NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒货号 #E7770L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – 二代测序 RNA 文库制备试剂

NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒收藏

货号

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#E7770L

96次反应

36,299.00

无

#E7770S

24次反应

10,679.00

无

有

无

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概述

在您的 RNA 测序实验中，是否对灵敏度和特异性有更高的要求？您的测序反应中是否有起始 RNA样本量非常低的情况？为了应对这些挑战，我们的二代测序 RNA 文库制备试剂盒在流程的每一步上都进行了配方的优化，使文库产量得到成倍的增长、起始样本量要求更低、PCR 循环数更少。这些试剂盒工作流程经过改进，更加适合于自动化操作。既有定向（链特异性，使用“dUTP 方法”）文库制备，又有非定向文库制备，还可提供 SPRISelect 磁珠进行片段筛选和纯化。

NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒货号 #E7770L

NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠货号 #E7775L-NEB酶试剂

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NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠收藏

货号

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苏州库存

#E7775L

96次反应

40,199.00

无

#E7775S

24次反应

11,819.00

有

无

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概述

NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒 - 含纯化磁珠货号 #E7775L

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）(停产有替代) 货号 #M0290L-NEB酶试剂

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小牛肠碱性磷酸酶（CIP）(停产有替代) 收藏

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#M0290L

5,000 units

2,999.00

无

#M0290S

1,000 units

749.00

无

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停产通知

请注意：该产品已停产，库存售完为止，替代产品为M0525

特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化，防止载体自连

 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐

 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。CIP 在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，对线性载体去磷酸化，防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。

来源

小牛肠粘膜。

反应条件

1X 反应缓冲液
[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)₂, 100 μg/ml BSA (pH 7.9 @ 25℃)]，37℃ 温育。

质保声明

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

单位定义

1 单位指在 1 ml 反应体系中，37℃ 条件下，1 分钟催化 1 μmol 的对硝基苯磷酸盐（PNPP）水解成对硝基苯酚所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

10,000 units/ml。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。

T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）货号 #M0201L-NEB酶试剂

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T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）收藏

货号

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#M0201L

2,500 units

2,599.00

有

#M0201S

500 units

619.00

有

无

有

#M0201V

250 units

329.00

有

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特性

 DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化，以便进行连接反应

 DNA 或 RNA 的末端标记，用作探针和进行 DNA 测序

 用 T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）除去 3´ 磷酸基团

 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）（NEB #M0236）将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´磷酸化，制备pNp 底物，用于添加到 DNA 或RNA的 3´ 端

 用 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）（NEB #M0236）对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记

概述

T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（NEB #M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。

来源

重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶基因。

反应条件

1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液

[70 mM Tris-HCl（pH 7.6 @ 25℃），10 mM MgCl₂，5 mM DTT]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。

注意事项

达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。

放射性标记反应：50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。

CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。

DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请联系我们。

要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（w/v）的 PEG-8,000。

T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。

一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。

质保声明

T4 多聚核苷酸激酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

单位定义

1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [³²P] 掺入所需要的酶量（1）。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

10,000 units/ml。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。

T4 多聚核苷酸激酶反应

在 50 μl T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液体系中，37℃温育 30 分钟，γ-磷酸基团从 ATP 转移至 d(T)₈的 5´ 羟基末端 [ATP 与 d(T)8 比例是 1:1，量为 50 pmol]，结果显示 20 单位酶量可使超过 90% 的磷酸基团转移。

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）货号 #M0204L-NEB酶试剂

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T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）收藏

货号

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#M0204L

5,000 units

2,939.00

无

有

无

有

#M0204S

1,000 units

729.00

有

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特性

 连接单链 RNA 和 DNA

 用 5´ -[³²P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记

 RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接

 合成单链寡脱氧核苷酸
 蛋白质中掺入非天然氨基酸

概述

催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。

来源

携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。

使用注意事项

pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。

随酶提供试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（NEB #M0204中包含）或 100 mM

ATP（NEB #M0437中包含）

50% PEG 8000

质保声明

无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[³²P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

10,000 或 30,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

热稳定无机焦磷酸酶货号 #M0296L-NEB酶试剂

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热稳定无机焦磷酸酶收藏

货号

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#M0296L

1,250 units

3,249.00

有

无

#M0296S

250 units

809.00

有

无

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特性

 增强 DNA 复制

概述

无机焦磷酸酶（PPase）催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。
P₂0₇^–4 + H₂0 → 2HP0₄^–2

来源

重组 E. coli 菌株，携带从极度耐热的 Thermococus litoralis 中克隆的无机焦磷酸酶基因。

单位定义

1 单位指标准反应条件下 [0.5 ml 反应体系，50 mM Tricine（pH 8.5），1 mM MgCl₂ 和 0.32 mM PPi，75℃ 反应 10 分钟]，每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐的酶量。

浓度

2,000 units/ml。

SP6 RNA 聚合酶货号 #M0207S-NEB酶试剂

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SP6 RNA 聚合酶收藏

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#M0207S

2,000 units

779.00

有

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特性

 制备放射标记的 RNA 探针

 合成用于体外翻译的 RNA

 合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成 RNA 反义链，调控基因表达

概述

T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体，可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中，以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性，可进行准确剪切。实验证实，用靶标 DNA 反向转录所产生的反义 RNA 能特异性阻断体内 mRNA 的翻译。由于RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定，因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株，该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。 T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株，该菌株携带含可诱导的 lac UV5 启动子及其控制的 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株，该菌株携带可表达T3 基因载体。

反应条件

1X RNAPol 反应缓冲液 [40 mM Tris-HCl（pH 7.9），6 mM MgCl₂， 2 mM 亚精胺，1 mM DTT］。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP（不随酶提供）和带有启动子的模板 DNA，在 37 ℃ 温育。

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下， 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

T3 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；T7 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶：20,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

RNase H 货号 #M0297L-NEB酶试剂

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RNase H 收藏

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#M0297L

1,250 units

3,159.00

有

#M0297S

250 units

779.00

有

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特性

 重组酶

 除去杂交到 poly(dT) 上的 mRNA poly(A)
 在 cDNA 第二链合成时除去 mRNA

概述

核糖核酸酶 H（RNase H）是一种核糖核酸内切酶，它能够特异性地水解杂交到 DNA 链上的 RNA 磷酸二酯键。该酶不能消化单链或双链DNA。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从 E. coli 中克隆的 RNase H（rnh）基因。

反应条件

1X RNase H 反应缓冲液 [75 mM KCl，50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃)，3 mM MgCl₂ 和 10 mM DTT]，37℃ 温育。热失活：65℃ 20 分钟。

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染。

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中， 37℃ 条件下， 20 分钟从 20 pmol荧光标记的 50 bp RNA-DNA杂交链中水解生成 1 nmol 核苷酸所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

5,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶）货号 #M0239L-NEB酶试剂

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T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶）收藏

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#M0239L

750 units

3,549.00

无

有

无

有

#M0239S

150 units

889.00

无

有

无

有

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特性

 连接粘性末端接头

 连接双链 RNA 中切刻的最佳选择
 可用于 DNA/RNA 杂交链中，RNA 3´ 羟基与 DNA 5´ 磷酸基的连接

概述

T4 RNA连接酶 2，也被称为 T4 Rnl2（gp24.1），同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4 RNA 连接酶 1（NEB #M0204）不同的是， T4 RNA 连接酶 2 对双链 RNA 切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶也可用于连接双链结构中 RNA 3´ 羟基和 DNA 5´ 磷酸基的切刻。

来源

纯化自携带 T4 RNA 连接酶 2 基因的重组 E. coli 菌株。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶 2 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，2mM MgCl₂，1 mM DTT，400 μM ATP]，37℃ 温育。

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶污染

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中， 37℃ 条件下， 30 分钟完全连接 0.4 μg 的 23-mer 和 17-mer RNA等摩尔混合物所需的酶量。单位活性检测的检测条件请登录 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

10,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

DNase I（无 RNase）货号 #M0303L-NEB酶试剂

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DNase I（无 RNase）收藏

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#M0303L

5,000 units

3,159.00

有

无

#M0303S

1,000 units

779.00

有

无

有

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特性

·转录反应后 DNA 模板的降解

·除去 RNA 样品中的基因组 DNA 污染

·DNase I 印迹分析

·切刻平移

概述

DNase I（无 RNase）是一种非特异性核酸内切酶，切割 DNA 产生具有 3´ 羟基和 5´ 磷酸末端的二核苷酸、三核苷酸和寡核苷酸产物。DNase I 可以作用于单链 DNA、双链 DNA、染色质和 RNA:DNA 杂交链。

来源

重组 E. coli 菌株，含有牛胰腺 DNase I 的 MBP 融合克隆。

反应条件

1X DNase I 反应缓冲液

[10 mM Tris-HCl (pH 7.6 @ 25℃) ，2.5 mM MgCl₂，0.5 mM CaCl₂]，37℃ 温育。
热失活：75℃ 10 分钟。

质保声明

无 RNase 污染。

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，10 分钟完全分解 1 μg pBR322 DNA 所需要的酶量。
完全降解是指绝大多数的 DNA 片段降解成为四核苷酸或更短的核苷酸。

浓度

2,000 units/ml。

注意事项

为避免酶失活过程中 RNA 被降解，应添加终浓度为 5 mM 的 EDTA。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

T4 RNA 连接酶 2，截短型货号 #M0242L-NEB酶试剂

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T4 RNA 连接酶 2，截短型收藏

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#M0242L

10,000 units

3,219.00

有

无

#M0242S

2,000 units

799.00

有

无

有

无

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特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端

 将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异 cDNA 文库构建

概述

T4 RNA 连接酶 2，截短型（T4 Rnl2 截短型）可特异性地将 5´ 端预腺苷化的 DNA 或 RNA连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。 T4 Rnl2 截短型的表达来自E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同， T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA的 3´ 端。该酶即 Rnl2（1-249），可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。

来源

携带 T4 RNA 连接酶 2，截短型基因的重组 E. coli 菌株。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT]，25℃ 温育。热失活：65℃ 20 分钟。

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中， 25℃ 条件下， 1 小时将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端[miRNA 通用性克隆接头（NEB#S1315） ]末端所需的酶量。单位活性检测条件见www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

200,000 units/ml。

参考文献

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人胎盘 RNase 抑制剂货号 #M0307L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNase 抑制

人胎盘 RNase 抑制剂收藏

货号

规格

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#M0307L

10,000 units

3,539.00

有

无

有

#M0307S

2,000 units

879.00

有

无

有

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特性

 抑制常见的真核 RNase

 与 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶兼容

 在较宽的 pH 范围内均有活性（pH 5-8）

 适用于 cDNA 合成反应
 体外转录/翻译

概述

RNase 抑制剂是重组人胎盘蛋白质，可以特异性地抑制 RNase A、B、C 活性，但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNase H 和来源于曲霉属的 RNase 无效。此外，与下列聚合酶共同使用时，未观察到其抑制聚合酶的活性，如：Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶和噬菌体 RNA 聚合酶（SP6、T7 或 T3）。

RNase 抑制剂的分子量为 50 kDa，通过非共价键以 1:1 的比例与 RNase 结合而抑制其酶活，结合常数大于 10¹⁴。

来源

重组 E. coli 菌株，含有来源于人胎盘的 RNase 抑制剂基因。

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。

单位定义

1 单位指抑制 5 ng RNase A 50% 活性所需的 RNase 抑制剂的用量。活性测定是通过抑制 RNase A 对胞嘧啶 2´，3´ -环单磷酸盐的水解来进行的。

浓度

40,000 units/ml。

参考文献

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RNase If 货号 #M0243L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

RNase If 收藏

货号

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价格(元)

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上海库存

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#M0243L

25,000 units

2,979.00

无

#M0243S

5,000 units

749.00

有

无

有

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特性

 重组酶

 去除 DNA 和蛋白质制备过程中的 RNA

 降解单链 RNA 生成单、二或三核苷酸
 用于核糖核酸酶保护试验

概述

核糖核酸酶 I_f（RNase I_f）是一种 RNA 核酸内切酶，能够切割所有 RNA 二核苷酸键，产生 5´ 羟基和 2´ , 3´ 环状单核苷酸。该酶对单链 RNA 的活性比双链 RNA 高。重组 RNase I_f是 RNase I（来源于E. coli）与麦芽糖结合蛋白的融合蛋白，与野生型RNase I 具有相同活性。

来源

重组 E. coli 菌株，携带来自 E. coli 的 RNase I 基因（rna）及编码麦芽糖结合蛋白（MBP）的基因。

反应条件

1X NEBuffer 3

[100 mM NaCl，50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl₂，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，37℃ 温育。
热失活：70℃ 20 分钟。

使用注意事项

RNase I_f不能降解 DNA。降解单链 RNA 的能力比降解双链 RNA 的能力强。

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染

单位定义

1 单位指 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，15 分钟完全降解 1 pmol 合成的 33-mer ssRNA 所需的酶量。反应在 1X NEBuffer 3 中进行，20% 丙烯酰胺凝胶电泳（40:1 Bis），SYBR^® Gold 染色后观察结果。单位活性检测条件请联系我们。 www.neb-china.com 或 www.neb.com 。

浓度

50,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

p19 siRNA 结合蛋白（停产）货号 #M0310S-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

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#M0310S

1,000 units

819.00

无

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停产通知

产品于 2020年 1 月 2 日停产.

特性

 与 siRNA 结合效率高
 可通过几丁质磁珠亲和纯化 siRNA

概述

p19 siRNA 结合蛋白分子量为 19 kDa，来自于植物香石竹意大利环斑病毒（CIRV）。该蛋白与 siRNA 具有纳摩尔级的亲和力，和 3´ 末端有 2 个核苷酸突出、5´ 末端是磷酸基的 21 nt siRNA 结合力高于其它片段。该蛋白是以二聚体的形式与 siRNA 结合，结合力取决 RNA 片段大小，而与 RNA 序列无关。如果 siRNA 的长度增加 4 个碱基，则与蛋白的亲和力会下降约 100 倍。当 p19 siRNA 结合蛋白在植物体内表达时，能抑制 RNAi 作用。

来源

p19 siRNA 结合蛋白以融合蛋白的形式在大肠杆菌中克隆和表达。其 N 末端带有 MBP（麦芽糖结合蛋白），C 末端带有 CBD（几丁质结合蛋白）。

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。产品经纯化，琼脂糖凝胶电泳后 EB 染色检测，无 DNA 或 RNA 污染。

单位定义

1 单位指 25℃ 条件下，1 小时内结合 10 ng 的 siRNA 所需要的蛋白量。单位活性检测条件请联系我们。

分子量

67 kDa。

浓度

10,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

ShortCut® RNase III 货号 #M0245L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

ShortCut^® RNase III 收藏

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#M0245L

1,000 units

5,829.00

有

无

#M0245S

200 units

1,449.00

无

有

无

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特性

 为 RNA 干扰研究提供 siRNA

 基因沉默

 靶标确认
 去除 dsRNAs

概述

ShortCut RNase III 能将较长双链 RNA 切割成一组大小不同的由 18-25 bp 组成的小片段干扰RNA（siRNA），更适合用于哺乳动物细胞的 RNA干扰实验。用 1.5 个单位（1 μl）的 ShortCut RNase III 能够将 1 μg 的 dsRNA 完全切割成 siRNA。

来源

重组 E. coli 菌株，克隆表达融合有麦芽糖结合蛋白（MBP）的 E. coli RNase III 基因（rnc）。

反应条件

1X ShortCut RNase III 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl， 50 mM NaCl， 1 mM DTT（pH 7.5 @ 25℃）]。补加 20 mM MnCl₂（随产品提供），37℃ 温育。

质保声明

无核酸内切酶和核酸外切酶污染。

单位定义

1 单位指 50 μl 的反应体系中，37℃ 条件下，20 分钟将 1 μg dsRNA 切割成 siRNA 所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

2,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

ShortCut RNase III 的优势

 制备适合任何基因靶点的有效 siRNA

 异源 siRNA 可以确保沉默靶基因

 从 DNA 模板到转染只需要一天
 避免了使用合成 siRNA 需反复摸索实验条件的问题

ShortCut® RNase III 货号 #M0245L

图：使用 ShortCut RNase III 制备的 siRNA：A) 不同单位数量的 ShortCut RNase III 与 2 μg 500 bp 的 dsRNA 孵育 20 分钟。B) 用 ShortCut RNase III 消化 dsRNA 片段（1 kb 和 175 bp）。消化产物通过 20% TBE 聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。

小鼠 RNase 抑制剂货号 #M0314L-NEB酶试剂

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小鼠 RNase 抑制剂收藏

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#M0314L

15,000 units

3,209.00

有

无

有

#M0314S

3,000 units

799.00

有

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特性

 抑制常见真核 RNase

 与 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶兼容

 适用于 cDNA 合成和 RT-PCR

 体外转录 / 翻译
 酶催化的 RNA 标记反应

相比起人源和猪源 RNase 抑制剂，小鼠 RNase 抑制剂在抗氧化能力上有显著提升。

概述

小鼠 RNase 抑制剂是鼠源重组蛋白，分子量为 50 kDa，可以特异性抑制 RNase A、B 和 C 活性。它与 RNase 以 1:1 的比例高效非共价结合从而抑制其活性。但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNase H 或来源于曲霉属的 RNase 无效。此外，与下列聚合酶共同使用时，该抑制剂不会抑制聚合酶的活性，如：Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶或噬菌体 RNA 聚合酶（SP6、T7 或 T3）。

重组小鼠 RNase 抑制剂不含有半胱氨酸。已证实，人源中的半胱氨酸对氧化非常敏感并导致抑制剂失活。因此，小鼠 RNase 抑制剂与人/猪 RNase 抑制剂相比，抗氧化能力显著提高，且在 DTT 浓度较低（＜1 mM）时更稳定。这使其在不适宜高浓度 DTT 的反应中更具优势，如实时 RT-PCR。

来源

携带有鼠源 RNase 抑制剂基因的 E. coli 菌株。

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。

单位定义

1 单位指抑制 5 ng RNase A 50% 活性所需要的小鼠 RNase 抑制剂的量。活性测定是通过抑制 RNase A 对胞嘧啶 2´，3´ -环单磷酸盐的水解来进行。

浓度

40,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶货号 #M0319L-NEB酶试剂

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5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶收藏

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#M0319L

50 次反应

3,279.00

无

有

无

#M0319S

10 次反应

819.00

有

无

有

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特性

 二代测序文库构建中连接单链 DNA 和腺苷化的 DNA 接头
 构建 small RNA 二代测序文库时，可在较高温度下连接预腺苷化的接头和 RNA

概述

5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌（Methanobacterium thermoautotrophicum），是 RNA 连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该酶连接时不需要 ATP，但需要 5´ 预腺苷化的接头才能将其连接到 RNA 或单链 DNA 的 3´ OH 末端。该酶也可催化 3´ 端被 2´ -O-甲基化的 RNA 和 5´ 预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度为 60-65℃。连接酶的点突变体不能使 RNA 或单链 DNA 的 5´ 端磷酸腺苷化，因此降低非特异性的串联和环化。

该酶能在 65℃ 反应，此温度下降低了 RNA 二级结构对连接反应的制约。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 His 标签的 5´ AppDNA/RNA 连接酶基因。

反应条件

1X NEBuffer 1 [10 mM Bis-Tris-Propane-HCl (pH 7.0 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT]，65℃ 温育。

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、核酸外切酶、 RNase 和磷酸酶污染。

浓度

20 μM。

使用注意事项

建议连接单链 DNA 和预腺苷酸化接头时，使用含镁离子的 NEBuffer 1。

参考文献

有关该产品性质及应用的相关文献请联系我们。

T7 RNA 聚合酶货号 #M0251L-NEB酶试剂

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#M0251L

25,000 units

2,989.00

有

#M0251S

5,000 units

739.00

有

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特性

 制备放射标记的 RNA 探针

 合成用于体外翻译的 RNA

 合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成 RNA 反义链，调控基因表达

概述

来源

反应条件

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下， 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

T3 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；T7 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶：20,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

M-MulV 反转录酶货号 #M0253L-NEB酶试剂

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广州库存

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#M0253L

50,000 units

2,709.00

有

#M0253S

10,000 units

679.00

有

无

有

无

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特性

 合成 cDNA

 RNA 测序
 RT-PCR

概述

莫洛尼氏鼠白血病病毒（M-MuLV）反转录酶是一种 RNA 介导的 DNA 聚合酶。该酶能以 RNA（合成 cDNA 时）或单链 DNA 做模板由引物起始合成一条互补的 DNA。M-MuLV 反转录酶无 3´→5´ 核酸外切酶活性。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从 M-MuLV 中克隆的反转录酶基因。

反应条件

1X M-MuLV 反转录酶反应缓冲液

[50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃)，75 mM KCl，3 mM MgCl₂，10 mM DTT]，加入 dNTPs（不随酶提供），37-42℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。

质保声明

无核酸内切酶、外切酶和 RNase 污染。

单位定义

1 单位指以 poly(rA) 为模板、oligo(dT) 为引物，在 37℃ 条件下，10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

200,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

5´ 去腺苷化酶货号 #M0331S-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

5´ 去腺苷化酶收藏

货号

规格

价格(元)

北京库存

上海库存

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#M0331S

2,500 units

809.00

无

有

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特性

 DNA 和 RNA 5´ 末端的去腺苷化

 Aprataxin 依赖的 DNA 修复检测

 分析双核苷四磷酸

概述

酵母 5´ 去腺苷化酶是组氨酸三聚体（HIT）家族中的一员，属于组氨酸三聚体核苷结合蛋白（Hint）的分支。它是 aprataxin 在酵母中的直系同源物。人 aprataxin 的突变会导致神经系统疾病，如共济失调伴眼动失用症 I。通过从 DNA 的 5´ 末端去除 AMP（AMP-DNA 水解酶活性），人源 5´ 去腺苷化酶可以去除未连接中间体，它还可以通过去除 3´ –磷酸和 3´ –磷酸乙醇酸修复 DNA 的 3´ 末端损伤。人 aprataxin 作用于小分子，如核苷多磷酸双腺苷四磷酸（AppppA）和 lysyl-AMP。

5´ 去腺苷化酶是由酿酒酵母（S. cerevisiae）的 HNT3基因编码。 NEB 研究显示该蛋白能从 DNA 和 RNA的 5´ 末端去腺苷化，余下 5´ 末端磷酸。它也能切割 AppppA 生成 ATP 和 AMP。未检测出其对 lysylAMP 有作用。

来源

从携带编码酿酒酵母 5´ 去腺苷化酶质粒的 E. coli 菌株中纯化而得。

反应条件

20 μl 反应体系：1X NEBuffer 2 [50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl₂，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，5–50 pmol 腺苷化 DNA (AMPDNA)，30℃ 温育。

热失活：70℃ 20 分钟。

单位定义

1 单位指 30℃ 条件下，10 分钟从 5´ 腺苷化 DNA 寡聚体中去除 10 pmol AMP 所需的酶量。

浓度

50,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

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特性

概述

来源

反应条件

质保声明

单位定义

浓度

参考文献

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特性

概述

来源

反应条件

注意事项

质保声明

单位定义

浓度

参考文献

T4 多聚核苷酸激酶反应

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特性

概述

来源

反应条件

使用注意事项

随酶提供试剂

质保声明

单位定义

浓度

参考文献

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特性

概述

来源

单位定义

浓度

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特性

概述

来源

反应条件

质保声明

单位定义

浓度

参考文献

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特性

概述

来源

反应条件

质保声明

单位定义

浓度

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反应条件

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