Qiagen 12145纯化转染级质粒试剂盒100T

上海金畔生物科技有限公司供应Qiagen 12145纯化转染级质粒试剂盒100T量大优惠，咨询：

Qiagen 12145纯化转染级质粒试剂盒100T

Qiagen 12145 纯化转染级质粒试剂盒高通量纯化血液或无细胞体液中的总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA，病毒DNA，zui高可达60 μg总DNA

快速纯化高品质，即用型DNA
无有机提取或乙醇沉淀
持续的高产量
*去除污染物和下游反应抑制物

Qiagen 12145 纯化转染级质粒试剂盒用于处理多至200 μl 的人全血， midi kits 处理量为0.3-2 ml，maxi kits为3-10 ml。QIAamp Mini、Midi 和Maxi离心管可在离心机或真空底座上制备样品。QIAamp DNA Blood Mini Kit 可在QIAcube上全自动进行DNA纯化。

Qiagen 12145 纯化转染级质粒试剂盒
Qiagen 28306 QIAquick Nucleotide Removal Kit （250）从酶促反应物中回收纯化
Qiagen 28304 QIAquick Nucleotide Removal Kit （50）从酶促反应物中回收纯化
Qiagen 28704 QIAquick Gel Extraction Kit （50）胶回收试剂盒
Qiagen 28706 QIAquick Gel Extraction Kit （250）胶回收试剂盒
Qiagen 30210 Ni-NTA Agarose （25 ml） 6His蛋白纯化柱料
Qiagen 51104 QIAamp DNA Blood Mini Kit （50）血液DNA提取试剂盒
Qiagen 51106 QIAamp DNA Blood Mini Kit （250）血液DNA提取试剂盒
Qiagen 51183 QIAamp DNA Blood Midi Kit （20）血液DNA提取试剂盒
Qiagen 51185 QIAamp DNA Blood Midi Kit （100）血液中提试剂盒
Qiagen 51304 QIAamp DNA Mini Kit （50）人类组织和细胞DNA提取试剂盒
Qiagen 51306 QIAamp DNA Mini Kit （250）人类组织和细胞DNA提取试剂盒
Qiagen 52304 QIAamp RNA Blood Mini Kit （50）新鲜全血样本胞内RNA的分离纯化
Qiagen 52904 QIAamp Viral RNA Mini Kit （50） RNA病毒提取试剂盒
Qiagen 52906 QIAamp Viral RNA Mini Kit （250） RNA病毒提取试剂盒
Qiagen 56404 QIAamp DNA FFPE Tissue Kit （50）从石蜡包埋组织中纯化DNA试剂盒
Qiagen 59104 EpiTect Bisulfite Kit （48）甲基化转化试剂盒
Qiagen 69104 DNeasy Plant Mini Kit （50）从植物细胞和组织或真菌样本中纯化总DNA
Qiagen 69504 DNeasy Blood & Tissue Kit （50）血液，组织DNA提取试剂盒
Qiagen 69506 DNeasy Blood & Tissue Kit （250）血液，组织DNA提取试剂盒
Qiagen Qiagen 70022 Oligotex mRNA Mini Kit （12）从总RNA、细胞核组织中纯化及体外转录产物回收

12143 QIAGEN 纯化zui高产量可达100ug的转染级别纯度的质粒或科斯质粒DNA • 纯度相当于2倍氯化铯梯度离心 • 高重现性的产量和转染级别纯度 • 经济实惠 •使用LyseBlue，获得*的裂解和zui大的DNA产量产品描述 QIAGEN PlasmidKits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级纯质粒DNA。该试剂盒可制备多至20 μg （Mini）、100 μg （Midi）、500 μg（Maxi）、2.5 mg （Mega）或10 mg （Giga）的质粒DNA。离心法进行裂解液澄清和异丙醇沉淀。

GMO外源aacc3基因探针法qPCR试剂盒50T

GMO外源aacc3基因探针法qPCR试剂盒(不含内参)50T，NR23-NBL0922产品简介：
产品品牌：金畔生物
运输：Cold
保存：-20℃
有效期：1 Year
货期：1 Month
产品规格：50T
GMO外源aacc3基因探针法qPCR试剂盒50T

GMO外源aacc3基因探针法qPCR试剂盒(不含内参)50T，

NR23-NBL0922

GMO外源aacc3基因探针法qPCR试剂盒(不含内参)50T，NR23-NBL0922产品简介：

产品品牌：金畔生物

英文名称：GMO Exogenous aacc3 Gene Probe Realtime PCR Kit (without internal control)

运输：Cold

保存：-20℃

有效期：1 Year

货期：1 Month

产品规格：50T

GMO外源aacc3基因探针法qPCR试剂盒50T

本产品只能用于科研

aacc3是庆大霉素3-N-乙酰转移酶基因，对庆大霉素有抗性本产品是以探针法荧光定量 PCR 技术为基础开发的GMO外源aacc3基因荧光定量探针法荧光定量 RT-PCR 试剂盒，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品 RNA 模板。

2. 引物和探针经过优化，灵敏性高。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. 特异性高，引物是根据GMO外源aacc3基因高度保守区设计，不会跟其他的RNA 发生交叉反应。

5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。

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转基因功能基因Bt LAMP试剂盒50次

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GMO外源aacc3基因探针法qPCR试剂盒50T

人腺病毒通用探针法qPCR试剂盒50T

Human Adenovirus(HAdV)人腺病毒通用探针法qPCR试剂盒(不含内参）50T，NR23-82888产品简介：
产品品牌：金畔生物
运输：Cold
保存：-20℃
有效期：1 Year
货期：1 Month
产品规格：50T
人腺病毒通用探针法qPCR试剂盒50T

Human Adenovirus(HAdV)人腺病毒通用探针法qPCR试剂盒(不含内参）50T，,NR-81888

Human Adenovirus(HAdV)人腺病毒通用探针法qPCR试剂盒(不含内参）50T，NR23-82888产品简介：

产品品牌：金畔生物

英文名称：Human Adenovirus(HAdV) Probe Realtime PCR Kit (without internal control)

运输：Cold

保存：-20℃

有效期：1 Year

货期：1 Month

产品规格：50T

人腺病毒通用探针法qPCR试剂盒50T

人腺病毒属于哺乳动物腺病毒属，为无包膜的双链 DNA 病毒，病毒颗粒呈二十面体对称结构，直径 90～100nm，可划分为 A-G 共 7 个亚属，目前已发现至少 90 个基因型。由于不同人腺病毒对人体的组织嗜性不同，人腺病毒可导致多种人类疾病，因此快速准确检测人腺病毒具有重要意义。本产品就是以探针法荧光定量 PCR 技术为基础开发的专门检测人腺病毒通用型的试剂盒，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。

2. 引物和探针经过优化，灵敏性高。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. 特异性高，引物是根据人腺病毒通用 DNA 高度保守区设计，不会跟其他微生物的 DNA 发生交叉反应。

5. 既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为 5个数量级。

6. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 PCR 反应。

7. 本产品只能用于科研。

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Human Adenovirus A61（HAdV-A61）人腺病毒A61型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus B11（HAdV-B11）人腺病毒B11型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

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Human Adenovirus B50（HAdV-B20）人腺病毒B50型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus B55（HAdV-B55）人腺病毒B55型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

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Human Adenovirus B78（HAdV-D78）人腺病毒B78型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus B79（HAdV-D79）人腺病毒B79型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus B7（HAdV-B7）人腺病毒B7型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus C1（HAdV-C1）人腺病毒C1型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

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Human Adenovirus D10（HAdV-D10）人腺病毒D10型探针法荧光定量PCR试剂盒50

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Human Adenovirus D49（HAdV-D49）人腺病毒D49型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

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Human Adenovirus D58（HAdV-D58）人腺病毒D58型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D59（HAdV-D59）人腺病毒D59型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D60（HAdV-D60）人腺病毒D60型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D62（HAdV-D62）人腺病毒D62型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D63（HAdV-D63）人腺病毒D63型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D64（HAdV-D64）人腺病毒D64型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D65（HAdV-D65）人腺病毒D65型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D67（HAdV-D67）人腺病毒D67型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D69（HAdV-D69）人腺病毒D69型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D70（HAdV-D70）人腺病毒D70型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D71（HAdV-D71）人腺病毒D71型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D72（HAdV-D72）人腺病毒D72型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D73（HAdV-D73）人腺病毒D73型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D74（HAdV-D74）人腺病毒D74型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D75（HAdV-D75）人腺病毒D75型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D80（HAdV-D80）人腺病毒D80型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D81（HAdV-D81）人腺病毒D81型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D82（HAdV-D82）人腺病毒D82型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D83（HAdV-D83）人腺病毒D83型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D84（HAdV-D84）人腺病毒D84型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D85（HAdV-D85）人腺病毒D85型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D86（HAdV-D86）人腺病毒D86型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D87（HAdV-D87）人腺病毒D87型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D88（HAdV-D88）人腺病毒D88型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D8（HAdV-D8）人腺病毒D8型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D90（HAdV-D90）人腺病毒D90型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D91（HAdV-D91）人腺病毒D91型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D92（HAdV-D92）人腺病毒D92型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D93（HAdV-D93）人腺病毒D93型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D94（HAdV-D94）人腺病毒D94型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D95（HAdV-D95）人腺病毒D95型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D96（HAdV-D96）人腺病毒D96型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D97（HAdV-D97）人腺病毒D97型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D98（HAdV-D98）人腺病毒D98型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus D9（HAdV-D9）人腺病毒D9型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus E4（HAdV-E4）人腺病毒E4型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

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Human Adenovirus F40（HAdV-F40）人腺病毒F40型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus F41（HAdV-F41）人腺病毒F41型染料法荧光定量PCR试剂盒50次

Human Adenovirus F41（HAdV-F41）人腺病毒F41型探针法荧光定量PCR试剂盒50T

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Human Adenovirus Subgenera B（HAdV-B）人腺病毒B亚属探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus Subgenera C（HAdV-C）人腺病毒C亚属探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus Subgenera D（HAdV-D）人腺病毒D亚属探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus Subgenera E（HAdV-E）人腺病毒E亚属探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus Subgenera F（HAdV-F）人腺病毒F亚属探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus Subgenera G（HAdV-G）人腺病毒G亚属探针法荧光定量PCR试剂盒50T

Human Adenovirus（HAdV）人腺病毒通用探针法荧光定量PCR试剂盒50T

人腺病毒通用探针法qPCR试剂盒50T

T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）货号 #M0201L-NEB酶试剂

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）收藏

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#M0201L

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有

#M0201S

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619.00

有

无

有

#M0201V

250 units

329.00

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特性

 DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化，以便进行连接反应

 DNA 或 RNA 的末端标记，用作探针和进行 DNA 测序

 用 T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）除去 3´ 磷酸基团

 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）（NEB #M0236）将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´磷酸化，制备pNp 底物，用于添加到 DNA 或RNA的 3´ 端

 用 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）（NEB #M0236）对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记

概述

T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（NEB #M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。

来源

重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶基因。

反应条件

1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液

[70 mM Tris-HCl（pH 7.6 @ 25℃），10 mM MgCl₂，5 mM DTT]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。

注意事项

达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。

放射性标记反应：50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。

CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。

DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请联系我们。

要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（w/v）的 PEG-8,000。

T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。

一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。

质保声明

T4 多聚核苷酸激酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

单位定义

1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [³²P] 掺入所需要的酶量（1）。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

10,000 units/ml。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。

T4 多聚核苷酸激酶反应

在 50 μl T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液体系中，37℃温育 30 分钟，γ-磷酸基团从 ATP 转移至 d(T)₈的 5´ 羟基末端 [ATP 与 d(T)8 比例是 1:1，量为 50 pmol]，结果显示 20 单位酶量可使超过 90% 的磷酸基团转移。

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）货号 #M0204L-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）收藏

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价格(元)

北京库存

上海库存

广州库存

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苏州库存

#M0204L

5,000 units

2,939.00

无

有

无

有

#M0204S

1,000 units

729.00

有

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特性

 连接单链 RNA 和 DNA

 用 5´ -[³²P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记

 RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接

 合成单链寡脱氧核苷酸
 蛋白质中掺入非天然氨基酸

概述

催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。

来源

携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。

使用注意事项

pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。

随酶提供试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（NEB #M0204中包含）或 100 mM

ATP（NEB #M0437中包含）

50% PEG 8000

质保声明

无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[³²P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

10,000 或 30,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶）货号 #M0239L-NEB酶试剂

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T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶）收藏

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#M0239L

750 units

3,549.00

无

有

无

有

#M0239S

150 units

889.00

无

有

无

有

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特性

 连接粘性末端接头

 连接双链 RNA 中切刻的最佳选择
 可用于 DNA/RNA 杂交链中，RNA 3´ 羟基与 DNA 5´ 磷酸基的连接

概述

T4 RNA连接酶 2，也被称为 T4 Rnl2（gp24.1），同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4 RNA 连接酶 1（NEB #M0204）不同的是， T4 RNA 连接酶 2 对双链 RNA 切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶也可用于连接双链结构中 RNA 3´ 羟基和 DNA 5´ 磷酸基的切刻。

来源

纯化自携带 T4 RNA 连接酶 2 基因的重组 E. coli 菌株。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶 2 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，2mM MgCl₂，1 mM DTT，400 μM ATP]，37℃ 温育。

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶污染

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中， 37℃ 条件下， 30 分钟完全连接 0.4 μg 的 23-mer 和 17-mer RNA等摩尔混合物所需的酶量。单位活性检测的检测条件请登录 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

10,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

T4 RNA 连接酶 2，截短型货号 #M0242L-NEB酶试剂

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T4 RNA 连接酶 2，截短型收藏

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苏州库存

#M0242L

10,000 units

3,219.00

有

无

#M0242S

2,000 units

799.00

有

无

有

无

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特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端

 将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异 cDNA 文库构建

概述

T4 RNA 连接酶 2，截短型（T4 Rnl2 截短型）可特异性地将 5´ 端预腺苷化的 DNA 或 RNA连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。 T4 Rnl2 截短型的表达来自E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同， T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA的 3´ 端。该酶即 Rnl2（1-249），可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。

来源

携带 T4 RNA 连接酶 2，截短型基因的重组 E. coli 菌株。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT]，25℃ 温育。热失活：65℃ 20 分钟。

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中， 25℃ 条件下， 1 小时将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端[miRNA 通用性克隆接头（NEB#S1315） ]末端所需的酶量。单位活性检测条件见www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

200,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

T7 RNA 聚合酶货号 #M0251L-NEB酶试剂

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T7 RNA 聚合酶收藏

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#M0251L

25,000 units

2,989.00

有

#M0251S

5,000 units

739.00

有

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特性

 制备放射标记的 RNA 探针

 合成用于体外翻译的 RNA

 合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成 RNA 反义链，调控基因表达

概述

T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体，可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中，以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性，可进行准确剪切。实验证实，用靶标 DNA 反向转录所产生的反义 RNA 能特异性阻断体内 mRNA 的翻译。由于RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定，因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株，该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。 T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株，该菌株携带含可诱导的 lac UV5 启动子及其控制的 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株，该菌株携带可表达T3 基因载体。

反应条件

1X RNAPol 反应缓冲液 [40 mM Tris-HCl（pH 7.9），6 mM MgCl₂， 2 mM 亚精胺，1 mM DTT］。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP（不随酶提供）和带有启动子的模板 DNA，在 37 ℃ 温育。

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下， 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

T3 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；T7 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶：20,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

T4 RNA 连接酶 2，截短型 K227Q 货号 #M0351L-NEB酶试剂

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T4 RNA 连接酶 2，截短型 K227Q 收藏

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#M0351L

10,000 units

3,219.00

无

#M0351S

2,000 units

799.00

无

有

无

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特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端

 将腺苷化单链引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将腺苷化单链引物连接至 RNA 上，用于链特异性 cDNA 文库构建

概述

T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。

因为不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性，所以连接反应的背景可以降至最低。该酶已用于二代测序 Small RNA的文库构建中，优化了接头的连接过程。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 MBP 融合表达的质粒，该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前249 个氨基酸序列。 T4 Rnl2tr K227Q 是将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。 T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和位置进行了突变，精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中， 25℃ 条件下， 1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头（NEB#S1315）] 所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

200,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ 货号 #M0373L-NEB酶试剂

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T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ 收藏

货号

规格

价格(元)

北京库存

上海库存

广州库存

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苏州库存

#M0373L

10,000 units

3,219.00

有

无

有

#M0373S

2,000 units

799.00

有

无

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isoschizomers |
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特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端

 将腺苷化单链引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将腺苷化单链引物连接至 RNA 上，用于链特异性 cDNA 文库构建

概述

T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。

T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2，截短型（NEB#M0242）的双点突变体。 K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性， K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接（串联体和环）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K，提高了酶的连接活性，使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
因为不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性，所以连接反应的背景可以降至最低。该酶已用于二代测序 Small RNA的文库构建中，优化了接头的连接过程。

来源

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

单位定义

200 单位指 10 μl 反应体系中，25℃ 条件下，1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头（NEB #S1315）] 所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

200,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

T3 RNA 聚合酶货号 #M0378S-NEB酶试剂

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T3 RNA 聚合酶收藏

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广州库存

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苏州库存

#M0378S

5,000 units

879.00

无

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特性

 制备放射性标记的 RNA 探针

 合成用于体外翻译的 RNA

 合成用于 RNA 结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成反义 RNA，调控基因表达

概述

来源

反应条件

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下， 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

T3 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；T7 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶：20,000 units/ml。

参考文献

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T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）（高浓度）货号 #M0437M-NEB酶试剂

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T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）（高浓度）收藏

货号

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价格(元)

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上海库存

广州库存

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苏州库存

#M0437M

5,000 units

3,129.00

有

无

有

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特性

 连接单链 RNA 和 DNA

 用 5´ -[³²P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记

 RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接

 合成单链寡脱氧核苷酸
 蛋白质中掺入非天然氨基酸

概述

来源

携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl₂，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。

使用注意事项

pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。

随酶提供试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（NEB #M0204中包含）或 100 mM ATP（NEB #M0437中包含）50% PEG 8000

质保声明

无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[³²P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

10,000 或 30,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。

T7 RNA 聚合酶（高浓度）货号 #M0460T-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

T7 RNA 聚合酶（高浓度）收藏

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规格

价格(元)

北京库存

上海库存

广州库存

成都库存

苏州库存

#M0460T

50,000 units

6,389.00

有

无

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浓度

1,000,000 units/ml

特性

使用 T7 噬菌体启动子进行体外转录

该产品为高浓度版本的 T7 RNA 聚合酶（NEB＃M0251）

适用于有经验的体外转录用户

随产品提供 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁

概述

T7 RNA 聚合酶（高浓度）的浓度为标准 T7 RNA 聚合酶（NEB＃M0251）的 20 倍，是希望自己建立和优化体外转录反应体系的有经验用户的理想选择。该酶配有 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁溶液，可进一步调试不同条件，例如核苷酸浓度。

对于标准 RNA 合成和高产量反应，我们推荐使用 T7 RNA 聚合酶（NEB＃M0251）和 HiScribe™ 试剂盒。HiScribe 试剂盒特别适合在短时间内以最少的优化，合成出高质量、高产量的 RNA。

体外转录除了 T7 RNA 聚合酶外还涉及多种成分，包括核糖核苷酸、无机焦磷酸酶和 RNase 抑制剂，这些均可单独购买。详细信息请参考“相关产品”部分。如需更多转录优化方案，请参阅相关文献。

噬菌体 T7 RNA 聚合酶是一种 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对 T7 噬菌体启动子具有高度特异性。该酶的分子量为 99 kD，它以 T7 启动子后的 DNA 序列为模板催化体外 RNA 合成。使用 T7 RNA 聚合酶合成的 RNA 适用于科研和生物技术的诸多应用。

产品来源

来源于 E.coli 菌株，携带 T7 RNA 聚合酶基因。

随产品提供的试剂

	储运温度(°C)	浓度
RNAPol Reaction Buffer	-20	10 X
MgCl₂ solution		0.2 M

产品类别：miRNA & siRNA 产品、RNA 相关试剂

应用：RNA 分析，体外合成（IVT）

特色应用

mRNA 用于体外翻译和显微注射

放射标记的 RNA 探针

非同位素 RNA 标记

制备 RNA 疫苗

靶基因的向导 RNA

RNA 的结构、加工以及催化作用的研究

基因表达实验中的反义 RNA

RNA 扩增

等温扩增

Hi-T7 RNA 聚合酶（高浓度）货号 #M0470T-NEB酶试剂

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

Hi-T7 RNA 聚合酶（高浓度）收藏

货号

规格

价格(元)

北京库存

上海库存

广州库存

成都库存

苏州库存

#M0470T

50,000 units

8,159.00

无

有

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特性

Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶适合在较高温度下进行体外转录，在 37-56℃ 有活性

使用 T7 噬菌体启动子进行体外转录

该产品为高浓度版本的 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（NEB＃M0658）

使用帽类似物时，提高共转录的加帽效率

由于减少了 dsRNA 副产物的形成，从而使高温合成 RNA 的免疫原性降低

适用于有经验的体外转录用户

随产品带有 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁

概述

Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（高浓度）的浓度为标准 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（NEB＃M0658）的 20 倍，是希望自己建立和优化体外转录反应体系的有经验用户的理想选择。该酶配有 Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶反应缓冲液和氯化镁溶液，可进一步调试不同条件，例如核苷酸浓度。

体外转录除了 RNA 聚合酶外还涉及多种成分，包括核糖核苷酸、无机焦磷酸酶和 RNase 抑制剂，这些均可单独购买。详细信息请参考“相关产品”部分。

Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶是一种经基因工程改造的 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对 T7 噬菌体启动子具有高度特异性，跟野生型噬菌体 T7 RNA 聚合酶相比，它可在更高的温度下进行反应。Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶的最佳温度为 50-52°C。

在更高的体外转录反应温度下，Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶（高浓度）减少了 dsRNA 副产物

Hi-T7 RNA 聚合酶（高浓度）货号 #M0470T

使用 dsRNA 抗体（J2）进行免疫印记实验显示：在 37℃ 进行体外转录实验时，T7 和 Hi-T7 的转录产物均含有 dsRNA 副产物，HPLC 纯化可消除体外转录 RNA 中的 dsRNA 副产物。在 50℃ 条件下使用 Hi-T7 进行体外转录实验时，dsRNA 副产物明显减少。

产品来源

来源于 E.coli 菌株，携带经基因工程改造的 T7 RNA 聚合酶基因。

随产品提供的试剂

	储运温度(°C)	浓度
Hi-T7^® RNA Polymerase Reaction Buffer	-20
MgCl₂ solution		0.2 M

产品类别： RNA 相关试剂、RNA 合成产品

应用：RNA 分析，体外合成（IVT）

特色应用

mRNA 用于体外翻译、显微注射以及转染

放射标记的 RNA 探针

非同位素 RNA 标记

靶基因的向导 RNA

RNA 的结构、加工以及催化作用的研究

基因表达实验中的反义 RNA

RNA 扩增

等温扩增

Hi-T7 RNA 聚合酶货号 #M0658S-NEB酶试剂

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

Hi-T7 RNA 聚合酶收藏

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#M0658S

5,000 units

1,019.00

无

有

无

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特性

Hi-T7 RNA 聚合酶货号 #M0658S

反应条件

1X RNAPol 反应缓冲液。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP（不随酶提供）和带有启动子的模板 DNA。于 37℃（ T3、T7 和 SP6 ）或 50℃（Hi-T7）条件下温育。

概述

T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体，可将目的基因序列克隆到T3、 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中，以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。

Hi-T7 RNA 耐热聚合酶是经基因工程改造的热启动 T7 RNA 聚合酶。Hi-T7 使用 T7 RNA 聚合酶启动子。在合成过程中，可提高加帽效率并消除 dsRNA 副产物的产生。

单位定义

1 单位指在 37℃或 50℃（Hi-T7）条件下，1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.neb-china.com 或www.neb.com。

浓度

T3 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；T7 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶：20,000 units/ml； Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶：50,000 units/ml。

T7 DNA 连接酶货号 #M0318L-NEB酶试剂

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#M0318L

750,000 units

3,319.00

有

无

有

#M0318S

100,000 units

829.00

有

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特性

 仅用于连接粘性末端
 dsDNA 切刻修复

概述

T7 DNA 连接酶来源于 T7 噬菌体，它是一种 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶，该酶可催化双链 DNA 相邻 5´ 磷酸末端和 3´ 羟基基团之间形成磷酸二酯键。T7 DNA 连接酶可以有效地催化粘性末端和切刻的连接。与 T4 和 T3 DNA 连接酶不同，T7 DNA 连接酶不能有效地催化平末端连接。因此，在实验过程中，当平末端和粘性末端同时存在时，仅需粘性末端发生连接，T7 DNA 连接酶是理想的选择。

来源

重组 E. coli 质粒，含有 T7 DNA 连接酶编码基因。

反应条件

1 X T7 DNA 连接酶反应缓冲液

[66 mM Tris-HCl，1 mM ATP，10 mM MgCl₂，1 mM DTT，7.5% PEG 6000 (pH 7.6 @ 25℃)]，25℃ 温育。

质保声明

T7 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测，以确保最高的纯度和反应效率。详情请联系我们。

单位定义

1 单位是指在 20 μl 总反应体系中，1 X T7 DNA 连接酶反应缓冲液条件下，25℃ 温育 30 分钟，能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 片段连接所需的酶量。

浓度

3,000,000 units/ml。

注意事项

ATP 是必需的辅助因子。

当某些实验不能用 PEG 6000 时，可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液，但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。

65℃ 加热 10 分钟可使 T7 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG，该酶不能加热失活，否则会抑制后续转化实验。

参考文献

Salt-T4™ 耐盐 DNA 连接酶货号 #M0467L-NEB酶试剂

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#M0467L

100,000 units

3,139.00

无

#M0467S

20,000 units

779.00

有

无

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特性

Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶是 T4 DNA 连接酶经基因工程改造过的酶，与 T4 DNA 连接酶相比提高了耐盐性
不仅能够连接平末端和粘性末端，还能修复双链 DNA 和 DNA/RNA 杂交链的单链切刻
随酶提供 T4 DNA 连接酶缓冲液和 StickTogether™ DNA 连接酶缓冲液

概述

Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶作为 T4 DNA 连接酶的耐盐变体，该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的5´ -磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键，比野生型T4 DNA连接酶更耐受高盐条件。该酶在盐浓度高达300mM的情况下仍能连接粘性末端而不丧失任何活性。该酶对其他反应组分（载体或插入片段）携带的盐不敏感，并允许连接反应在盐含量较高的替代反应缓冲液（如 NEBuffer 3.1）中进行。

图1：与T4 DNA连接酶相比，Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶在粘性末端底物上表现出更高的耐盐性

Salt-T4™ 耐盐 DNA 连接酶货号 #M0467L

在 25℃ 条件下，用 400 单位的 T4 DNA 连接酶（NEB # M0202）或 Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶（NEB # M0467）与 0.12 µM 荧光标记的 HindIII（粘性末端）酶切片段在盐量增加（0-1000 mM NaCl）的 1 x T4

DNA 连接酶缓冲液中温育 10 分钟。连接产物用毛细管电泳检测。

当盐浓度超过 200 mM 时，T4 DNA连接酶的活性迅速丧失，而在盐浓度高达 500 mM时，Salt-T4 耐盐

DNA 连接酶在粘性末端底物上仍保留了 > 60% 的活性。

来源

纯化自表达 Salt- T4 耐盐 DNA连接酶基因的 E. coli。

反应条件

1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液（50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，10 mM DTT，1 mM ATP，（pH 7.5 @ 25℃）），25℃ 温育。

热失活

65℃ 加热 10 分钟。

质保声明

Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

单位定义（粘性末端活性单位）

1 单位指在 20 µl 反应体系中，含 100 mM NaCl 的 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液条件下，25℃ 温育 30 分钟，能使 50% 的 6 µg 经 HindIII 消化的 λDNA 连接所需的酶量。

浓度

400,000 units/ml。

注意事项

1、与 E. coli DNA 连接酶需要 NAD+ 作辅因子不同，Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶的辅因子是 ATP。

2、若需稀释 T4 DNA 连接酶，推荐使用 50% 甘油贮存缓冲液（稀释缓冲液 A，NEB #B8001S）稀释，

-20℃ 保存。如稀释后马上使用，也可用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。

3、室温连接

为了方便，可在室温（20-25℃）进行连接。连接粘性末端（1 x T4 DNA 连接酶缓冲液）：在 20 µl 反应体系中加入 1 µl Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶，反应 10 分钟。连接平末端或单碱基突出末端

（1 x StickTogether™DNA 连接酶缓冲液）：在 20 µl 反应体系中加入 1 µl Salt-T4 耐盐 DNA 连接酶，反应 10 分钟。不要用加热来终止反应，因为 StickTogether™DNA连接酶缓冲液里的 PEG 受热会抑制转化。

参考文献

该产品的特性和应用的参考文献，请联系我们。

固定化 T4 DNA 连接酶货号 #M0569S-NEB酶试剂

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#M0569S

1.1 mg

3,379.00

无

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产品特点

· 固定化 T4 DNA 连接酶（IM T4 DNA Ligase）由 T4 DNA 连接酶和磁珠组成，两者由共价键连接。

· 使用磁力可轻松去除反应中的酶

· 避免热失活步骤对下游应用的干扰

· 固定化酶可重复使用

· 开启新的工作流程和应用

产品说明

T4 DNA 连接酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´-磷酸基末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平末端或粘性末端之间的连接，还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻（1）。

固定化 T4 DNA 连接酶（IM T4 DNA Ligase）是包被有 T4 DNA 连接酶的磁珠悬浮液，以 10 mg/ml 的溶液（50% 甘油）提供，每微升溶液的有效浓度为 60 粘性末端单位（CEU）。反应完成后，体系中的酶可使用磁力去除，然后可重复使用。

固定化 T4 DNA 连接酶在不同温度下的相对活性

Temperature	% Activity
16ºC	100%
25ºC	100%
37ºC	50%

固定化 T4 DNA 连接酶在不同 NEB 缓冲液中的活性

固定化 T4 DNA 连接酶货号 #M0569S

图 1：固定化 T4 DNA 连接酶成功连接 Lambda DNA-HindIII 消化产物

固定化 T4 DNA 连接酶货号 #M0569S

根据产品说明书推荐步骤，分别使用无连接酶、可溶性 T4 DNA 连接酶（NEB #M0202）、固定化 T4 DNA 连接酶（NEB #M0569）对 Lambda DNA- HindIII 消化产物（NEB #N3012）进行连接。结果显示，可溶性酶和固定化酶的连接效果一致。

图 2：固定化 T4 DNA 连接酶可重复使用

固定化 T4 DNA 连接酶货号 #M0569S

将固定化 T4 DNA 连接酶（NEB #M0569）置于快连缓冲液中，对 Nanopore 接头进行连续夹板连接，数据显示：经过 20 次连续连接反应后，酶活仍不受影响。

Hi-T4™ 耐热 DNA 连接酶货号 #M2622L-NEB酶试剂

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#M2622L

100,000 units

3,169.00

无

有

无

#M2622S

20,000 units

789.00

有

无

有

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特性

Hi-T4 耐热 DNA 连接酶是 T4 DNA 连接酶经基因工程改造过的酶，与 T4 DNA 连接酶相比，改善了热稳定性
不仅能够连接平末端和粘性末端，还能修复双链 DNA 和 DNA/RNA 杂交链的单链切刻
随酶提供 T4 DNA 连接酶缓冲液和 StickTogether™ DNA 连接酶缓冲液

概述

Hi-T4™ 耐热 DNA 连接酶是 T4 DNA 连接酶的耐热变体，该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´ – 磷酸末端和 3´ – 羟基末端形成磷酸二酯键，经过改造其作用温度高于野生型 T4 DNA 连接酶。Hi-T4 耐热 DNA 连接酶可在温度高达 50ºC 时进行平末端和粘性末端的连接以及修复双链 DNA 、RNA 或
DNA / RNA 杂交链的单链切刻。

图1：Hi-T4 耐热 DNA 连接酶比普通 T4 DNA 连接酶热稳定性更好

45℃ 温度下，将 400 单位 T4 DNA 连接酶（NEB #M0202）或 Hi-T4 耐热 DNA
连接酶（NEB #M2622）与 1X T4 DNA 连接酶缓冲液，在无底物情况下预加热
如图所示时间后，所剩酶活进行如下检测：添加 0.12 µM 荧光标记的 HindIII
粘性末端片段 37℃ 温育 15 分钟，连接产物用毛细管电泳检测。
T4 DNA 连接酶在 45℃ 条件下，逐渐失去活性，而 Hi-T4 耐热 DNA 连接酶
即使在 45℃ 温育 72小时，对粘性末端底物仍有 100% 的活性。

图2：Hi-T4 耐热 DNA 连接酶比普通 T4 DNA 连接酶更耐热循环

在 1X T4 DNA连接酶缓冲液中，分别用 1000 单位的 T4 DNA 连接酶（NEB#
M0202）或 Hi-T4 耐热 DNA 连接酶（NEB# M2622）与 1 µg pBR322 进行循环
温育。循环温度设置为：42℃（A）或 50℃（B） 5 分钟，16℃ 5 分钟，
循环数如图显示：0、15、30、45、60。所剩酶活检测如下：25℃ 条件下，连
接荧光标记的 HindIII 粘性末端片段 10 分钟，连接产物用毛细管电泳检测。
相比于循环开始前的所剩酶活见图。
A. T4 DNA 连接酶在 16℃ 和 42℃ 循环温育时逐渐失去活性（金线，A），然
而 Hi-T4 耐热 DNA连接酶在 16℃ 和 42℃ 循环温育 60 次后仍保持活性
（橙色线，A）。
B. T4 DNA 连接酶在 16℃ 和 50℃ 循环温育 15 次后（金线，B）就完全失
活，然而 Hi-T4 耐热 DNA 连接酶在 16℃ 和 50℃ 循环温育 60 次（橙色
线，B）后仍保留 60% 左右的活性。

来源

重组表达纯化。

反应条件

1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液（50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl₂，10 mM DTT，1 mM ATP，（pH 7.5 @ 25℃）），25℃ 温育。

热失活

65℃ 加热 10 分钟。

质保声明

Hi-T4 耐热 DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

单位定义（粘性末端活性单位）

1 单位指在 20 µl 反应体系中，25℃ 反应条件下，30 分钟能使 50% 的 6 µg经 HindIII 消化的λDNA 连接所需的酶量。

浓度

400,000 units/ml。

注意事项

1、与 E. coli DNA 连接酶需要 NAD+ 作辅因子不同，Hi-T4 耐热 DNA 连接酶的辅因子是 ATP。

2、若需稀释 Hi-T4 耐热 DNA 连接酶，推荐使用 50% 甘油贮存缓冲液稀释（稀释缓冲液A，

NEB #B8001S），-20℃ 保存。如稀释后马上使用，也可用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。

3、连接温度

连接粘性末端（1 x T4 DNA 连接酶缓冲液）：在 20 µl 反应体系中加入 1 µl Hi-T4 DNA 连接酶，25 – 50ºC 温育 10 分钟。连接平末端或单碱基突出末端（1 x StickTogether DNA 连接酶缓冲液）：在 20 µl 反应体系中加入 1 µl Hi-T4 耐热 DNA 连接酶，25 – 50ºC 温育 10 分钟。不要用加热来终止反应，因为

StickTogether DNA连接酶缓冲液里的 PEG 受热会抑制转化。

参考文献

该产品的特性和应用的参考文献，请联系我们。

T4 多聚核苷酸激酶（3’磷酸酶活性缺失）货号 #M0236L-NEB酶试剂

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 激酶

T4 多聚核苷酸激酶（3’磷酸酶活性缺失）收藏

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规格

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#M0236L

1,000 units

5,159.00

无

#M0236S

200 units

1,289.00

有

无

有

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特性

 DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化，以便进行连接反应。

 DNA 或 RNA 的末端标记，用作探针和进行 DNA 测序

 T4 多聚核苷酸激酶（缺失 3´ 磷酸酶活性）（NEB #M0236）将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化，制备pNp 底物，用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
 用 T4 多聚核苷酸激酶（缺失 3´ 磷酸酶活性）（NEB #M0236）对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记

概述

来源

重组 E. coli 菌株，克隆有经修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。

反应条件

1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液

[70 mM Tris-HCl（pH 7.6 @ 25℃），10 mM MgCl₂，5 mM DTT]，37℃ 温育。

热失活：65℃ 加热 20 分钟。

注意事项

达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。

CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。

DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请联系我们。

T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。

质保声明

T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。

单位定义

1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [³²P] 掺入所需要的酶量（1）。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

10,000 units/ml。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。

T4 多聚核苷酸激酶反应

2025年 3月
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T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 收藏

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来源

反应条件

注意事项

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参考文献

T4 多聚核苷酸激酶反应

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶） 收藏

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反应条件

使用注意事项

随酶提供试剂

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T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶） 收藏

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反应条件

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T4 RNA 连接酶 2，截短型 收藏

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随酶提供的试剂

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随酶提供的试剂

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