细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒 P0914

上海金畔生物科技有限公司供应细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒 Jinpan P0914量大优惠,咨询 :

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司供应细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒 Jinpan P0914量大优惠,咨询 :      2743691513

 

产品简介:

产品编号

产品名称

产品包装

产品价格

P0914

细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒

50

420.00

P0914

细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒

200

980.00

 

 

1、在研究细胞时经常要研究细胞的不同组份,而研究得zui多的两个细胞组份就是细胞核和细胞浆。分离细胞核蛋白和细胞浆蛋白,不仅可以用于研究蛋白在细胞内的定位,而且很多时候分离出来的核蛋白可以用于转录调控方面的研究,例如EMSA(也称gelshift),footprinting等。
    细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒(Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit)提供了一种比较简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提细胞核蛋白与细胞浆蛋白的方法。约90分钟就可以完成培养细胞的细胞核蛋白与细胞浆蛋白的分离。抽提得到的蛋白可以用于Western,EMSA,footprinting,报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
    本试剂盒是通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B,在低渗透压条件下,使细胞充分膨胀,然后破坏细胞膜,释放出细胞浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。zui后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。
    本试剂盒可以抽提50个样品,如果每个样品的数量为约二百万细胞或约60毫克组织。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装50T

包装200T

P0914-1

细胞浆蛋白抽提试剂A

10ml

40ml

P0914-2

细胞浆蛋白抽提试剂B

0.5ml

2.0ml

P0914-3

细胞核蛋白抽提试剂

2.5ml

10ml

 

PMSF(100mM)

1.5ml

1.5ml

 

说明书

1

1

2、 
保存条件:
    -20℃保存,一年有效。
注意事项:
    PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。
    抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    本试剂盒对于组织样品,仅适合于新鲜组织,对冻存过的组织抽提效果很差。可以抽提的组织样品数通常不足100个。
    使用本试剂盒抽提到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白均可直接用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、 使用说明:
1. 准备溶液:温融解试剂盒中的三种试剂,溶解后立即放置在冰上,混匀。取适当量的细胞浆蛋白抽提试剂A备用,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM。取适当量的细胞核蛋白抽提试剂备用,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞:用PBS洗一遍,用细胞刮子刮下细胞,或用EDTA溶液处理细胞使细胞不再贴壁很紧,并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞,尽zui大努力吸尽上清,留下细胞沉淀备用。尽量避免用胰酶消化细胞,以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。
3. 对于悬浮细胞:用PBS洗一遍,离心收集细胞,尽zui大努力吸尽上清,留下细胞沉淀备用。
4. 每20微升细胞沉淀加入200微升添加了PMSF的细胞浆蛋白抽提试剂A。(对于二百万Hela细胞,其细胞沉淀的体积大约为20微升或40毫克。)
5. zui高速剧烈Vortex 5秒,把细胞沉淀*悬浮并分散开。(如果细胞沉淀没有*悬浮并分散开,可以适当延长vortex时间。)
6. 冰浴10-15分钟。
7. 加入细胞浆蛋白抽提试剂B 10微升。zui高速剧烈Vortex 5秒,冰浴1分钟。
8. zui高速剧烈Vortex 5秒,4℃ 12,000-16,000g离心5分钟。
9. 立即吸取上清至一预冷的塑料管中,即为抽提得到的细胞浆蛋白。可以立即使用,也可以冻存。(千万不要触及沉淀,可以在沉淀上方保留极小体积的上清,以免触及沉淀。)
10. 对于沉淀,*吸尽残余的上清,加入50微升添加了PMSF的细胞核蛋白抽提试剂。(不吸尽上清会带来细胞浆蛋白的污染。)
11. zui高速剧烈Vortex 15-30秒,把细胞沉淀*悬浮并分散开。然后放回冰浴中,每隔1-2分钟再高速剧烈Vortex 15-30秒,共30分钟。
12. 4℃ 12,000-16,000g离心10分钟。
13. 立即吸取上清至一预冷的塑料管中,即为抽提得到的细胞核蛋白。可以立即使用,也可以-70℃冻存。
14. 对于新鲜组织:
    A. 把组织尽可能切成非常细小的碎片。按照20:1的比例混合适当量的细胞浆蛋白抽提试剂A和B(例如200微升细胞浆蛋白抽提试剂A中加入10微升抽提试剂B)。并加入PMSF至zui终浓度为1mM配制成组织匀浆液。按照每60mg组织加入200微升组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液,并在玻璃匀浆器内充分匀浆。匀浆需在冰浴或4℃进行。
    B. 匀浆后把匀浆液转移到塑料离心管内,冰浴放置15分钟。
    C. 4℃ 1,500g离心5分钟。把上清转移至一预冷的塑料管中,为抽提得到的部分细胞浆蛋白。(吸上清时千万不要触及沉淀。)
    D. 对于沉淀,到了这一步已经充分匀浆,但很多细胞还没有破碎。接下去按照使用说明的步骤4开始操作,即把沉淀当做已经离心收集好的细胞沉淀操作,按照步骤4至步骤13抽提得到细胞浆蛋白和细胞核蛋白。抽提得到的细胞浆蛋白可以和步骤14C中抽提得到的细胞浆蛋白合并。

 

酵母蛋白小量提取试剂盒 P1140

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酵母蛋白小量提取试剂盒 Jinpan P1140

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酵母蛋白小量提取试剂盒

一,试剂盒组份

组份

 (50T)

 (100T)

酵母裂解液

50mL

100mL

玻璃珠

3g

6g

PMSF(100X)

1ml

1ml

β-巯基乙醇

1ml

1ml

二,说明

酵母蛋白小量提取试剂盒用于从酵母细胞中分提取可溶性各种蛋白。提取的蛋白可用于各种常规实验。如PAGEWestern,免疫沉淀(immunol precipitationIP)和免疫共沉淀(co-IP)。酵母裂解液中不含任何去污剂,可用各种方法测定蛋白含量。

三,操作步骤

1.   酵母常规培养。

2.   离心收集酵母。大概50100ul的积压体积。*弃上清。

3.   加入酵母裂解液,吹打重重悬。再次离心,弃上清(此步的目的是将酵母洗一下,也可以省掉此步)。

4.   在酵母菌中,再加入0.5ml裂解液,加入5ul PMSF5ulβ巯基乙醇(在通风处操作)。加入50mg左右的玻璃珠,预冷,涡流10min(每涡流1min,可以冰上冷却1min)。

5.   离心,取上清。进行下一步实验或者-70储存。

四,注意事项

1,不同的酵母可能须涡流时间不同,可根据实际情况延长或者缩短时间。(比如蛋白浓度高低,蛋白降解情况等。)

2,如果一个月内能够用完,可将β巯基乙醇按照百分之一的量一次性全部加入酵母裂解液中。28度保存。

3,因为是采用物理方法破解酵母壁,所以对于酶等一些易失活蛋白可能并不适合。

4,为了你的实验安全,请戴手套操作。并注意通风。

 

非变性细胞裂解缓冲液 P0916

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产品简介:

产品编号

产品名称

产品包装

产品价格

P0916

非变性蛋白裂解液

100ml

220.00

 

非变性细胞裂解缓冲液(Nondenaturing Lysis Buffer)内含非离子型去垢剂、盐、和蛋白磷酸酶抑制剂,能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物zui大限度地保留了蛋白的特性和功能,如抗原抗体结合或酶学活性,因此适宜于进行免疫共沉淀。另外,有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性蛋白的抗原位点,这种情况应该使用非变性裂解。

    非变性细胞裂解缓冲液的主要成分为20mM Tris(pH7.5)150mM NaCl1% Triton X-1001% NP-40以及2mM sodium pyrophosphate25mM β-glycerophosphate1mM EDTA1mM Na3VO40.5 ug/ml leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
    非变性蛋白裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

包装清单:

产品编号

产品名称

包装

P0916

非变性蛋白裂解液

100ml

 

PMSF100mM

1.5ml

 

说明书

1

保存条件:
    -20℃保存,一年有效。
注意事项:
    为取得*的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。裂解样品的所有步骤都需在冰上或4进行。
    关于裂解液的选择,一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异,选择合适的裂解液;另一方面也需要通过一些预实验来摸索*的适合您实验条件的裂解液。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
对于培养细胞样品:
1. 融解非变性蛋白裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
   对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
   裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解非变性蛋白裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
3. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
4.
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

 

Western及IP细胞裂解液 P0907

上海金畔生物科技有限公司供应Western及IP细胞裂解液 Jinpan P0907量大优惠,咨询 :

 

Western及IP细胞裂解液 Jinpan P0907

 

上海金畔生物科技有限公司供应Western及IP细胞裂解液 Jinpan P0907量大优惠,咨询 :      2743691513

 

Western及IP细胞裂解液

产品编号: P0901
产品包装: 100ml
产品价格: 220.00元

 

    我们生产的Western及IP细胞裂解液(Cell lysis buffer for Western and IP),是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
    Western及IP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及2mM sodium pyrophosphate,25mM β-glycerophosphate,1mM EDTA,1mM Na3VO4,0.5 ug/ml leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
    用Western及IP细胞裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

包装清单:

产品编号

产品名称

包装

P0901

Western及IP细胞裂解液

100ml

 

PMSF(100mM)

1.5ml

 

说明书

1

保存条件:
    -20℃保存,一年有效。
注意事项:
    为取得*的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    关于裂解液的选择,一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异,选择合适的裂解液;另一方面也需要通过一些预实验来摸索*的适合您实验条件的裂解液。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
对于培养细胞样品:
1. 融解Western及IP细胞裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
   对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
   裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解Western及IP细胞裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

 

SDS裂解液 P0912;沈阳供应SDS裂解液 P091

上海金畔生物科技有限公司供应SDS裂解液 Jinpan P0912量大优惠,咨询 :

SDS裂解液 Jinpan P0912

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 产品简介:

产品编号

产品名称

产品包装

产品价格

P0912

SDS裂解液

100ml

220.00

    我们生产的SDS裂解液(SDS Lysis Buffer)是一种比较强烈的细胞组织裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的WesternChIP(染色质免疫共沉淀,chromatin immunoprecipitation)等。
    关于我们生产的不同的裂解液的主要特点和差异,以及如何选择裂解液可参考附录。
    SDS裂解液的主要成分为50mM Tris(pH8.1)1% SDS,以及2mM sodium pyrophosphate25mM β-glycerophosphate1mM EDTA1mM Na3VO40.5 ug/ml leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
    SDS裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

P0912

SDS裂解液

100ml

 

PMSF100mM

1.5ml

说明书

1

保存条件:
    -20℃保存,一年有效。
注意事项:
    为取得*的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
    裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    关于裂解液的选择,一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异,选择合适的裂解液;另一方面也需要通过一些预实验来摸索*的适合您实验条件的裂解液。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
对于培养细胞样品:
1. 融解SDS裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗。按照6孔板每孔加入150–250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
   对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWesternChIP等操作。
   裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。如果用于ChIP,建议6孔板每孔细胞至少加入200微升裂解液。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解SDS裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
3. 按照每20毫克组织加入150–250微升裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
4.
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWesternChIP等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

RIPA裂解液(中) P0904;长春供应RIPA裂解液(中) NobleRy

上海金畔生物科技有限公司供应RIPA裂解液(中) Jinpan P0904量大优惠,咨询 :

 

 RIPA裂解液(中) Jinpan P0904

上海金畔生物科技有限公司供应RIPA裂解液(中) Jinpan P0904量大优惠,咨询 :      2743691513

 

1、 品简介:

产品编号

产品名称

产品包装

产品价格

P0904

RIPA裂解液(中)

100ml

220.00

2、     我们生产的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
    RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。关于不同的RIPA裂解液以及我们生产的其它裂解液的主要特点和差异,以及如何选择裂解液可参考附录。
    RIPA裂解液(中)的主要成分为50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% sodium deoxycholate,0.1% SDS,以及2mM sodium pyrophosphate,25mM β-glycerophosphate,1mM EDTA,1mM Na3VO4,0.5 ug/ml leupeptin等多种抑制剂。
    用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

P0904

RIPA裂解液(中)

100ml

 

PMSF(100mM)

1.5ml

说明书

1

3、 保存条件:
    -20℃保存,一年有效。
注意事项:
    为取得*的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
    裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    关于裂解液的选择,一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异,选择合适的裂解液;另一方面也需要通过一些预实验来摸索*的适合您实验条件的裂解液。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4、 使用说明:
对于培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
   对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
   裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组
DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NFκB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

RIPA裂解液(弱) P0906

上海金畔生物科技有限公司供应RIPA裂解液(弱) Jinpan P0906量大优惠,咨询 :

 

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产品简介:

产品编号

产品名称

产品包装

产品价格

P0906

RIPA裂解液

100ml

220.00

    我们生产的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的WesternIP等。
    RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation AssayRIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。关于不同的RIPA裂解液以及我们生产的其它裂解液的主要特点和差异,以及如何选择裂解液可参考附录。
    RIPA裂解液的主要成分为50mM Tris(pH7.4)150mM NaCl1% NP-400.25% sodium deoxycholate,以及2mM sodium pyrophosphate25mM β-glycerophosphate1mM EDTA1mM Na3VO40.5 ug/ml leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
    RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
包装清单:

 

产品编号

产品名称

包装

P0906

RIPA裂解液

100ml

 

PMSF100mM

1.5ml

说明书

1

 

保存条件:
    -20℃保存,一年有效。
注意事项:
    为取得*的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
    裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    关于裂解液的选择,一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异,选择合适的裂解液;另一方面也需要通过一些预实验来摸索*的适合您实验条件的裂解液。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
对于培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
   对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。作。
   裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
4.
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组
DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NFκBp53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

RIPA裂解液(强中弱套装) P0908

上海金畔生物科技有限公司供应RIPA裂解液(强中弱套装) Jinpan P0908量大优惠,咨询 :

 

 RIPA裂解液(强中弱套装) Jinpan P0908

上海金畔生物科技有限公司供应  RIPA裂解液(强中弱套装) Jinpan P0908量大优惠,咨询 :      2743691513

 

产品编号

产品名称

产品包装

产品价格

P0908

RIPA裂解液强中弱套装

150ml

280.00

    我们生产的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的WesternIP等。
    RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation AssayRIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。关于不同的RIPA裂解液以及我们生产的其它裂解液的主要特点和差异,以及如何选择裂解液可参考附录。
    RIPA裂解液强中弱套装含有RIPA裂解液RIPA裂解液RIPA裂解液50ml,便于实验时探索不同的实验条件。
    RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度.
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

P0902

RIPA裂解液

50ml

P0904

RIPA裂解液

50ml

P0906

RIPA裂解液

50ml

 

PMSF100mM

1.8ml

说明书

1

保存条件:
    -20℃保存,一年有效。
注意事项:
    为取得*的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
    裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    关于裂解液的选择,一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异,选择合适的裂解液;另一方面也需要通过一些预实验来摸索*的适合您实验条件的裂解液。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
对于培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
   对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern和免疫沉淀等操作。
   裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
4.
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NFκBp53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

RIPA裂解液(强) P0902;成都供应RIPA裂解液(强) NobleRy

上海金畔生物科技有限公司供应RIPA裂解液(强) Jinpan P0902量大优惠,咨询 :

 

 RIPA裂解液(强) Jinpan P0902

 

上海金畔生物科技有限公司供应 RIPA裂解液(强) Jinpan P0902量大优惠,咨询 :      2743691513

    Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, FermantasMBI, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材及仪器。

产品简介:

产品编号

产品名称

产品包装

产品价格

P0902

RIPA裂解液

100ml

220.00

    我们生产的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的WesternIP等。
    RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation AssayRIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。关于不同的RIPA裂解液以及我们生产的其它裂解液的主要特点和差异,以及如何选择裂解液可参考附录。
    RIPA裂解液的主要成分为50mM Tris(pH 7.4)150mM NaCl1% Triton X-1001% sodium deoxycholate0.1% SDS,以及2mM sodium pyrophosphate25mM β-glycerophosphate1mM EDTA1mM Na3VO40.5 ug/ml leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
    RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

P0902

RIPA裂解液

100ml

 

PMSF100mM

1.5ml

 

说明书

1

保存条件:
    -20℃保存,一年有效。
注意事项:
    为取得*的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
    裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    关于裂解液的选择,一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异,选择合适的裂解液;另一方面也需要通过一些预实验来摸索*的适合您实验条件的裂解液。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
对于培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
   对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern和免疫沉淀等操作。
   裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
4.
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组
DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NFκBp53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

                                                                                    

PMSF(100mM) P0160;昆明供应PMSF(100mM) Noble

上海金畔生物科技有限公司供应PMSF(100mM) Jinpan P0160量大优惠,咨询 :

 

 

上海金畔生物科技有限公司供应 PMSF(100mM) Jinpan P0160量大优惠,咨询 :      2743691513

 

本试剂为DMF溶解,现用现加,终浓度为1mM,即1ml液体加入10ulPMSF。

抑制丝氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
在水液体溶液中不稳定,30分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次。(见水分解,使用前加入)

1. PMSF,严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

  2. PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。

  3. PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节 为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。

PMSF的储存:2-8℃可以存放数月之久。欲长期保存,可冻存在-20℃

 

Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 P0040

上海金畔生物科技有限公司供应1、Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 Jinpan P0040量大优惠,咨询 :

 

上海金畔生物科技有限公司供应Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 Jinpan P0040量大优惠,咨询 :

 

Lowry法蛋白浓度测定试剂盒
          

 

试剂盒组成

包装(1000微孔

保存

Folin酚甲试剂A

100ml×2

2-8

Folin酚甲试剂B

5ml

2-8

Folin酚乙试剂(1N)

20ml

2-8

PBS稀释液

30ml

2-8

BSA蛋白标准 (5mg/ml BSA)

1ml

-20

本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做1000孔。当使用2ml比色皿时可做100孔,如果是1ml比色皿时可做200孔。

产品简介

Folin-酚试剂法包括两步反应:*步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质铜络合物;第二步是此络合物将Folin试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5100μg/ml蛋白质。Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。

使用说明

一,酶标仪法

1.         根据需要量,将Folin酚甲试剂AFolin酚甲试剂B501混合,其有效期为24小时,过期失效。

2.         稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(标准品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 468, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。

3.         将样品作适当稀释(多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4.         将配好的Folin酚甲试剂每孔加入200微升,轻轻震动,混匀,室温放置10分钟。

5.         各孔加入20微升Folin酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置30分钟。用酶标仪测定A650,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

6.         使用温箱孵育时,应注意防止因水粉蒸发影响检测结果。

二,分光光度计法

如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。步骤如下:

1. 根据需要量,将Folin酚甲试剂AFolin酚甲试剂B501混合,其有效期为24小时,过期失效。

2. 稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(标准品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml

3. 取八支(或者更多)5ml离心管,标让号,按下表加入试剂。

 

离心管号

1

2

3

4

5

6

7(样品管1

8(样品管2

9(样品管3

标准蛋白BSA

0

40ul

80ul

120ul

160ul

200ul

200ul适当稀释的样品1

200ul适当稀释的样品2

……

PBS

200ul

160ul

120ul

80ul

40ul

0

0

0

0

Folin酚甲试剂

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

混匀,室温放置10分钟

Folin酚乙试剂

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

4.混匀,37℃放置30分钟。用分光光度计测定A650

 

 

Bradford蛋白浓度测定试剂盒 P0020

上海金畔生物科技有限公司供应Bradford蛋白浓度测定试剂盒 Jinpan P0020量大优惠,咨询 :

Bradford蛋白浓度测定试剂盒 Jinpan P0020

上海金畔生物科技有限公司供应Bradford蛋白浓度测定试剂盒 Jinpan P0020量大优惠,咨询 :

 Bradford蛋白浓度测定试剂盒
组成 包装(2500微孔) 保存
5×G250染色液 100ml 2-8℃
PBS稀释液 30ml 2-8℃
蛋白标准(5mg/ml BSA) 1ml -20℃
 
本试剂盒自订购之日起九个月内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做2500孔。当使用2ml比色皿时可做250孔,如果是1ml比色皿时可做500孔。

产品简介:

考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的zui大吸收峰的位置(lmax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595,与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。

操作说明:

一,微孔酶标仪法

1.        *溶解蛋白标准品,取10ml,加240ulPBS稀释至250ml ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。

2.        5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml  5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。

3.        将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。

4.        将样品作适当稀释(多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

5.        各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。

6.        用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。

7.        根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

    

二,分光光度计法

如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。

步骤如下:

1,取八支(或者更多)干净的10ml离心管,标记上号。

2,取100ulBSA,加PBS2.4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。

3,5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取10ml  5×G250染色液,加入40ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。

4,按下表加入试剂(以每孔5ml计,多余的用来润洗比色皿)

离心管号 1 2 3 4 5 6 7(样品管1) 8(样品管2) 9(样品管3)
标准蛋白BSA 0 100ul 200ul 300ul 400ul 500ul 500ul适当稀释的样品1 500ul适当稀释的样品2 ……
PBS 500ul 400ul 300ul 200ul 100ul 0 0 0 0
1×G250染色液 5ml 5ml 5ml 5ml 5ml 5ml 5ml 5ml 5ml
 
5,反应3分钟后测OD值。为了实验的准确性,可每间隔2分钟加一管染色液,每间隔2分钟测一管OD值。如下表。

离心管号 1 2 3 4 5 6 7 8 ……
加染色液(分钟) 0 2 4 6 8 10 12 14 ……
测OD值 3 5 7 9 11 13 15 17 ……

BCA蛋白浓度测定试剂盒 P0030

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BCA蛋白浓度测定试剂盒 Jinpan P0030

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BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明

试剂盒组成 包装(500微孔) 保存
 
BCA试剂 100ml 2-8℃
Cu试剂 3ml 2-8℃
PBS稀释液 30ml 2-8℃
BSA蛋白标准 (5mg/ml BSA) 1ml  -20℃
 
 本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做500孔。当使用2ml比色皿时可做50孔,如果是1ml比色皿时可做100孔。

产品简介

碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

使用说明

一,微孔酶标仪法

1.         配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。

2.         稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。

3.         将样品作适当稀释(多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4.         各孔加入200微升BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

  

二,分光光度计法、

如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。

步骤如下:

1.配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。

2,  稀释标准品:取100微升BSA标准品用PBS稀释至1ml(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。

3,  取八支(或者更多)5ml离心管,标让号,按下表加入试剂。

离心管号 1 2 3 4 5 6 7(样品管1) 8(样品管2) 9(样品管3)
标准蛋白BSA 0 40ul 80ul 120ul 160ul 200ul 200ul适当稀释的样品1 200ul适当稀释的样品2 ……
PBS 200ul 160ul 120ul 80ul 40ul 0 0 0 0
BCA工作液 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
4,  37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

载体两性电解质PH3.5-10 P1006

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等电聚焦电泳方法

一.仪器设备:

     电泳仪,电泳槽,注射器,烧杯,量筒,试管,漏斗,滤纸,刻刀,移液器。

二.试剂配制:

    1.电极缓冲液:

       正极缓冲液:1mol/LH3PO4,11.5ml85%磷酸加水至100ml。

       负极缓冲液:1mol/LNaOH,4g氢氧化钠加水至100ml。

    2.品提取液:

        40%制糖:40g蔗糖加水至100ml。

    3.顺丁烯二酸缓冲液:

        3.08gNaOH+5.8g顺丁烯二酸加水至1000ml。

     4.1%a-奈酯:

        1g醋酸-a-奈酯+100ml正丁酯。

    5.7%冰醋酸:

        70ml冰醋酸加水至1000ml。

     6.固蓝RR盐+顺丁烯二酸缓冲液

三.电泳操作技术

    1.样品处理:

        1)浸泡:先将所需种子浸泡一段时间,以备取胚使用。

        2)取胚:用刻刀把种子的胚取出,放入1.5ml离心管管内。

        3)研磨:在离心管内加入120ul提取液,将胚研成匀浆,放入冰箱保存。

    2.凝胶制备:

        1)配制凝胶前,应把玻璃板准备好,即将两块干净的玻璃板叠放在一起,之间夹上所需凝胶厚度的胶条进行四边密封,一端留有小口来灌胶,然后用文具夹将玻璃板四周固定好。注意夹子作用力点在胶条正中,以防漏胶。

        2)配制凝胶时,先将所需储备液自冰箱中取出放置温室。

        3)将各种储备液按一定比例混合(见表)然后加入1ml左右的7号试剂,搅拌均匀,zui后用注射器吸净混合液,排除气泡,缓缓注入玻璃板的夹隙内。

        4)将注入混合液的玻璃板静置放好,隔夜使用。 

 

载体两性电解质
别名:两性电解质载体:Ampholyte solution Ampholine
性状;近无色至浅黄色透明液体,有粘性,为一中相对分子质量 300-1000的人工合成的多氨基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。 
 溶度:为40%的溶液
用途:用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存:充氮密封4度干燥保存,SCRC 680007-680021

P0300 蛋白电泳 1.5M Tris-HCL(PH8.8) 100/500ml 46.00/160.00
P0220 蛋白电泳 10%过硫酸氨 1ml 15.00
P0210 蛋白电泳 10×电泳转移缓冲液 500ml 100.00
P0270 蛋白电泳 10×丽春红染液 10ml 90.00
P0290 蛋白电泳 1M Tris-HCL (PH6.8) 100/500ml 40.00/160.00
P0230 蛋白电泳 30%丙烯酰胺/甲叉溶液(29:1) 100ml/500ml 60.00/180.00
P0250 蛋白电泳 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液 100ml/500ml 60.00/180.00
P0260 蛋白电泳 4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液 100/500ml 60.00/180.00
P0235 蛋白电泳 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1) 100/500ml 80.00/280.00
P0180 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(含DTT) 1ml/10ml 40.00/160.00
P0170 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 120
P0190 蛋白电泳 5×非变性蛋白上样缓冲液 10ml 100.00
P0171 蛋白电泳 4×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 100
P0200 蛋白电泳 Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(干粉) 10L 180
P0280 蛋白电泳 考马斯亮蓝快速染色液 500ml 100.00
P1006 蛋白电泳 载体两性电解质PH3.5-10 12ml 580.00

 

 

考马斯亮蓝快速染色液 P0280

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考马斯亮蓝快速染色液 Jinpan P0280

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考马斯蛋白胶快速染色液

P0280     考马斯亮蓝快速染色液     Jinpan     500ml     100.00

(p0380)

考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液是一种即用型快速灵敏而且安全的染液,用于SDS-PAGE或者非变性胶的快速染色,在半小时内就可以出结果。灵敏度达10ng。

试剂组成:溶液A(50×) 10ml

溶液B (50×) 10ml

使用方法:

工作液的配制,取50ml水,加入1ml溶液A,1ml溶液B,混匀。此为工作液。此工作液配好后请在一周内使用完,过期效果会有一定的影响。

1.将电泳后的 PAGE 胶(以8cm×10 cm大小为例)取下放入容器中,加入 50 ml 双蒸水或去离子水,加热至沸腾后停止,(可选:继续在脱色摇床上摇动5 分钟),弃去水溶液。

2.加入25 ml 快速染色工作液,加热至沸腾后保持沸腾状态 30-60 秒,停止加热后继续在脱色摇床上摇动 5-10 分钟,弃去染色液(此时蛋白条带应已可见)。

3.加入约 50 ml 水,加热至沸腾后保持沸腾状态 30-60 秒,停止加热后继续在脱色摇床上摇动 5-10 分钟,换水即可完成脱色,观察结果。

注意事项:

1染色前的清洗步骤(*步)中,水的质量非常重要,质量越好灵敏度越高,研究证明,若用自来水加热清洗,染色效果与灵敏度仅与常规甲醇考马斯亮蓝染色(分子克隆第二版)相同。

2脱色时可用自来水清洗。

3若要得到无背景的染色胶,可重复脱色步骤或将胶放在水中过液。

4经本产品染色的 PAGE 胶,胶的缩涨度小于 5%,染色后的胶可在水中放置数月而无明显脱色。

5每次加热后,继续在脱色摇床上摇动5分钟,可增强染色效果。

6本染色液有腐蚀性,请带手套操作。

 

P0300 蛋白电泳 1.5M Tris-HCL(PH8.8) 100/500ml 46.00/160.00
P0220 蛋白电泳 10%过硫酸氨 1ml 15.00
P0210 蛋白电泳 10×电泳转移缓冲液 500ml 100.00
P0270 蛋白电泳 10×丽春红染液 10ml 90.00
P0290 蛋白电泳 1M Tris-HCL (PH6.8) 100/500ml 40.00/160.00
P0230 蛋白电泳 30%丙烯酰胺/甲叉溶液(29:1) 100ml/500ml 60.00/180.00
P0250 蛋白电泳 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液 100ml/500ml 60.00/180.00
P0260 蛋白电泳 4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液 100/500ml 60.00/180.00
P0235 蛋白电泳 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1) 100/500ml 80.00/280.00
P0180 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(含DTT) 1ml/10ml 40.00/160.00
P0170 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 120
P0190 蛋白电泳 5×非变性蛋白上样缓冲液 10ml 100.00
P0171 蛋白电泳 4×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 100
P0200 蛋白电泳 Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(干粉) 10L 180
P0280 蛋白电泳 考马斯亮蓝快速染色液 500ml 100.00
P1006 蛋白电泳 载体两性电解质PH3.5-10 12ml 580.00

 

 

Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(干粉) P0200

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Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(干粉)Jinpan P0200

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P0200 蛋白电泳 Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(干粉) 10L 180

 

Tris-甘氨酸电泳缓冲夜 配制量:10升

所用试剂:Tris碱,甘氨酸和 SDS

含量配方:    30.3      Tris碱

        188g        甘氨酸

    10g         SDS

此产品为干粉混合物。用时可以用双蒸水溶解成1L,配成10倍浓缩液,用时再稀释10倍。

配好的电泳液用于SDS-PAGE蛋白电泳。可反复使用三到五次,如果发现有明显沉淀或者漂浮时,请丢弃换新的。

Tris-甘氨酸电泳缓冲夜系列产品 一起采购节约时间!

P0300 蛋白电泳 1.5M Tris-HCL(PH8.8) 100/500ml 46.00/160.00
P0220 蛋白电泳 10%过硫酸氨 1ml 15.00
P0210 蛋白电泳 10×电泳转移缓冲液 500ml 100.00
P0270 蛋白电泳 10×丽春红染液 10ml 90.00
P0290 蛋白电泳 1M Tris-HCL (PH6.8) 100/500ml 40.00/160.00
P0230 蛋白电泳 30%丙烯酰胺/甲叉溶液(29:1) 100ml/500ml 60.00/180.00
P0250 蛋白电泳 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液 100ml/500ml 60.00/180.00
P0260 蛋白电泳 4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液 100/500ml 60.00/180.00
P0235 蛋白电泳 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1) 100/500ml 80.00/280.00
P0180 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(含DTT) 1ml/10ml 40.00/160.00
P0170 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 120
P0190 蛋白电泳 5×非变性蛋白上样缓冲液 10ml 100.00
P0171 蛋白电泳 4×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 100
P0200 蛋白电泳 Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(干粉) 10L 180
P0280 蛋白电泳 考马斯亮蓝快速染色液 500ml 100.00
P1006 蛋白电泳 载体两性电解质PH3.5-10 12ml 580.00

 

 

5×非变性蛋白上样缓冲液 P0190

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5×非变性蛋白上样缓冲液 Jinpan P0190

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金畔生物常年供应5×非变性蛋白上样缓冲液,生化试剂供应商5×非变性蛋白上样缓冲液,分子生物学试剂5×非变性蛋白上样缓冲液

5×非变性蛋白上样缓冲液常年现货供应

P0190 5×非变性蛋白上样缓冲液 Jinpan 10ml
 100.00
 

 

P0300 蛋白电泳 1.5M Tris-HCL(PH8.8) 100/500ml 46.00/160.00
P0220 蛋白电泳 10%过硫酸氨 1ml 15.00
P0210 蛋白电泳 10×电泳转移缓冲液 500ml 100.00
P0270 蛋白电泳 10×丽春红染液 10ml 90.00
P0290 蛋白电泳 1M Tris-HCL (PH6.8) 100/500ml 40.00/160.00
P0230 蛋白电泳 30%丙烯酰胺/甲叉溶液(29:1) 100ml/500ml 60.00/180.00
P0250 蛋白电泳 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液 100ml/500ml 60.00/180.00
P0260 蛋白电泳 4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液 100/500ml 60.00/180.00
P0235 蛋白电泳 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1) 100/500ml 80.00/280.00
P0180 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(含DTT) 1ml/10ml 40.00/160.00
P0170 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 120
P0190 蛋白电泳 5×非变性蛋白上样缓冲液 10ml 100.00
P0171 蛋白电泳 4×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 100
P0200 蛋白电泳 Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(干粉) 10L 180
P0280 蛋白电泳 考马斯亮蓝快速染色液 500ml 100.00
P1006 蛋白电泳 载体两性电解质PH3.5-10 12ml 580.00

本试剂在2-8℃可保存两年,
非变性蛋白上样缓冲液不含SDS及DTT或者巯基乙醇,适合于非变性蛋白电泳。
使用时,将4体积的样品和1体积的上样缓冲液混合却可上样电泳。

 

 

5×蛋白上样缓冲液(含DTT) P0180

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5×蛋白上样缓冲液(含DTT) Jinpan P0180

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蛋白上样缓冲液(含DTT)其主要成分SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。保存条件:-20℃  一年有效。

蛋白上样缓冲液(含DTT)使用说明:1、按照每40微升蛋白样品加入十微升上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。2、混匀后,100℃水浴加热3-5分钟,使蛋白变性。3、冷却到室温后,离心数秒后,混匀再离心30秒取上清直接上样即可。

上海金畔生物科技有限公司现货供应

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40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1) P0235

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40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1) Jinpan P0235

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40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1)

P0235 蛋白电泳 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1) 100/500ml 80.00/280.00

 

试剂组成:丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺
配方(1L):389.61g           丙烯酰胺
               10.39g             甲叉双丙烯酰胺
溶解于600ml去离子水中,用去离子水定容至1升,过滤后4℃避光贮存。
 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1)现货供应

P0260   4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液   Jinpan 100/500ml 60.00/180.00
本公司供应化学试剂的4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液,品质保证,欢迎洽谈。
4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(PH=6.8)
含 0.5MTRIS-HCl PH6.8 0.4% SDS
如配制5ml浓缩胶,可加入此试剂1.25ml,不必再加TRIS-HCl 和SDS。

30%丙烯酰胺/甲叉溶液(29:1)现货供应
P0300 蛋白电泳 1.5M Tris-HCL(PH8.8) 100/500ml 46.00/160.00
P0220 蛋白电泳 10%过硫酸氨 1ml 15.00
P0210 蛋白电泳 10×电泳转移缓冲液 500ml 100.00
P0270 蛋白电泳 10×丽春红染液 10ml 90.00
P0290 蛋白电泳 1M Tris-HCL (PH6.8) 100/500ml 40.00/160.00
P0230 蛋白电泳 30%丙烯酰胺/甲叉溶液(29:1) 100ml/500ml 60.00/180.00
P0250 蛋白电泳 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液 100ml/500ml 60.00/180.00
P0260 蛋白电泳 4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液 100/500ml 60.00/180.00
P0235 蛋白电泳 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(37.5:1) 100/500ml 80.00/280.00
P0180 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(含DTT) 1ml/10ml 40.00/160.00
P0170 蛋白电泳 5×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 120
P0190 蛋白电泳 5×非变性蛋白上样缓冲液 10ml 100.00
P0171 蛋白电泳 4×蛋白上样缓冲液(配有β-巯基乙醇) 10ml 100
P0200 蛋白电泳 Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(干粉) 10L 180
P0280 蛋白电泳 考马斯亮蓝快速染色液 500ml 100.00
P1006 蛋白电泳 载体两性电解质PH3.5-10 12ml 580.00