小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代) 货 号 #M0290L-NEB酶试剂

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小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代)                              收藏

小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代)               货   号                  #M0290L 小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代)               货   号                  #M0290L 小牛肠碱性磷酸酶(CIP)(停产有替代)               货   号                  #M0290L

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停产通知

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特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化,防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

小牛肠碱性磷酸酶(CIP)催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。CIP 在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。  

来源

 小牛肠粘膜。 

反应条件

1X 反应缓冲液
[50 mM KAc, 20 mM Tris-
Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml BSA (pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。  

质保声明

小牛肠碱性磷酸酶(CIP)经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。   

单位定义

1 单位指在 1 ml 反应体系中,37℃ 条件下,1 分钟催化 1 μmol 的对硝基苯磷酸盐(PNPP)水解成对硝基苯酚所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。   

浓度

10,000 units/ml。  

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。   

T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK) 货 号 #M0201L-NEB酶试剂

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T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                              收藏

T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L

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相关产品

T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)

特性

 DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应
 DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA 测序
 用 T4 多聚核苷酸激酶(NEB #M0201)除去 3´ 磷酸基团
 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)(NEB #M0236)将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´磷酸化,制备pNp  底物,用于添加到 DNA 或RNA的 3´ 端
 用 T4 多聚核苷酸激酶(3´ 磷酸酶活性缺失)(NEB #M0236)对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端   进行标记

概述

T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链 DNA 或 RNA)的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶(NEB #M0201)还具有 3´ 磷酸酶活性,将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶(NEB #M0236)具有所有激酶的活性,但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。  

来源

重组 E. coli 菌株,克隆有 T4 多聚核苷酸激酶基因。  

反应条件

1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),10 mM MgCl2,5 mM DTT],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。  

注意事项

达到最佳酶活力,需要新鲜缓冲液(在旧缓冲液中,由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力)。  

放射性标记反应:50 μl 反应体系中,用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。

CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。

DNA 或 RNA 磷酸化反应(放射性和非放射性)操作流程请联系我们。

要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率,可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前,先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟,然后冰上冷却,并加入 5%(w/v)的 PEG-8,000。

T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性,但是为了适用于高活力的放射性标记反应,在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。

一般来说,进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下,T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接,无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态,则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。

 

质保声明

T4 多聚核苷酸激酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。   

单位定义

1 单位即 1 个 Richardson 单位,指 37℃条件下,30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量(1)。单位活性检测条件请联系我们。   

浓度

10,000 units/ml。  

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。   

T4 多聚核苷酸激酶反应


T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)                 货   号                  #M0201L
 
在 50 μl T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液体系中,37℃温育 30 分钟,γ-磷酸基团从 ATP 转移至 d(T)的 5´ 羟基末端 [ATP 与 d(T)8 比例是 1:1,量为 50 pmol],结果显示 20 单位酶量可使超过 90% 的磷酸基团转移。

热稳定无机焦磷酸酶 货 号 #M0296L-NEB酶试剂

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热稳定无机焦磷酸酶                              收藏

热稳定无机焦磷酸酶               货   号                  #M0296L 热稳定无机焦磷酸酶               货   号                  #M0296L 热稳定无机焦磷酸酶               货   号                  #M0296L

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特性

  增强 DNA 复制

热稳定无机焦磷酸酶               货   号                  #M0296L 

概述

无机焦磷酸酶(PPase)催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。 
P207–4 + H20 → 2HP04–2 

来源

重组 E. coli 菌株,携带从极度耐热的 Thermococus litoralis 中克隆的无机焦磷酸酶基因。  

单位定义

1 单位指标准反应条件下 [0.5 ml 反应体系,50 mM Tricine(pH 8.5),1 mM MgCl2 和 0.32 mM PPi,75℃ 反应 10 分钟],每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐的酶量。  

浓度

2,000 units/ml。  

SP6 RNA 聚合酶 货 号 #M0207S-NEB酶试剂

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SP6 RNA 聚合酶                              收藏

SP6 RNA 聚合酶              货   号                  #M0207S SP6 RNA 聚合酶              货   号                  #M0207S

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相关产品

T3 RNA 聚合酶
T7 RNA 聚合酶
SP6 RNA 聚合酶

特性

 制备放射标记的 RNA 探针
 合成用于体外翻译的 RNA
 合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成 RNA 反义链,调控基因表达  

概述

T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体,可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中,以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性,可进行准确剪切。实验证实,用靶标 DNA 反向转录所产生的反义 RNA 能特异性阻断体内 mRNA 的翻译。由于RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定,因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。 T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株,该菌株携带含可诱导的 lac UV5 启动子及其控制的 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带可表达T3 基因载体。

反应条件

1X RNAPol 反应缓冲液 [40 mM Tris-HClpH 7.9),6 mM MgCl22 mM 亚精胺,1 mM DTT]。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP(不随酶提供)和带有启动子的模板 DNA,在 37 ℃ 温育。

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。  

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下, 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。   

浓度

T3 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;T7 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;SP6 RNA 聚合酶:20,000 units/ml。  

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。   

RNase H 货 号 #M0297L-NEB酶试剂

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RNase H                              收藏

RNase H               货   号                  #M0297L RNase H               货   号                  #M0297L RNase H               货   号                  #M0297L

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特性

 重组酶
 除去杂交到 poly(dT) 上的 mRNA poly(A)
 在 cDNA 第二链合成时除去 mRNA 

概述

核糖核酸酶 HRNase H)是一种核糖核酸内切酶,它能够特异性地水解杂交到 DNA 链上RNA 磷酸二酯键。该酶不能消化单链或双链DNA
 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从 E. coli 中克隆的 RNase H(rnh)基因。 

反应条件

1X RNase H 反应缓冲液 [75 mM KCl,50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃),3 mM MgCl2 和 10 mM DTT],37℃ 温育。热失活:65℃ 20 分钟。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中, 37℃ 条件下, 20 分钟从 20 pmol荧光标记的 50 bp RNA-DNA杂交链中水解生成 1 nmol 核苷酸所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.neb-china.com www.neb.com
 

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

DNase I(无 RNase) 货 号 #M0303L-NEB酶试剂

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DNase I(无 RNase)                              收藏

DNase I(无 RNase)                货   号                  #M0303L DNase I(无 RNase)                货   号                  #M0303L DNase I(无 RNase)                货   号                  #M0303L DNase I(无 RNase)                货   号                  #M0303L

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特性

·转录反应后 DNA 模板的降解
·除去 RNA 样品中的基因组 DNA 污染
·DNase I 印迹分析
·切刻平移

概述

DNase I(无 RNase)是一种非特异性核酸内切酶,切割 DNA 产生具有 3´ 羟基和 5´ 磷酸末端的二核苷酸、三核苷酸和寡核苷酸产物。DNase I 可以作用于单链 DNA、双链 DNA、染色质和 RNA:DNA 杂交链。 

来源

重组 E. coli 菌株,含有牛胰腺 DNase I 的 MBP 融合克隆。 

反应条件

1X DNase I 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl (pH 7.6 @ 25℃) ,2.5 mM MgCl2,0.5 mM CaCl2],37℃ 温育。
热失活:75℃ 10 分钟。 

质保声明

无 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,10 分钟完全分解 1 μg pBR322 DNA 所需要的酶量。
完全降解是指绝大多数的 DNA 片段降解成为四核苷酸或更短的核苷酸。 

浓度

2,000 units/ml。 

注意事项

为避免酶失活过程中 RNA 被降解,应添加终浓度为 5 mM 的 EDTA。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

人胎盘 RNase 抑制剂 货 号 #M0307L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNase 抑制

人胎盘 RNase 抑制剂                              收藏

人胎盘 RNase 抑制剂             货   号                  #M0307L

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特性

 抑制常见的真核 RNase
 与 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶兼容
 在较宽的 pH 范围内均有活性(pH 5-8)
 适用于 cDNA 合成反应
 体外转录/翻译 

概述

RNase 抑制剂是重组人胎盘蛋白质,可以特异性地抑制 RNase A、B、C 活性,但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNase H 和来源于曲霉属的 RNase 无效。此外,与下列聚合酶共同使用时,未观察到其抑制聚合酶的活性,如:Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶和噬菌体 RNA 聚合酶(SP6、T7 或 T3)。
RNase 抑制剂的分子量为 50 kDa,通过非共价键以 1:1 的比例与 RNase 结合而抑制其酶活,结合常数大于 1014。 

来源

重组 E. coli 菌株,含有来源于人胎盘的 RNase 抑制剂基因。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指抑制 5 ng RNase A 50% 活性所需的 RNase 抑制剂的用量。活性测定是通过抑制 RNase A 对胞嘧啶 2´,3´ -环单磷酸盐的水解来进行的。 

浓度

40,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

RNase If 货 号 #M0243L-NEB酶试剂

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RNase If                              收藏

RNase If               货   号                  #M0243L RNase If               货   号                  #M0243L RNase If               货   号                  #M0243L

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#M0243L
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特性

 重组酶
 去除 DNA 和蛋白质制备过程中的 RNA
 降解单链 RNA 生成单、二或三核苷酸
 用于核糖核酸酶保护试验 

概述

核糖核酸酶  If(RNase If是一种 RNA 核酸内切酶,能够切割所有 RNA 二核苷酸键,产生 基和 2´ , 3´ 环状单核苷酸。该酶对单链 RNA 的活性比双链 RNA 高。重组 RNase IRNase I(来源于E. coli)与麦芽糖结合蛋白的融合蛋白,与野生型RNase I 具有相同活性。
 

来源

重组 E. coli 菌株,携带来自 E. coli 的 RNase I 基因(rna)及编码麦芽糖结合蛋白(MBP)的基因。 

反应条件

1X NEBuffer 3
[100 mM NaCl,50 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],37℃ 温育。
热失活:70℃ 20 分钟。 

使用注意事项

RNase If 不能降解 DNA。降解单链 RNA 的能力比降解双链 RNA 的能力强。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染

 

单位定义

1 单位指 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,15 分钟完全降解 1 pmol 合成的 33-mer ssRNA 所需的酶量。反应在 1X NEBuffer 3 中进行,20% 丙烯酰胺凝胶电泳(40:1 Bis),SYBR® Gold 染色后观察结果。单位活性检测条件请联系我们。 www.neb-china.com 或 www.neb.com 。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

p19 siRNA 结合蛋白(停产) 货 号 #M0310S-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

p19 siRNA 结合蛋白(停产)                              收藏

p19 siRNA 结合蛋白(停产)             货   号                  #M0310S

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停产通知

 产品于 2020年 1 月 2 日停产.

相关产品

几丁质树脂 
几丁质磁珠

特性

 与 siRNA 结合效率高
 可通过几丁质磁珠亲和纯化 siRNA 

概述

p19 siRNA 结合蛋白分子量为 19 kDa,来自于植物香石竹意大利环斑病毒(CIRV)。该蛋白与 siRNA 具有纳摩尔级的亲和力,和 3´ 末端有 2 个核苷酸突出、5´ 末端是磷酸基的 21 nt siRNA 结合力高于其它片段。该蛋白是以二聚体的形式与 siRNA 结合,结合力取决 RNA 片段大小,而与 RNA 序列无关。如果 siRNA 的长度增加 4 个碱基,则与蛋白的亲和力会下降约 100 倍。当 p19 siRNA 结合蛋白在植物体内表达时,能抑制 RNAi 作用。 

来源

p19 siRNA 结合蛋白以融合蛋白的形式在大肠杆菌中克隆和表达。其 N 末端带有 MBP(麦芽糖结合蛋白),C 末端带有 CBD(几丁质结合蛋白)。 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。产品经纯化,琼脂糖凝胶电泳后 EB 染色检测,无 DNA 或 RNA 污染。 

单位定义

1 单位指 25℃ 条件下,1 小时内结合 10 ng 的 siRNA 所需要的蛋白量。单位活性检测条件请联系我们。  

分子量

67 kDa。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

ShortCut® RNase III 货 号 #M0245L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

ShortCut® RNase III                              收藏

ShortCut®  RNase III               货   号                  #M0245L ShortCut®  RNase III               货   号                  #M0245L ShortCut®  RNase III               货   号                  #M0245L

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特性

 为 RNA 干扰研究提供 siRNA
 基因沉默
 靶标确认
 去除 dsRNAs

概述

ShortCut RNase III 能将较长双链 RNA 切割成一组大小不同的由 18-25 bp 组成的小片段干扰RNAsiRNA),更适合用于哺乳动物细胞的 RNA干扰实验。用 1.5 个单位(1 μl)的 ShortCut RNase III 能够将 1 μg dsRNA 完全切割成 siRNA
 

来源

重组 E. coli 菌株,克隆表达融合有麦芽糖结合蛋白(MBP)的 E. coli RNase III 基因(rnc)。 

反应条件

 
1X ShortCut RNase III 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl50 mM NaCl1 mM DTTpH 7.5 @ 25℃)]补加 20 mM MnCl2(随产品提供),37℃ 温育。 

质保声明

无核酸内切酶和核酸外切酶污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 的反应体系中,37℃ 条件下,20 分钟将 1 μg dsRNA 切割成 siRNA 所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 

浓度

2,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

ShortCut RNase III 的优势

 制备适合任何基因靶点的有效 siRNA
 异源 siRNA 可以确保沉默靶基因
 从 DNA 模板到转染只需要一天
 避免了使用合成 siRNA 需反复摸索实验条件的问题
 

ShortCut®  RNase III               货   号                  #M0245L


图:
使用 ShortCut RNase III 制备的 siRNA:A) 不同单位数量的 ShortCut RNase III 与 2 μg 500 bp 的 dsRNA 孵育 20 分钟。B) 用 ShortCut RNase III 消化 dsRNA 片段(1 kb 和 175 bp)。消化产物通过 20% TBE 聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。

小鼠 RNase 抑制剂 货 号 #M0314L-NEB酶试剂

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小鼠 RNase 抑制剂                              收藏

小鼠 RNase 抑制剂             货   号                  #M0314L

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特性

 抑制常见真核 RNase
 与 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶兼容
 适用于 cDNA 合成和 RT-PCR
 体外转录 / 翻译
 酶催化的 RNA 标记反应 

相比起人源和猪源 RNase 抑制剂,小鼠 RNase 抑制剂在抗氧化能力上有显著提升。

概述

小鼠 RNase 抑制剂是鼠源重组蛋白,分子量为 50 kDa,可以特异性抑制 RNase A、B 和 C 活性。它与 RNase 以 1:1 的比例高效非共价结合从而抑制其活性。但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNase H 或来源于曲霉属的 RNase 无效。此外,与下列聚合酶共同使用时,该抑制剂不会抑制聚合酶的活性,如:Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶或噬菌体 RNA 聚合酶(SP6、T7 或 T3)。
重组小鼠 RNase 抑制剂不含有半胱氨酸。已证实,人源中的半胱氨酸对氧化非常敏感并导致抑制剂失活。因此,小鼠 RNase 抑制剂与人/猪 RNase 抑制剂相比,抗氧化能力显著提高,且在 DTT 浓度较低(<1 mM)时更稳定。这使其在不适宜高浓度 DTT 的反应中更具优势,如实时 RT-PCR。 

来源

携带有鼠源 RNase 抑制剂基因的 E. coli 菌株。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指抑制 5 ng RNase A 50% 活性所需要的小鼠 RNase 抑制剂的量。活性测定是通过抑制 RNase A 对胞嘧啶 2´,3´ -环单磷酸盐的水解来进行。 

浓度

40,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  


T7 RNA 聚合酶 货 号 #M0251L-NEB酶试剂

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T7 RNA 聚合酶                              收藏

T7 RNA 聚合酶              货   号                  #M0251L T7 RNA 聚合酶              货   号                  #M0251L

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相关产品

T3 RNA 聚合酶
SP6 RNA 聚合酶
 

特性

 制备放射标记的 RNA 探针
 合成用于体外翻译的 RNA
 合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成 RNA 反义链,调控基因表达  

概述

T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体,可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中,以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性,可进行准确剪切。实验证实,用靶标 DNA 反向转录所产生的反义 RNA 能特异性阻断体内 mRNA 的翻译。由于RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定,因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。 T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株,该菌株携带含可诱导的 lac UV5 启动子及其控制的 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带可表达T3 基因载体。

反应条件

1X RNAPol 反应缓冲液 [40 mM Tris-HClpH 7.9),6 mM MgCl22 mM 亚精胺,1 mM DTT]。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP(不随酶提供)和带有启动子的模板 DNA,在 37 ℃ 温育。

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。  

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下, 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

T3 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;T7 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;SP6 RNA 聚合酶:20,000 units/ml。  

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。   

M-MulV 反转录酶 货 号 #M0253L-NEB酶试剂

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M-MulV 反转录酶                              收藏

M-MulV 反转录酶              货   号                  #M0253L M-MulV 反转录酶              货   号                  #M0253L

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特性

 合成 cDNA
 RNA 测序
 RT-PCR 

概述

莫洛尼氏鼠白血病病毒(M-MuLV)反转录酶是一种 RNA 介导的 DNA 聚合酶。该酶能以 RNA(合成 cDNA 时)或单链 DNA 做模板由引物起始合成一条互补的 DNA。M-MuLV 反转录酶无 3´→5´ 核酸外切酶活性。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从 M-MuLV 中克隆的反转录酶基因。 

反应条件

1X M-MuLV 反转录酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃),75 mM KCl,3 mM MgCl2,10 mM DTT],加入 dNTPs(不随酶提供),37-42℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。 

质保声明

无核酸内切酶、外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指以 poly(rA) 为模板、oligo(dT) 为引物,在 37℃ 条件下,10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

200,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

5´ 去腺苷化酶 货 号 #M0331S-NEB酶试剂

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5´ 去腺苷化酶                              收藏

5´ 去腺苷化酶               货   号                  #M0331S 5´ 去腺苷化酶               货   号                  #M0331S 5´ 去腺苷化酶               货   号                  #M0331S

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2,500 units
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特性

 DNA 和 RNA 5´ 末端的去腺苷化
 Aprataxin 依赖的 DNA 修复检测
 分析双核苷四磷酸

概述

酵母 去腺苷化酶是组氨酸三聚体(HIT家族中的一员,属于组氨酸三聚体核苷结合蛋白Hint)的分支。它是 aprataxin 在酵母中的直系同源物。人 aprataxin 的突变会导致神经系统疾病,如共济失调伴眼动失用症 I。通过从 DNA 端去除 AMPAMP-DNA 水解酶活性),人源 腺苷化酶可以去除未连接中间体,它还可以通过去除 3´ –磷酸和 3´ –磷酸乙醇酸修复 DNA 端损伤。人 aprataxin 作用于小分子,如核苷多磷酸双腺苷四磷酸(AppppA)和 lysyl-AMP

去腺苷化酶是由酿酒酵母(S. cerevisiae)的 HNT3基因编码。 NEB 研究显示该蛋白能从 DNA RNA末端去腺苷化,余下 末端磷酸。它也能切割 AppppA 生成 ATP AMP。未检测出其对 lysylAMP 有作用。

 

来源

从携带编码酿酒酵母 5´ 去腺苷化酶质粒的 E. coli 菌株中纯化而得。 

反应条件

20 μl 反应体系:1X NEBuffer 2 [50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],5–50 pmol 腺苷化 DNA (AMPDNA),30℃ 温育。
热失活:70℃ 20 分钟。 

单位定义

1 单位指 30℃ 条件下,10 分钟从 5´ 腺苷化 DNA 寡聚体中去除 10 pmol AMP 所需的酶量。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

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核酸外切酶 T 货 号 #M0265L-NEB酶试剂

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核酸外切酶 T                              收藏

核酸外切酶 T                货   号                  #M0265L 核酸外切酶 T                货   号                  #M0265L 核酸外切酶 T                货   号                  #M0265L 核酸外切酶 T                货   号                  #M0265L

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250 units
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特性

 去除 DNA 或 RNA 3´ 突出末端生成平末端 

概述

核酸外切酶 T(Exo T),又称为 RNase T,是一种单链 RNA 或 DNA 特异性核酸酶,该酶需要游离的 3´ 末端,以 3´ →5´ 方向去除核苷酸。核酸外切酶 T 对于 DNA 的活性比 RNA 高十倍。核酸外切酶 T 可用于含有 3´ 突出末端的 RNA 或 DNA 的末端平滑化。

来源

核酸外切酶 T 与麦芽糖结合蛋白(MBP)进行 C-端融合后,过表达并纯化。随后用 Factor Xa 蛋白酶从核酸外切酶 T 上切除 MBP,最后纯化去除 Xa 因子 和 MBP。从 MBP 上切割的核酸外切酶 T 在 N 端多出一个氨基酸,且 Phe 替换了 Met(即 Glu-Phe-Exo T 而非 Met- Exo T)。 

反应条件

1X NEBuffer 4
[50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg (Ac)2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],25℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。 

质保声明

无核酸内切酶和外切酶污染。 

单位定义

1 单位指 100 μl 反应体系中,25℃ 条件下,30 分钟从 1 nmol [3H]-标记的多聚胸腺嘧啶生成 0.1 nmol TCA 可溶性核苷酸所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

使用注意事项

Exo T 对 DNA 和 RNA 的反应效率不同,DNA 是 RNA 的 100 倍。对于 RNA,在标准反应条件下,完全消化 1.0 pmol rA20 需要 1 单位 Exo T,反应结果通过凝胶电泳检测。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。  

Poly(U) 聚合酶 货 号 #M0337S-NEB酶试剂

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Poly(U) 聚合酶                              收藏

Poly(U) 聚合酶               货   号                  #M0337S Poly(U) 聚合酶               货   号                  #M0337S Poly(U) 聚合酶               货   号                  #M0337S

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相关产品

小鼠 RNase 抑制剂
rNTP 套装

特性

 用 UTP 标记 RNA
 为 RNA 添加 poly(U) 尾,用于克隆
 研究 RNA 转染至真核细胞的稳定性和翻译效率
 2´ O-甲基的 3´ 修饰末端添加 poly(A) 尾 

概述

Poly(U) 聚合酶催化 UTP 或 ATP 转化的 UMP 或 AMP 添加到 RNA 3´ 端,该反应不依赖模板的存在。 

来源

重组 E. coli ,携带有 Schizosaccharomyces pombe Cid1 的 Poly(U) 聚合酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 2
[50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],加入 1 mM UTP(不随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,10 分钟催化 1 nmol 的 UMP 掺入 RNA 所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

2,000 units/ml。

注意事项

在 NEBuffer 2 中 Poly(U) 聚合酶将催化 UTP 或 ATP 转化成 UMP 或 AMP 添加到 RNA 3´ 端。Poly(U) 加尾长度随 UTP 和引物浓度而变化。低引物浓度下(< 100 pmol) Poly(U) 聚合酶的掺入率十分高。 

参考文献

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E. coli Poly(A) 聚合酶 货 号 #M0276L-NEB酶试剂

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E. coli Poly(A) 聚合酶                              收藏

E. coli Poly(A) 聚合酶               货   号                  #M0276L E. coli Poly(A) 聚合酶               货   号                  #M0276L E. coli Poly(A) 聚合酶               货   号                  #M0276L

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相关产品

5´ -三磷酸腺苷(ATP)
小鼠 RNase 抑制剂

特性

 用 5´ 三磷酸化虫草素(cordycepin 5´-triphosphate)或 ATP 标记 RNA
 为 RNA 添加 Poly(A) 尾,用于克隆或亲和纯化
 提高转染至真核细胞中 RNA 的翻译效率 

概述

E. coli Poly(A) 聚合酶催化由 ATP 转化成的 AMP 添加到 RNA 3´ 端,该反应不依赖模板的存在。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带克隆自大肠杆菌的 Poly(A) 聚合酶基因。 

反应条件

1X Poly(A) 聚合酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.9 @ 25℃),250 mM NaCl,10 mM MgCl2],加入 1 mM ATP,37℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。 

随酶提供

10X Poly(A) 聚合酶反应缓冲液
10 mM ATP 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中 37℃ 条件下, 10 分钟催化 1 nmol 的 AMP 掺入 RNA 所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

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XRN-1 货 号 #M0338L-NEB酶试剂

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XRN-1                              收藏

XRN-1               货   号                  #M0338L XRN-1               货   号                  #M0338L XRN-1               货   号                  #M0338L

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#M0338L
100 units
4,259.00

#M0338S
20 units
1,069.00

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特性

 从 RNA 混合物中去除含有 5´ 单磷酸的 RNA 

概述

XRN-1 单磷酸存在时,是一种 方向的高效核糖核酸外切酶。该酶也可以作用于ssDNA 单磷酸,但效率较低。
 

来源

重组 E. coli 菌株携带有表达酵母 XRN-1 基因质粒。 

反应条件

1X NEBuffer 3 [100 mM NaCl,50 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃ ) ],37℃ 温育。
热失活:70℃ 10 分钟。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下,1 小时消化 1 μg 磷酸化酵母 RNA 所需要的酶量。 

浓度

1,000 units/ml。 

参考文献

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AMV 反转录酶 货 号 #M0277L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – cDNA 合成

AMV 反转录酶                              收藏

AMV 反转录酶             货   号                  #M0277L

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#M0277L
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2,589.00

#M0277S
200 units
649.00

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特性

 合成 cDNA
 RNA 测序
 RT-PCR 

概述

禽骨髓母细胞瘤病毒(AMV)反转录酶是一种 RNA 介导的 DNA 聚合酶。该酶能以 RNA(合成 cDNA 时)或单链 DNA 为模板从引物开始合成互补的 DNA 链。 

来源

禽骨髓母细胞瘤病毒(AMV)。 

反应条件

1X AMV 反转录酶反应缓冲液
[50 mM Tris-acetate (pH 8.3 @ 25℃),75 mM KOAc,8 mM Mg(OAc)2,10 mM DTT],加入 dNTPs(不随酶提供),37-42℃ 温育。 

 

质保声明

无核酸内、外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指以 poly(rA) 为模板,oligo(dT) 为引物,37℃ 条件下,10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入酸不溶性沉淀物中所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

10,000 units/ml。 

贮存注意

解冻后,请立即贮存于-20℃。反复冻融会导致酶失活。长时间贮存可分装后置于 -70℃。 

参考文献

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RNase HII 货 号 #M0288L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

RNase HII                              收藏

RNase HII               货   号                  #M0288L RNase HII               货   号                  #M0288L RNase HII               货   号                  #M0288L

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特性

 对掺入有 rNTP 的聚合酶产物进行切刻
 与 T7 核酸内切酶 I 联合使用时,在掺入有 rNTP 的区域位点处产生双链断裂
 降解冈崎片段或其它 RNA-DNA 杂交链中的 RNA 部分

 

概述

核糖核酸酶 HII(RNase HII)为核糖核酸内切酶,适用于在双链 DNA 内部切刻核糖核酸的 5´ 末端,产生 5´ 磷酸和 3´ 羟基末端。RNase HII 还可以在冈崎片段的 RNA 部分进行多处切刻切割。 

来源

重组 E. coli 菌株,该菌株携带来自 E. coli Factor Xa 蛋白酶将 RNase HII 从融合蛋白中切割分离,然后再进行纯化去除 MBP Factor Xa 蛋白酶。从 MBP 中切割下来的 RNase HII 在其 N 端多出四个氨基酸Ile-Ser-Glu-Phe)。
 

反应条件

1X ThermoPol 反应缓冲液[10 mM KCl,20 mM Tris-HCl,10 mM (NH4)2SO4,2 mM MgSO4,0.1% Triton X-100 (pH 8.8 @ 25℃) ],37℃ 温育。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 1X ThermoPol 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟产生与切刻切割 100 pmol 合成的双链 RNA 底物产生相同的荧光信号所需的酶量。该合成的双链底物在荧光/淬火基团对的淬火基团附近含有单个核糖核苷。单位活性检测条件请联系我们。www.nebchina.com 或 www.neb.com 。 

浓度

5,000 units/ml。 

注意事项

与 0.1% SDS 一起温育足以失活 RNase HII。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。