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糖苷内切酶 Hf 货 号 #P0703L-NEB酶试剂

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糖苷内切酶 Hf 货 号 #P0703L

 

Endo H 和 Endo Hf 仅切割高甘露糖型结构（high mannose structures）（n = 2-150，x =
(Man)1-2，y = H）和杂合型结构（hybrid structures）（n = 2，x 和/或 y = AcNeu-Gal-GlcNAc）。

特性

 去除糖蛋白中的 N-连接高甘露糖

概述

糖苷内切酶 Hf 是糖苷内切酶 H 和麦芽糖结合蛋白组成的融合重组蛋白，具有与糖苷内切酶 H 相同的活性。

来源

糖苷内切酶 Hf 克隆自褶皱链霉菌（Streptomyces plicatus）并在 E. coli 中高度表达。

反应条件

将糖蛋白在 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40 mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在
1X GlycoBuffer 3 反应缓冲液中于 37℃ 温育。热失活：65℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 3 反应缓冲液

分子量

Endo Hf：70,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下，1 小时从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（10 NEB units = 1 IUBmilliunit）。

浓度

Endo Hf 浓度：1,000,000 units/ml。

注意事项

酶活性不受 SDS 影响。

要使天然糖蛋白去糖基化，可能需要增加酶量并延长温育时间。

参考文献

AgeI-HF（星选酶） 货 号 #R3552L-NEB酶试剂

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 50%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：65℃ 20 分钟。

浓度

20,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。

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（高浓度5X）10,000 units
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：65℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG甲基化敏感。

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（高浓度5X）10,000 units
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：65℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG甲基化敏感。

HindIII-HF（星选酶） 货 号 #R3104L-NEB酶试剂

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（高浓度5X）10,000 units
609.00
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

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（高浓度5X）10,000 units
609.00
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5,000 units
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

ScaI-HF（星选酶） 货 号 #R3122L-NEB酶试剂

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（高浓度5X）5,000 units
3,139.00
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#R3122V
500 units
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

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（高浓度5X）5,000 units
3,139.00
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#R3122S
1,000 units
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389.00
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

NsiI-HF（星选酶） 货 号 #R3127L-NEB酶试剂

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: <10%
NEBuffer 2.1: 20%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

NsiI-HF（星选酶） 货 号 #R3127L-NEB酶试剂

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3,139.00
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769.00
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NEBuffer 1.1: <10%
NEBuffer 2.1: 20%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L-NEB酶试剂

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（高浓度5X）5,000 units
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1,000 units
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 25%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。

注意事项

该酶切割产生一个 5´ CTAG 突出端，可以与 Avrll、Spel 或 Xbal 切割产生的片段有效地连接。
当盐浓度 ＞ 100 mM 时，酶活性被抑制。

NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L-NEB酶试剂

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NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L NheI-HF（星选酶） 货 号 #R3131L

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#R3131L
5,000 units
3,139.00
有
有
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#R3131M
（高浓度5X）5,000 units
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有
无
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#R3131S
1,000 units
759.00
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 25%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。

注意事项

该酶切割产生一个 5´ CTAG 突出端，可以与 Avrll、Spel 或 Xbal 切割产生的片段有效地连接。
当盐浓度 ＞ 100 mM 时，酶活性被抑制。

SspI-HF（星选酶） 货 号 #R3132L-NEB酶试剂

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#R3132L
5,000 units
3,169.00
有
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无
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（高浓度5X）5,000 units
3,169.00
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#R3132S
1,000 units
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有
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#R3132V
500 units
419.00
有
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  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

SspI-HF（星选酶） 货 号 #R3132L-NEB酶试剂

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5,000 units
3,169.00
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#R3132M
（高浓度5X）5,000 units
3,169.00
有
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#R3132S
1,000 units
789.00
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有
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#R3132V
500 units
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  • isoschizomers     |
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

SpeI-HF（星选酶） 货 号 #R3133L-NEB酶试剂

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#R3133L
2,500 units
3,139.00
有
有
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（高浓度5X）2,500 units
3,139.00
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500 units
759.00
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250 units
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SpeI-HF（星选酶） 货 号 #R3133L

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 50%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

该酶切割产生 5´ CTAG 的突出端，能有效地和 Avrll、Nhel 或 Xbal 切割产生的 DNA 片段连接。

SpeI-HF（星选酶） 货 号 #R3133L-NEB酶试剂

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#R3133L
2,500 units
3,139.00
有
有
有
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#R3133M
（高浓度5X）2,500 units
3,139.00
无
有
有
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#R3133S
500 units
759.00
有
有
有
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#R3133V
250 units
399.00
有
有
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SpeI-HF（星选酶） 货 号 #R3133L

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 50%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

该酶切割产生 5´ CTAG 的突出端，能有效地和 Avrll、Nhel 或 Xbal 切割产生的 DNA 片段连接。

BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L-NEB酶试剂

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BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L

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#R3136L
50,000 units
2,529.00
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（高浓度5X）50,000 units
2,529.00
有
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无
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10,000 units
609.00
有
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#R3136T
（高浓度5X）10,000 units
609.00
有
有
有
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5,000 units
319.00
有
有
有
有
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BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 50%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

酶切 pUC19 DNA 或有相似旁侧序列的质粒需要 5 个单位酶。

BamHl-HF 加强了切割位点的特异性，酶和 DNA 的结合能力增强，在凝胶电泳的过程中仍能保持结合。可在电泳前加入浓度为 0.1% 的 SDS 或纯化 DNA 可以解除结合。

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#R3136L
50,000 units
2,529.00
有
有
有
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（高浓度5X）50,000 units
2,529.00
有
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无
无
有

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10,000 units
609.00
有
有
有
有
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#R3136T
（高浓度5X）10,000 units
609.00
有
有
有
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#R3136V
5,000 units
319.00
有
有
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BamHI-HF（星选酶） 货 号 #R3136L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 50%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

酶切 pUC19 DNA 或有相似旁侧序列的质粒需要 5 个单位酶。

BamHl-HF 加强了切割位点的特异性，酶和 DNA 的结合能力增强，在凝胶电泳的过程中仍能保持结合。可在电泳前加入浓度为 0.1% 的 SDS 或纯化 DNA 可以解除结合。

SalI-HF（星选酶） 货 号 #R3138L-NEB酶试剂

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货 号
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#R3138L
10,000 units
2,859.00
有
有
有
有
有

#R3138M
（高浓度5X）10,000 units
2,859.00
有
有
有
无
无

#R3138S
2,000 units
689.00
有
有
有
有
有

#R3138T
（高浓度5X）2,000 units
689.00
有
有
有
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无

#R3138V
1,000 units
359.00
有
有
有
有
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SalI-HF（星选酶） 货 号 #R3138L

  • isoschizomers     |
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特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：65℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。

SalI-HF（星选酶） 货 号 #R3138L-NEB酶试剂

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货 号
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#R3138L
10,000 units
2,859.00
有
有
有
有
有

#R3138M
（高浓度5X）10,000 units
2,859.00
有
有
有
无
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#R3138S
2,000 units
689.00
有
有
有
有
有

#R3138T
（高浓度5X）2,000 units
689.00
有
有
有
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无

#R3138V
1,000 units
359.00
有
有
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有
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SalI-HF（星选酶） 货 号 #R3138L

  • isoschizomers     |
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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：65℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。