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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白
Tma 核酸内切酶 III 收藏
货 号
规 格
价 格(元)
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#M0291S
500 units
889.00
无
无
无
无
无
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特性
碱性析出 碱解旋
概述
该酶为 E. coli 核酸内切酶 III(Nth)的热稳定同源蛋白。既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性随后对该位点进行切割。 Tma 核酸内切酶 III 识别 DNA 上的无碱基位点、5,6 二羟基胸腺嘧啶和胸腺嘧啶乙二醇。
来源
重组 E. coli 菌株,基因克隆自海栖热袍菌(Thermotoga maritima)。
反应条件
1X ThermoPol 反应缓冲液
[10 mM KCl,20 mM Tris-HCl,10 mM (NH4)2SO4,2 mM MgSO4,0.1% Trition X-100(pH 8.8 @ 25℃)],65℃ 温育。
质保声明
Tma 核酸内切酶 III 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。
单位定义
1 单位指在 10 μl 反应体系中,65℃ 条件下,1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 60 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 *AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 60 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。
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核酸内切酶 VIII 收藏
货 号
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#M0299L
5,000 units
3,359.00
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#M0299S
1,000 units
829.00
无
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特性
单细胞凝胶电泳(彗星试验)
碱洗脱 碱解旋
概述
大肠杆菌核酸内切酶 VIII 既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在 AP 位点的 3´ 和 5´ 端切割磷酸二酯键,产生 5´ 磷酸和 3´ 磷酸末端。能被核酸内切酶 VIII 识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲 。尽管核酸内切酶 VIII 与核酸内切酶 III 的活性相似,但核酸内切酶 VIII 具有 β 和 δ 裂解酶活性,而核酸内切酶 III 只有 β 裂解酶活性。
来源
克隆有 nei 基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件
1X Endonuclease VIII 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl,75 mM NaCl,1 mM EDTA(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。 热失活:75℃ 加热 10 分钟。
质保声明
核酸内切酶 VIII 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。
单位定义
1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中,37℃ 条件下,1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。
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核酸内切酶 IV 收藏
货 号
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#M0304L
5,000 units
3,359.00
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#M0304S
1,000 units
829.00
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特性
单细胞凝胶电泳(彗星试验)
碱洗脱 碱解旋
概述
核酸内切酶 IV 能够作用于 DNA 分子上的几种氧化性损伤。该酶是一个脱嘌呤/脱嘧啶(AP)核酸内切酶,水解 DNA 上的完整 AP 位点。切割 AP 位点 5´ 端的第一个磷酸二酯键,产生 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。该酶也具有 3´ 二酯酶活性,能从 DNA 的 3´ 末端释放磷酸甘油醛、完整的脱氧核糖 5´ -磷酸和磷酸。
来源
克隆有 Endo IV 基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件
1X NEBuffer 3
[100 mM NaCl,50 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。 热失活:85℃ 加热 20 分钟。
质保声明
核酸内切酶 IV 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请联系我们。
单位定义
1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。更多信息请联系我们。 * AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。
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核酸内切酶 V 收藏
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#M0305S
250 units
839.00
无
无
无
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特性
切割含脱氧次黄嘌呤核苷的寡核苷酸 切割错配
概述
核酸内切酶 V 是在 E. coli 中发现的一种 DNA 修复酶。它识别 DNA 中的脱氧次黄嘌呤核苷,即脱氧腺苷的去氨基产物。核酸内切酶 V,也称为脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 内切酶,识别含脱氧次黄嘌呤核苷(无论配对与否)的双链或单链 DNA。也可识别含脱碱基(AP)位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flaps 和类 -Y 型结构的 DNA,但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶 V 发挥 DNA 修复功能时,还需另外一种蛋白的存在,因为它不能切除 DNA 上的脱氧次黄苷或受损碱基。
核酸内切酶 V 对错配脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 端第二个磷酸二酯键进行切割,产生一个 3´ 羟基、5´ 磷酸的切刻。
来源
重组 E. coli 菌株,携带有 Endo V 基因与编码麦芽糖结合蛋白(MBP)基因的融合基因。融合蛋白纯化后具有生物活性。该蛋白含 223 个氨基酸,分子量为 24.9 kDa。
反应条件
1X NEBuffer 4
[50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2 ,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。 热失活:65℃ 加热 20 分钟。
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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白
切割错配核酸内切酶 I 收藏
货 号
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#M0678S
4,000 units
1,799.00
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产品特点
•DNA 核酸内切酶
•催化切割一些 DNA 错配(T:T,G:G 和 G:T)
•在两条链上错配碱基 5’端的第三个磷酸二酯键处切割,切割后产生 5 bp 粘性末端,含 3′-OH 和 5′- 磷酸
•对于 T 错配切割效果最好;无法识别所有类型的 DNA 错配
产品描述
切割错配核酸内切酶 I 是一种依赖 Mg2+ 的 DNA 核酸内切酶,可特异切割错配碱基对(T:T、G:G 和 T:G 错配)。切割错配核酸内切酶 I 在两条链上错配碱基 5’端的第三个磷酸二酯键处切割,切割后产生 5 bp 粘性末端。切割错配核酸内切酶 I 优先切割的 DNA 错配为:T:T、G:G 和 T:G,也可轻松切割 T:I、G:I 和 G:U 错配。此外,实验证明:切割错配核酸内切酶 I 在 T:C 类型的 DNA 错配中可在含 T 的链上形成切刻。该酶还能切割 DNA:RNA 杂交链上的 T:G 和 T:U 错配,但其切割效率低于 DNA:DNA 错配。
图 1.切割错配核酸内切酶 I 能够切割双链 DNA 上的 T:T、G:T 和 G:G 错配
(A)构建四个在同一位点包含特定突变质粒(p1-p4),使用差异磷酸化引物(正向或反向)扩增生成 8 个双链 PCR 片段,长度约 672 bp (ds1-ds8)。经 Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒(NEB #T1030)纯化后,使用 5 units Lambda 核酸外切酶,经37℃孵育 60 分钟,以特异性降解双链片段中的磷酸化链(2.2 µg),从而产生一系列单链(正链/负链),同一位点碱基为 A/T/C/G。随后使用 Monarch PCR & DNA 纯化试剂盒(NEB #T1030)对这些单链片段(ss1-ss8)进行纯化。