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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶
NudC 焦磷酸酶 收藏
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#M0607S
250 pmol
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特性
·对含 ADP 的、非经典启动核苷酸,如 NAD+ 和 NADH 进行脱帽,生成可连接的 5′ 末端为单磷酸的基团
·水解 NADH 生成 AMP 和还原型烟酰胺单磷酸核苷(NMNH);水解 NAD+ 产生 AMP和烟酰胺单磷酸核苷(NMN+)
·水解二磷酸二核苷酸和含有 ADP 基团的代谢辅助因子,如 AppA、FAD、辅酶 A 等
·当 NAD+ 是 RNA 的 5’ 启动核苷酸时,可用于 NAD+ 脱帽或去除 NAD
·适用于基于连接方法的研究,如 5’ RACE 和 RNA 测序,以检测和鉴定含有非经典启动核苷酸的RNA
该酶是一种创新酶(EFI,Enzyme for Innovation)。EFI 是由 NEB 发起的一个项目,旨在为科学界提供独特的酶,以期发现新应用。这类酶既有趣又特别。
概述
NudC 是 NUDIX 焦磷酸酶家族中的一员,可高效水解带 NAD+ 帽 和 NADH 帽的 RNA,生成连接可用的带 5′ 单磷酸末端的 RNA(NAD+ 脱帽或去除 NAD)(1)。研究表明:nudC 基因的缺失增加了大肠杆菌中 NAD+ 帽化 RNA 的比例(2)。
该酶还能以不同的效率水解含 ADP 基团的小分子,如 NADH、NAD+、AppA、ADP-核糖、ADP-葡萄糖和代谢辅助因子,如 FAD、辅酶 A 和乙酰辅酶 A(3 和未发表结果)。由于其对各种二核苷酸和代谢辅因子的活性,该酶有望通过对帽的焦磷酸化水解作用和核苷酸产物的分析,来识别带有非经典帽结构的 RNA,或使用基于 5′ 连接的方法(如 RNA 测序或 5′ RACE(4))来识别带有 5′ 单磷酸末端的 RNA。
随酶提供的试剂
NEBuffer™ 3.1
100 mM DTT
浓度
10 µM
单位定义
在 1X NEBuffer 3.1 和 5 mM DTT 的反应条件中,加入 1 µM NudC,37℃ 温育 30 分钟,能将 200 µM 或更多 NAD+ 水解成 NMN+ 和 AMP。
反应条件
1X NEBuffer™ 3.1,补加 5 mM DTT,37℃ 温育。
热失活
65℃ 加热 10 分钟。
储存温度
-20℃
质保声明
NudC 焦磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。
参考文献
1. Frick D.N. and Bessman M.J. (1995). J. Biol. Chem. 270, 1529-1534.
2. Cahová, H. et al. (2015). Nature. 519, 374-377.
3. Höfer K. et al. (2016). Nat Chem Biol. 12, 730-734.
4. Vvedenskaya I.O., et al (2018). Mol Cell. 70, 553-564.e9.