Hoechst 33258 23491-45-4;昆明供应Hoechst 33258 23491-4

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上海金畔生物科技有限公司供应Hoechst 33258染色液 ;现货供应Hoechst 33258染色液量大优惠,咨询         2743691513

Hoechst 33258,也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式为C25H24N6O·3HCl,分子量为533.88,CAS Number 23491-45-4。
    Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。
    Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
    Hoechst 33258的zui大激发波长为346nm,zui大发射波长为460nm;Hoechst 33258和双链DNA结合后,zui大激发波长为352nm,zui大发射波长为461nm。
  试剂盒组成
 规格
 保存条件
 
Hoechst 33258浓缩液(50X)1ml -20℃避光

Hoechst 33258稀释液 50ml 2-8℃  
 此染色液做成浓缩液和稀释液主要是为了使用方便,因为浓缩液才1ml,解冻起来很快,实际也可以一次将浓缩液都加入稀释液中,混匀使用。但如果一次使用量比较少,使用次数比较多,是适当分装一下,免得多次冻融。

使用说明:
Hoechst 33258染色液染色液的配制:将Hoechst 33258浓缩液取出解冻,轻轻混匀,短时间离心,根据使用量,按照1ml33258稀释液加入20ul33258浓缩液的比例配制,即成Hoechst 33258染色液。此配好的染色液深度为10ug/ml,如果感觉染色颜色比较深,可适当的稀释(用稀释液)。此配好的染色液未用完可存放于-20℃避光。
1. 对于固定的细胞或组织:
   a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
   b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
   c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
   d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或组织:
   a. 加入适当量Hoechst 33258染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
   b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测