多750 µg转染级纯质粒或柯斯质粒DNA

  • 少于60分钟制备时间
  • 无需离心即可澄清裂解液并进行异丙醇沉淀
  • 在沉淀过程中不会损失DNA
  • 可纯化至多750 µg高拷贝质粒DNA
  • 使用LyseBlue,获得*的裂解效果和最大的DNA产量

HiSpeed Plasmid Kits使用阴离子交换技术,超快速、大规模纯化得到质粒DNA,无需离心。得到的DNA相当于两次CsCl梯度离心处理得到的纯度,适合转染级纯度的应用。

 

Performance

HiSpeed Plasmid Kits提供QIAfilter Cartridges、HiSpeed Tips和QIAprecipitator模块,用于快速、大规模的制备质粒,无需真空底座。针筒规格的QIAfilter和QIAprecipitator模块取代了传统阴离子交换过程中的离心操作,质粒纯化更加方便、快捷。可从150–250 ml或50 µl – 150 ml的培养体积中纯化多至750 µg(Maxi)、或200 µg(Midi)的高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌和培养基)。HiSpeed Tip支持高流速,确保更快地完成DNA结合、洗涤和洗脱。

此外,HiSpeed tips中新型的阴离子交换树脂广泛用于核酸的纯化。其*的分离特性使得到的DNA的纯度相当于两次氯化铯梯度离心处理得到的纯度。

Principle

QIAfilter Cartridges(参见”QIAfilter Cartridge”)是一种特制的过滤器,于取代细菌细胞碱裂解之后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可去除SDS沉淀,只需很短的离心时间即可澄清细菌裂解液。预装的HiSpeed tips依靠重力流运行,确保不会流干,减少了质粒制备的手工操作时间。

*的QIAprecipitator模块(参见”QIAprecipitator module”)取代了异丙醇沉淀后传统的离心法纯化DNA。异丙醇混合液流过QIAprecipitator的时候DNA会结合上去,然后用TE缓冲液或水将DNA从QIAprecipitator洗脱下来。这一*的模块降低了离心后转移上清液过程丢失DNA的风险。

Procedure

经中和的细菌裂解液放入QIAfilter Cartridge中,几秒内过滤澄清。滤出液放至HiSpeed tip进行质粒DNA 纯化(参见”QIAGEN Plasmid Kit procedures”)。 洗脱所得DNA与异丙醇混合并用注射器装入QIAprecipitator中。经浓缩和脱盐后,直接从QIAprecipitator上用TE缓冲液或水洗脱DNA。

Applications

HiSpeed Plasmid Kits纯化得到超纯转染级纯DNA,适合于多种应用,包括:克隆、测序、转染和质粒介导的基因沉默等。

Features

Specifications

应用 Transfection, cloning, sequencing, gene silencing
起始样本体积 150 µl – 250 ml culture volume
质粒类型 High-copy, cosmid DNA
处理 Manual (filtration)
每次处理样本量;通量 1 sample per run
技术 Anion-exchange technology
每次运行时间或处理样本数 <60 min
产量 <750 µg

Qiagen 202602/202605

用于高灵敏度,高保真热启动PCR
•高灵敏度、高特异性
•*的UA/TA克隆
•保真性比Taq DNA Polymerase高10倍
•可在室温下构建反应体系,酶活化速度快

用于高灵敏度,高保真热启动PCR

  • 高灵敏度、高特异性
  • *的UA/TA克隆
  • 保真性比Taq DNA Polymerase高10倍
  • 可在室温下构建反应体系,酶活化速度快

经优化的即用型试剂盒包括高保真PCR所需的所有试剂、酶、缓冲液和dNTPs。HotStar HiFidelity DNA Polymerase是一种经特异修饰的产生A突出末端的热启动校对酶,能够直接、高效的进行UA/TA克隆。缓冲液中包含Factor SB,可在PCR体系建立时防止引物和模板的降解,提供高特异性和高保真PCR。此外,Q-Solution能够有效扩增难扩增的模板(如富含GC的模板)。

Performance

HotStar HiFidelity Polymerase Kit包含一种经特异修饰的热启动校对酶,可在PCR体系建立时防止引物和模板的降解,提供高保真PCR,无需优化。通过检测,HotStar HiFidelity DNA Polymerase Kit可确保高特异性和高灵敏度扩增(参见”Highly sensitive and reliable PCR”)。HotStar HiFidelity DNA Polymerase的保真性比Taq DNA polymerase高10倍。新型的HotStar HiFidelity PCR Buffer包含专有的Factor SB,提高PCR的灵敏度和可靠性,尤其在起始模板量较少的条件下。该试剂盒同时提供Q-Solution,可进一步优化PCR(参见”Amplification of difficult templates”)。

HotStar HiFidelity DNA Polymerase特性

浓度:2.5 units/μl 
5'–>3'外切酶活性:否 
3'–>5'外切酶活性:是 
额外添加A(末端转移酶活性):
半衰期:95°C条件下>4小时 
核酸酶污染:否 
蛋白酶污染:否 
RNase污染:

Principle

通常利用高保真酶3'→5'核酸外切酶的活性去除错配的整合碱基。但是,该活性会在PCR体系建立和起始时降解引物,而导致非特异性启动、扩增,甚至扩增产物失败,尤其在模板量较少的条件下。

HotStar HiFidelity DNA Polymerase

HotStar HighFidelity DNA Polymerase是从新型Pyrococcus spp.中特异分离的,经过化学修饰使聚合酶和核酸外切酶失活。5分钟热启动激活酶组分,使PCR起始阶段就有高校对能力。*的修饰确保体系建立过程中引物和酶的完整性,防止错误启动。HotStar HiFidelity DNA Polymerase的可靠性能确保高特异性和高灵敏度的扩增。

HotStar HiFidelity PCR Buffer

新型的HotStar HiFidelity PCR Buffer包含*的PCR添加剂,以及浓度已经优化的dNTPs和MgSO4。Factor SB是一种特有的PCR添加剂,提高PCR的灵敏度和可靠性(参见”Highly sensitive and reliable PCR”)。新型的Factor SB可确保模板DNA的完整性,该DNA常常会被具有3'→5'核酸外切酶活性的高保真酶降解。

预优化试剂能够可靠的扩增特异性PCR产物,且出错率低。该缓冲液通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例,确保PCR每个循环特异性扩增(参见”Increased specificity of primer annealing”)。*的KCl和(NH4)2SO4平衡组合,使得HotStar HiFidelity PCR Buffer与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg2+浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性,无需进行耗时的优化。

HotStar HiFidelity PCR Buffer也含有浓度经特定优化的dNTPs,用于方便的建立PCR反应体系和获得可靠的结果。该缓冲液zui大程du上增加了HotStar HiFidelity DNA Polymerase的保真性,确保低出错率。HotStar HiFidelity Polymerase Kit灵敏度高、特异性强以及使用HotStar HiFidelity PCR Buffer而无需优化的特性使其适合多种高保真PCR应用。

Q-Solution

HotStar HiFidelity Polymerase Kit同时提供Q-Solution,一种新型的PCR添加剂,通过更改DNA熔解行为促进难扩增模板的扩增。这种*的试剂可进一步优化由模板引起的表现不理想的PCR,如过多的二级结构和富含GC的模板(参见”Amplification of difficult templates”)。不同于DMSO和其他PCR添加剂,Q-Solution的浓度是确定的,没有毒性,并且保证PCR的纯度。而且PCR中加入Q-Solution不会影响PCR的准确性。

完整的试剂盒规格

HotStar HiFidelity Polymerase Kit包含PCR所需的所有组分。无需额外购买其他试剂或缓冲液。

Procedure

HotStar HiFidelity操作流程高效,只需按照试剂盒中已优化的试验方案操作即可。HotStar HiFidelity DNA Polymerase经过化学修饰,可以暂时性的使聚合酶和3'–>5'核酸外切酶失活。这种抑制作用可使引物和模板在PCR体系建立和循环起始阶段过度降解。95°C条件下孵育5分钟即可激活聚合酶和校对活性,可以整合入已有的热循环程序。这种修饰确保可在室温下方便的建立反应体系,而不会影响PCR的特异性和产量。

TA/UA克隆

与其他高保真DNA聚合酶相比,使用HotStar HiFidelity DNA Polymerase获得的PCR产物可直接用于TA-或UA-克隆(参见”Efficient TA/UA cloning”)。

产物的长度和灵敏度

鉴于HotStar HiFidelity Polymerase Kit的高灵敏度,即使使用极微量的起始原料也可扩增片段(如1 ng的人基因组DNA)。使用基因组DNA获得的产物长度可达5 kb,而λDNA获得的产物长度可达10 kb,表明HotStar HiFidelity Polymerase Kit适合多种应用,包括用于克隆的长片段DNA的扩增。

Applications

HotStar HiFidelity Polymerase Kit适合多种要求高灵敏度和低出错率的热启动PCR应用,如克隆和定点突变。

 

Features

Specifications

应用 Cloning, mutation analysis, TA- or UA-cloning procedures
酶活 3' -> 5' exonuclease activity, A-addition
预混液 No
反应类型 PCR amplification, proofreading
real-time或终点法PCR Endpoint
样本/目标类型 Genomic DNA and cDNA
单一或多重 Single
有/无热启动酶 With hotstart
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商品编号 商品品名 规格 品牌
202602 高灵敏度,高保真热启动PCR聚合酶 100U Qiagen
202605 高灵敏度,高保真热启动PCR聚合酶 1000U Qiagen

Qiagen203203/203205/203207/203209

高特异性扩增,所需优化次数少
•所需优化次数少
•PCR特异性高
•操作方便,可在室温下构建反应体系

高特异性扩增,所需优化次数少

  • 所需优化次数少
  • PCR特异性高
  • 操作方便,可在室温下构建反应体系

不同于抗体介导的方法,HotStarTaq DNA Polymerase应用化学介导的热启动,可确保聚合酶在PCR初始加热阶段*没有活性。HotStarTaq DNA Polymerase提供*的QIAGEN PCR Buffer,将非特异性扩增产物、引物二聚体和其他污染降至最低。一种新型的添加剂Q-Solution,可实现难扩增的模板(如GC含量高的模板)高效扩增。

Performance

每一批HotStarTaq DNA Polymerase都经过*的质量控制测试,包括:严格的PCR特异性和具有可重复性的试剂,即使低拷贝的靶分子也可扩增。通过检测,HotStarTaq DNA Polymerase可确保高度特异性和在热启动PCR中的表现(参见”Higher specificity with different primer–template systems”、”Superior performance”和表格)。该试剂盒提供的新型PCR缓冲液使得在多种PCR条件下都维持高特异性,无需优化(参见”Tolerance to variable magnesium concentration”)。试剂盒中的Q-Solution可进一步优化PCR(参见”Amplification of difficult templates”)。总之,这些组合确保了在多种应用中的特异性扩增(参见”Effect of hot start on RT-PCR performance”和”Highly sensitive single-cell PCR”)。

热启动模式比较
  HotStarTaq DNA Polymerase Supplier AII提供的热启动酶 抗体介导 手动 蜡屏障
特异性扩增 ++ + + +/– +/–
PCR优化需求 ++ +/– +/–
易用性 ++ ++ +
 

HotStarTaq DNA Polymerase特性

浓度:5 units/µl 
重组酶:是 
底物类似物:dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP 
延伸速度:72°C条件下2–4 kb/min
酶半衰期:97°C条件下10 min,94°C条件下60 min 
扩增效率:≥105倍 
5'–>3'外切酶活性:是 
额外添加A:是 
3'–>5' 外切酶活性:否 
核酸酶污染:否 
蛋白酶污染:否 
RNases污染:否 
自启活性:否  

Principle

HotStarTaq DNA Polymerase,一种经修饰的Taq DNA Polymerase,确保热启动PCR的高度特异性。该试剂盒包括新型的双阳离子PCR缓冲液、Q-Solution和MgCl2

HotStarTaq DNA Polymerase

HotStarTaq DNA Polymerase以非活性形式提供,常温下没有聚合酶活性。避免PCR构建和循环初始阶段低温条件下非特异性引物的延伸和引物二聚体的形成(参见”Superior performance in hot-start PCR”和”Higher specificity with different primer–template systems”)。95°C条件下孵育15分钟即可激活HotStarTaq DNA Polymerase,这个步骤可整合入已有的热循环程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例,确保PCR每个循环特异性扩增(参见”Increased specificity of primer annealing”)。*的KCl和(NH4)2SO4平衡组合,使得该缓冲液与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg2+浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性,无需进行耗时的优化(参见”Tolerance to variable magnesium concentration”)。

Q-Solution

该产品同时提供Q-Solution,一种新型的PCR添加剂,通过更改DNA熔解行为促进难扩增模板的扩增。这种*的试剂可进一步优化由模板引起的表现不理想的PCR,如过多的二级结构和富含GC的模板(参见”Amplification of difficult templates”)。不同于DMSO和其他PCR添加剂,Q-Solution的浓度是确定的,没有毒性,并且保证PCR的纯度。而且PCR中加入Q-Solution不会影响PCR的准确性。

Procedure

HotStarTaq DNA Polymerase提供高效、经优化的实验方案,用于快速、方便的构建PCR反应体系。95°C条件下孵育15分钟激活HotStarTaq DNA Polymerase,可以整合入已有的热循环程序。反应可在室温下建立,更加方便和易于使用(参见”HotStarTaq procedure”)。

Applications

HotStarTaq DNA Polymerase适合多种应用,包括各种富有挑战性的研究,如各种扩增应用:

  • 复杂的基因模板
  • 复杂的cDNA模板(如RT-PCR)
  • 低拷贝的靶序列(如单细胞PCR)
  • 多重引物对反应

 

Features

Specifications

应用 PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets
酶活 5' -> 3' exonuclease activity
预混液 No
反应类型 PCR amplification
real-time或终点法PCR Endpoint
样本/目标类型 Genomic DNA and cDNA
单一或多重 Single
有/无热启动酶 With hotstart

 

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商品编号 商品品名 规格 品牌
203205 热启动PCR DNA聚合酶 1000U Qiagen
203203 热启动PCR DNA聚合酶 250U Qiagen
203209 热启动PCR DNA聚合酶 25000U Qiagen
203207 热启动PCR DNA聚合酶 5000U Qiagen

Qiagen203443/203445/203446

高特异性扩增,用于多种PCR分析
高PCR特异性,无需优化
•操作简单,室温下进行反应体系的构建
•即用型预混液,减少移液步骤

高特异性扩增,用于多种PCR分析

  • 高PCR特异性,无需优化
  • 操作简单,室温下进行反应体系的构建
  • 即用型预混液,减少移液步骤

HotStarTaq Master Mix包含HotStarTaq DNA Polymerase、可将优化需求最小化的*的QIAGEN PCR Buffer、以及dNTPs。预混液中提供各种所需组分,减少移液步骤,降低污染风险,同时提高通量和可重复性。

Performance

每一批HotStarTaq Master Mix Kit都经过*的质量控制测试,包括:严格的PCR特异性和可重复性分析,即使低拷贝的靶分子也可扩增。通过检测,HotStarTaq DNA Polymerase优于其它供应商提供的试剂盒,确保高度特异性和在热启动PCR中的表现(参见”Higher specificity with different primer–template systems”、”Superior performance”和表格)。该试剂盒提供的新型PCR缓冲液使得在多种PCR条件下都维持高特异性,无需优化(参见”Tolerance to variable magnesium concentration”)。

高度特异性配合简单的操作使HotStarTaq Master Mix Kit适用于复杂的基因组或cDNA模板(参见”Effect of hot start on RT-PCR performance”)、多重引物对(参见”Specific amplification in multiplex PCR”)、从珍贵样本或低拷贝靶分子中抽提的模板(参见”Highly sensitive single-cell PCR”)。该试剂盒还适用于大量样本的扩增,诸如基因筛查等项目。

热启动模式比较
  HotStarTaq DNA Polymerase Supplier AII提供的热启动酶 抗体介导 手动 蜡屏障
特异性扩增 ++ + + +/– +/–
PCR优化需求 ++ +/– +/–
易用性 ++ ++ +
 

HotStarTaq DNA Polymerase特性

浓度:5 units/µl 
重组酶:是 
底物类似物:dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP 
延伸速度:72°C条件下2–4 kb/min
酶半衰期:97°C条件下10 min,94°C条件下60 min 
扩增效率:≥105倍 
5'–>3'外切酶活性:是 
额外添加A:是 
3'–>5' 外切酶活性:否 
核酸酶污染:否 
蛋白酶污染:否 
RNases污染:否 
自启活性:否  

Principle

HotStarTaq Master Mix是一种即用型预混液,包含HotStarTaq DNA Polymerase、QIAGEN PCR Buffer和dNTPs。HotStarTaq DNA Polymerase是一种经修饰的Taq DNA Polymerase,确保热启动PCR的高特异性。

HotStarTaq DNA Polymerase

HotStarTaq DNA Polymerase以非活性形式提供,常温下没有聚合酶活性。避免PCR构建和循环初始阶段低温条件下非特异性引物的延伸和引物二聚体的形成(参见”Superior performance in hot-start PCR”和”Higher specificity with different primer–template systems”)。95°C条件下孵育15分钟即可激活HotStarTaq DNA Polymerase,这个步骤可整合入已有的热循环程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例,确保PCR每个循环特异性扩增(参见”Increased specificity of primer annealing”)。*的KCl和(NH4)2SO4平衡组合,使得该缓冲液与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg2+浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性,无需进行耗时的优化(参见”Tolerance to variable magnesium concentration”)。

Procedure

HotStarTaq Master Mix Kit以方便的预混液形式提供,易于使用。95°C条件下孵育15分钟即可激活HotStarTaq DNA Polymerase,可以整合入已有的热循环程序。在室温下应用该预混液可快速、简单地构建反应体系,只需将25 µl HotStarTaq Master Mix移入每个PCR反应管,并加入25 µl溶于该试剂盒提供的不含RNase的纯水中的引物和模板DNA(参见”HotStarTaq procedure”)。移液步骤最少化,降低操作误差和污染风险,确保提高通量和可重复性。该试剂盒提供高效、经优化的实验方案,用于快速、方便的PCR反应体系构建。

Applications

HotStarTaq Master Mix Kit适合多种应用,包括各种富有挑战性的研究,如各种扩增应用:

  • 复杂的基因模板
  • 复杂的cDNA模板(如RT-PCR)
  • 低拷贝的靶分子(如单细胞PCR)
  • 多重引物对反应

Features

Specifications

应用 PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets
酶活 5'-> 3' exonuclease activity
预混液 Yes
反应类型 PCR amplification
real-time或终点法PCR Endpoint
样本/目标类型 Genomic DNA and cDNA
单一或多重 Single
有/无热启动酶 With hotstart
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商品编号 商品品名 规格 品牌
203445 热启动PCRmix 1000U Qiagen
203443 热启动PCRmix 250U Qiagen
203446 热启动PCRmix 2500U Qiagen

Qiagen203601/203603/203605/203607/203609

快速、高特异性扩增,适合多种应用
•高特异性PCR,所需优化次数少
•快速激活热启动酶,只需5分钟
•即用型PCR上样缓冲液,操作更简单快速

快速、高特异性扩增,适合多种应用

  • 高特异性PCR,所需优化次数少
  • 快速激活热启动酶,只需5分钟
  • 即用型PCR上样缓冲液,操作更简单快速

该聚合酶具备高特异性、高灵敏度,HotStarTaq DNA Polymerase所需的优化次数少,激活时间为5分钟。可在室温下构建PCR反应体系,且反应产物可直接上样至凝胶,因为新型的CoralLoad PCR缓冲液包含两种凝胶示踪染料。同时提供标准QIAGEN PCR缓冲液,便于操作。此外,一种新型的添加剂Q-Solution可确保高效扩增难扩增的模板(如富含GC的模板)。*的试剂盒组成和经优化的实验方案使PCR流程更加高效。

Performance

每一批HotStarTaq Plus DNA Polymerase都经过*的质量控制测试,包括:严格的PCR特异性和重复性分析,即使低拷贝的靶分子也可扩增。通过检测,HotStarTaq Plus DNA Polymerase优于其它供应者提供的试剂盒,确保高度特异性和在热启动PCR中的表现(参见”Highest specificity”、”Higher specificity with different primer–template systems”和表格)。该试剂盒提供的新型PCR缓冲液使得在多种PCR条件下都维持高特异性,无需优化。Q-Solution可进一步优化PCR,且该试剂盒中提供(参见”Amplification of difficult templates”)。总之,这些组合确保了在多种应用中的特异性扩增(参见”Effect of hot start on RT-PCR performance”和”Highly sensitive single-cell PCR”)。

热启动模式比较
  HotStarTaq Plus DNA Polymerase HotStarTaq DNA Polymerase Supplier AII提供的热启动酶 供应商R 供应商I (抗体介导) 手动 石蜡屏障
特异性扩增 ++ ++ + ++ + +/– +/–
PCR优化需求 ++ ++ +/– +/– +/–
易用性 +++ ++ ++ + +
激活速度 ++ + ++ ++ ++
 

HotStarTaq Plus DNA Polymerase特性

浓度:5 units/µl 
重组酶:是 
底物类似物:dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP 
延伸速度:72°C条件下2–4 kb/min
酶半衰期:97°C条件下10 min,94°C条件下60 min 
扩增效率:≥105倍 
5'–>3'外切酶活性:是 
额外添加A:是 
3'–>5' 外切酶活性:否 
核酸酶污染:否 
蛋白酶污染:否 
RNases污染:否 
自启活性:否  

Principle

HotStarTaq Plus DNA Polymerase具备同HotStarTaq DNA Polymerase一样的表现,激活时间只需5分钟。

 HotStarTaq Plus DNA Polymerase,是一种经修饰的QIAGEN Taq DNA Polymerase,以非活性形式提供,常温下没有聚合酶活性。避免PCR构建和循环初始阶段低温条件下非特异性引物的延伸和引物二聚体的形成(参见”Highest specificity”和”Higher specificity with different primer-template systems”)。95°C条件下孵育5分钟即可激活HotStarTaq Plus DNA Polymerase,这个步骤可整合入已有的热循环程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例,确保PCR每个循环特异性扩增(参见”Increased specificity of primer annealing”)。*的KCl和(NH4)2SO4平衡组合,使得该缓冲液与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg2+浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性,无需进行耗时的优化。

CoralLoad PCR Buffer

HotStarTaq Plus DNA Polymerase同时提供CoralLoad PCR Buffer,CoralLoad PCR Buffer具备QIAGEN PCR Buffer的所有优点,同时可直接将PCR产物上样到琼脂凝胶上,无需加入凝胶上样缓冲液。CoralLoad PCR Buffer具备同样高的PCR特异性,与常规的QIAGEN PCR Buffer一样可减少优化过程。此外,它包含两种指示染料,橙色染料和红色染料,可方便的判断DNA的迁移距离和优化跑胶时间(参见”CoralLoad PCR Buffer”)。该缓冲液提高移液的可见性,并可直接将PCR产物上样至凝胶,提高便利性。

Q-Solution

该产品同时提供Q-Solution,一种新型的PCR添加剂,通过修饰DNA熔解行为促进难扩增模板的扩增。这种*的试剂可进一步优化由模板引起的表现不理想的PCR,如过多的二级结构和富含GC的模板(参见”Amplification of difficult templates”)。不同于DMSO和其他PCR添加剂,Q-Solution的浓度是确定的,没有毒性,并且保证PCR的纯度。而且PCR中加入Q-Solution不会影响PCR的准确性。

Procedure

HotStarTaq Plus DNA Polymerase提供高效、经优化的实验方案,用于快速、方便的构建PCR反应体系。95°C条件下孵育5分钟激活HotStarTaq DNA Polymerase,可以整合入已有的热循环程序。反应可在室温下建立,更加方便和易于使用(参见”HotStarTaq Plus procedure”)。该试剂盒同时提供CoralLoad PCR Buffer,提高移液的可见性,并可直接将PCR产物上样至凝胶,提高便利性。

Applications

HotStarTaq Plus DNA Polymerase适合多种应用,包括各种富有挑战性的研究,如各种扩增应用:

  • 复杂的基因模板
  • 复杂的cDNA模板(如RT-PCR)
  • 低拷贝的靶分子(如单细胞PCR)
  • 多重引物对反应

Features

Specifications

应用 PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets
酶活 5' -> 3' exonuclease activity
预混液 No
反应类型 PCR amplification
real-time或终点法PCR Endpoint
样本/目标类型 Genomic DNA and cDNA
单一或多重 Single
有/无热启动酶 With hotstart
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商品编号 商品品名 规格 品牌
203605 热启动plus DNA聚合酶 1000U Qiagen
203603 热启动plus DNA聚合酶 250U Qiagen
203609 热启动plus DNA聚合酶 25000U Qiagen
203601 热启动plus DNA聚合酶 50U Qiagen
203607 热启动plus DNA聚合酶 5000U Qiagen

Qiagen 28604/28606

低洗脱体积,从凝胶中纯化多达5 μg的DNA片段(70 bp到4 kb)
•非常小的洗脱体积
•纯化速度快,操作简单
•回收率高,重复性好
•含有凝胶上样染料,方便样本分析

低洗脱体积,从凝胶中纯化多达5 μg的DNA片段(70 bp到4 kb)

  • 非常小的洗脱体积
  • 纯化速度快,操作简单
  • 回收率高,重复性好
  • 含有凝胶上样染料,方便样本分析

MinElute Gel Extraction Kit含有离心柱、缓冲液和收集管,用于基于硅胶膜技术的DNA片段纯化,适用于从多达400 mg的凝胶胶条中纯化70 bp到4 kb的DNA。特殊设计的离心柱可将DNA洗脱至非常小的体积(10 μl),获得高产、高度浓缩的DNA。通过内置的pH指示剂可容易确定DNA结合到离心柱的*pH值。使用MinElute体系纯化的DNA片段可即用于各种应用,包括测序、微阵列分析、连接和转化、限制性酶切、标记、显微注射、PCR和体外转录。

 

Performance

MinElute Gel Extraction Kit纯化去除引物、核苷酸、酶、矿物油、盐、琼脂糖、溴化乙锭和DNA样品中的其他杂质,获得的高度浓缩的DNA可用于各种下游应用(参见”Higher DNA concentrations“)。

MinElute QIAquick Gel Extraction Kit提供用于凝胶纯化的离心柱。使用微型离心机或真空装置快速纯化70 bp–4 kb的高度浓缩的DNA。(4 kb–10 kb的DNA片段使用QIAquick Gel Extraction Kit纯化,而小于70 bp或大于10 kb的片段使用QIAEX II Gel Extraction System纯化。)

Principle

MinElute Kits采用硅胶膜式纯化柱,在高盐条件下结合DNA,低盐或水可洗脱DNA。硅胶膜技术避免了松散树脂和悬液状态的问题及不方便性。经优化的特制结合缓冲液,于选择性吸附特定大小范围内的DNA分子。

凝胶上样染料

为更快速、更方便地进行分析,提供上样染料。GelPilot Loading Dye含有3种示踪染料(xylene cyanol、bromophenol blue和orange G),便于优化凝胶运行时间,避免小片段DNA跑得过远(参见”GelPilot Loading Dye”)。

Procedure

MinElute体系应用简单的结合-洗涤-洗脱步骤(参见”MinElute procedure”)。凝胶碎片溶解在含有pH指示剂的缓冲液中,可方便确定DNA结合的*pH值(参见pH Indicator Dye),然后将混合物装载到MinElute离心柱上。在高盐条件下,核酸吸附在硅胶膜上。洗去杂质并用少量的低盐缓冲液或水洗脱DNA,可即用于各种下游应用。

操作

MinElute离心柱提供两种操作(参见”MinElute procedure”)。将离心柱放入传统的微型离心机或任何含有连接器的真空装置上,如带有QIAvac Luer Adapters的QIAvac 24 Plus。MinElute Gel Extraction Kit和QIAGEN的其他离心柱试剂盒,可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动进行,可提高产量,获得标准化结果。

Applications

MinElute或QIAquick System纯化的DNA片段可直接用于多种下游应用,包括:

  • 测序,包括第二代测序
  • 微阵列分析
  • 连接和转化
  • 限制性酶切
  • 标记

Features

Specifications

结合能力 5 µg
洗脱体积 10 µl
规格 Tube
片段大小 70 bp – 4 kb
处理 Manual
回收:寡核苷酸dsDNA Recovery: dsDNA fragments
样本类型:应用 DNA: PCR reactions
技术 Gel extraction

 

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Qiagen 28004/28006

低洗脱体积,纯化多至5 μg的PCR产物(70 bp到4 kb)
•非常小的洗脱体积
•纯化速度快,操作容易
•回收率高,重复性好
•含有凝胶上样染料,方便样本分析

低洗脱体积,纯化多至5 μg的PCR产物(70 bp到4 kb)

  • 非常小的洗脱体积
  • 纯化速度快,操作容易
  • 回收率高,重复性好
  • 含有凝胶上样染料,方便样本分析

MinElute PCR Purification Kit含有离心柱,缓冲液和收集管,利用硅胶膜技术纯化得到70 bp到4 kb的PCR产物。特殊设计的离心柱可将DNA洗脱至非常小的体积(10 μl),获得高产、高度浓缩的DNA。通过内置的pH指示剂可简单确定DNA结合到离心柱的*pH值。实验可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动运行。

 

Performance

MinElute PCR Purification过程去除引物、核苷酸、酶、矿物油、盐和DNA样品中的其他杂质(参见”Efficient primer removal”)。 

MinElute PCR Purification Kit提供离心柱,用于PCR产物的回收。使用微型离心机或真空装置快速获得高度浓缩的DNA片段(70 bp–4 kb)。(大于4 kb的DNA片段使用QIAquick PCR Purification Kit纯化。)

Principle

MinElute PCR Purification Kit采用硅胶膜式纯化柱,在高盐条件下结合DNA,低盐或水可洗脱DNA。硅胶膜技术避免了松散树脂和悬液状态的问题及不方便性。

凝胶上样染料

为更快速、更方便地进行分析,提供上样染料。GelPilot Loading Dye含有3种示踪染料(xylene cyanol、bromophenol blue和orange G),便于优化凝胶运行时间,避免小片段DNA跑得过远(参见”GelPilot Loading Dye”)。

Procedure

MinElute System应用简单的结合-洗涤-洗脱步骤。直接将结合缓冲液加入PCR样品或其他酶反应中,然后将混合液装载到MinElute离心柱上。结合缓冲液含有pH指示剂,可方便地确定DNA结合的*pH值(参见pH Indicator Dye)。在高盐条件下,核酸吸附在硅胶膜上。洗去杂质并用少量的低盐缓冲液或水洗脱DNA,可即用于各种下游应用。

操作

MinElute离心柱有两种方便的处理方式(参见”MinElute procedure”)。可将离心柱放入传统的微型离心机或通过适配器连接到任何真空装置上,诸如通过QIAvac Luer Adapters连接到QIAvac 24 Plus或QIAvac 6S,也可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动进行。

Applications

MinElute System纯化的DNA片段可直接用于各种下游应用,包括:

  • 测序,包括第二代测序
  • 微阵列分析
  • 连接和转化
  • 限制性酶切
  • 标记

Features

Specifications

结合能力 5 µg
洗脱体积 10 µl
规格 Tube
片段大小 70 bp – 4 kb
处理 Manual
回收:寡核苷酸dsDNA Recovery: oligonucleotides, dsDNA
去除<10mers、17–40mers的染料终止子蛋白 Removal <40mers
样本类型:应用 DNA, oligonucleotides: PCR reactions
技术 Silica technology

 

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Qiagen 51192/51194

从血液中纯化基因组DNA、线粒体DNA或病毒DNA,zui高可达600 μg
•快速纯化高品质,即用型DNA
•无需有机提取或乙醇沉淀
•重复性好,产量高
•*去除污染物和抑制剂

从血液中纯化基因组DNA、线粒体DNA或病毒DNA,zui高可达600 μg

  • 快速纯化高品质,即用型DNA
  • 无需有机提取或乙醇沉淀
  • 重复性好,产量高
  • *去除污染物和抑制剂

QIAamp DNA Blood Maxi Kit应用硅胶模技术,用于实验室从全血、血浆、血清和其它体液中纯化DNA。QIAamp DNA Blood Maxi Kit可处理3–10 ml新鲜或冷冻的人类全血。QIAamp Maxi离心柱可在离心机或真空装置上处理(使用真空装置需要额外的缓冲液AW1 [货号:19081]和AW2 [货号:19072] )。

 

Performance

QIAamp DNA Blood Kits根据样本存储条件和新鲜程度不同,可纯化获得200 bp–50 kb的DNA(参见”Apoptotic banding in stored blood”)。纯化的DNA适用于长片段PCR扩增(参见”Long-range PCR”)和RFLP分析等等,如亲子鉴定(参见”Paternity testing by RFLP analysis”)。

使用QIAamp DNA Blood Maxi Kit获得DNA的回收率可高达95.8%,依初始细胞密度而定(见表)。

从不同细胞密度的人类全血中纯化的DNA产量
白细胞/ ml DNA产量(µg) DNA回收率(%)
2.5 x 105 15.8 95.8
1.0 x 106 60.4 91.5
5.0 x 106 312.0 94.5
1.0 x 107 624.6 94.6
使用QIAamp DNA Blood Maxi Kit,从10 ml人类全血中纯化得到基因组DNA,并用1 ml洗脱液洗脱。*次的洗出液再次上样到离心柱并离心(即:再洗脱)。假设一个白细胞包含6.6 pgDNA,计算DNA回收率。

Principle

无需苯酚-CHCl3抽提。DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上,让污染物流过。PCR抑制物,如:二价阳离子和蛋白,可通过两步有效的洗涤步骤被*去除,结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。

Procedure

QIAamp DNA Blood Maxi Kit采用快速离心柱操作简化了从全血或相关体液中纯化DNA的流程(参见”procedure”)。该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本。QIAamp DNA Blood Maxi Kit可处理3–10 ml的样本,制备时间55分钟。可从10 ml健康全血中获得300–600 µg DNA,洗脱体积500–2000 µl。

QIAamp DNA Blood Kits提供全面的操作手册,包括从不同来源的样本中纯化DNA的操作流程。QIAamp样本制备技术已*经过验证。

Applications

QIAamp DNA Blood Maxi Kit使用经验证的QIAamp技术,采用带有50 ml收集管的Maxi离心柱从不同来源的样本中纯化DNA。样本来源包括:

新鲜和冷冻的全血或白膜层

血浆或血清

骨髓

淋巴细胞

体液

Features

Specifications

应用 PCR, blotting
洗脱体积 500–2000 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Whole blood, body fluids
处理 Manual (centrifugation or vacuum)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Genomic DNA, mitochondrial DNA, viral DNA
样本量 3–10 ml
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 55 minutes
产量 300–600 µg

 

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Qiagen 51183/51185

从血液和相关体液中纯化基因组DNA、线粒体DNA或病毒DNA,zui高可达60 μg
•快速纯化高品质、即用型DNA
•无需有机提取或乙醇沉淀
•重复性好,产量高
•*去除污染物和抑制剂

从血液和相关体液中纯化基因组DNA、线粒体DNA或病毒DNA,zui高可达60 μg

  • 快速纯化高品质、即用型DNA
  • 无需有机提取或乙醇沉淀
  • 重复性好,产量高
  • *去除污染物和抑制剂

QIAamp DNA Blood Midi Kits应用硅胶模技术,用于实验室从全血、血浆、血清和其它体液中纯化DNA。QIAamp DNA Blood Midi Kit可处理0.3–2 ml新鲜或冷冻的人类全血。QIAamp Midi离心柱可在离心机或真空装置上处理(使用真空管需要额外的缓冲液AW1 [货号:19081]和AW2 [货号:19072] )。

 

Performance

QIAamp DNA Blood Kits根据样本存储条件和新鲜程度不同,可纯化获得200 bp–50 kb的DNA(参见”Apoptotic banding in stored blood”)。纯化的DNA适用于长片段PCR扩增(参见”Long-range PCR”)和RFLP分析等等,如亲子鉴定(参见”Paternity testing by RFLP analysis”)。

使用QIAamp DNA Blood Midi Kit获得DNA的回收率可高达94.5%,依初始细胞密度而定(见表)。

从不同细胞密度的人类全血中纯化的DNA产量
白细胞/ ml DNA产量(µg) DNA回收率(%)
2.5 x 105 3.0 92.3
1.0 x 106 11.0 91.7
5.0 x 106 62.4 94.5
1.0 x 107 116.3 88.1
从2 ml人类全血中纯化得到基因组DNA,并用300 µl洗脱液洗脱。*次的洗出液再次上样到离心柱并离心(即:再洗脱)。假设一个白细胞包含6.6 pgDNA,计算DNA回收率。 

Principle

无需苯酚-CHCl3抽提。核酸特异性结合到QIAamp硅胶膜上,污染物流走。PCR抑制剂,如:二价阳离子和蛋白,可通过两步有效的洗涤被*去除,结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。QIAamp DNA Blood技术从全血或相关体液纯化得到的基因组、线粒体或病毒DNA,可即用于PCR和印迹实验中。

Procedure

QIAamp DNA Blood Midi Kit采用快速离心柱操作简化了从全血或相关体液中分离DNA的流程(参见”procedure”)。该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本。QIAamp DNA Blood Midi Kit可处理0.3–2 ml的样本,制备时间55分钟。可从1 ml健康全血中获得20–60 µg DNA,洗脱体积100–400 µl。

QIAamp DNA Blood Kits提供全面的操作手册,包括从不同来源的样本中纯化DNA的操作流程。QIAamp样本制备技术已*经过验证。

Applications

QIAamp DNA Blood Midi Kit使用经验证的QIAamp技术,采用带有15 ml收集管的Midi离心柱从不同来源的样本中纯化DNA。样本来源包括:

新鲜和冷冻的全血或白膜层

血浆或血清

骨髓

淋巴细胞

体液

Features

Specifications

应用 PCR, southern blotting
洗脱体积 100–400 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Whole blood, body fluids
处理 Manual (centrifugation or vacuum)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Genomic DNA, mitochondrial DNA, viral DNA
样本量 0.3–2 ml
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 55 minutes
产量 20–60 µg

 

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51192 血液DNA大提试剂盒 10T Qiagen
51194 血液DNA大提试剂盒 50T Qiagen
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51183 血液DNA中提试剂盒 20T Qiagen

Qiagen 51104/51106 血液DNA小提试剂盒

从血液和相关体液中纯化基因组DNA、线粒体DNA或病毒DNA,zui高可达12 μg
•快速纯化高品质、即用型DNA
•无需有机提取或乙醇沉淀
•重复性好,产量高
•*去除污染物和抑制剂

从血液和相关体液中纯化基因组DNA线粒体DNA或病毒DNA,zui高可达12 μg

  • 快速纯化高品质、即用型DNA
  • 无需有机提取或乙醇沉淀
  • 重复性好,产量高
  • *去除污染物和抑制剂

QIAamp DNA Blood Mini Kit应用硅胶膜技术,从多达200 μl新鲜或冷冻的人全血样本中纯化DNA。QIAamp Mini离心柱可在离心机或真空装置上使用。QIAamp DNA Blood Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化仪自动纯化DNA。

Performance

QIAamp DNA Blood Kits根据样本存储条件和新鲜程度不同,可纯化获得大小为200 bp–50 kb的DNA(参见”Apoptotic banding in stored blood”)。纯化的DNA适用于长片段PCR扩增(参见”Long-range PCR”)和RFLP分析等等,如亲子鉴定(参见”Paternity testing by RFLP analysis”)。

Principle

无需苯酚-CHCl3抽提。DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上,污染物流走。PCR抑制剂,如:二价阳离子和蛋白,可通过两步有效的洗涤被*去除,结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。QIAamp DNA Blood技术从血液或相关体液纯化得到的基因组、线粒体或病毒DNA,可即用于PCR和印迹实验中。

Procedure

QIAamp DNA Blood Mini Kit采用快速离心柱或真空操作简化了从血液或相关体液中分离DNA的流程(参见”procedure”)。该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本。 QIAamp DNA Blood Mini Kit可处理多达200 µl的样本,制备时间20–40分钟。200 µl健康全血可获得4–12 µg DNA,洗脱体积50–200 µl。QIAamp DNA Blood Mini Kit的操作可自动化(参见”QIAcube”)。

QIAamp样本制备技术是*经过验证的。

真空处理

使用QIAamp DNA Blood Mini Kit,血液样本可用真空处理而无需离心,可更快速、更方便地纯化DNA。使用VacValves和VacConnectors装置,QIAamp Mini离心柱可配合QIAvac 24 manifold真空底座使用。在样本流速显著不同时,需使用VacValves以确保*的真空条件。一次性的VacConnectors用于避免交叉污染。配合VacConnectors,也可使QIAamp离心操作在带有QIAvac Luer Adapters的QIAvac 6S上进行。

Applications

QIAamp DNA Blood Mini Kit使用经验证的QIAamp技术,采用带有2.0 ml收集管的Mini离心柱从不同来源的样本中纯化DNA。样本来源包括:

新鲜和冷冻的全血或白膜层

血浆或血清

骨髓

淋巴细胞

血小板

体液

Features

Specifications

应用 PCR, long-range PCR, Southern blotting
洗脱体积 50–200 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Whole blood, body fluids
处理 Manual (centrifugation or vacuum)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Genomic DNA, mitochondrial DNA, viral DNA
样本量 1–200 µl
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 20–40 minutes
产量 4–12 µg

 

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商品编号 商品品名 规格 品牌
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