HiScribe™ T7 高效 RNA 合成试剂盒 货 号 #E2040S-NEB酶试剂

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HiScribe™ T7 高效 RNA 合成试剂盒                              收藏

HiScribe™ T7 高效 RNA 合成试剂盒             货   号                  #E2040S

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#E2040S
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特性:

 合成长链或短链 RNA 转录产物

 掺入经修饰的核苷酸
 掺入经标记的核苷酸
 利用帽类似物合成带帽 RNA
 合成高比活或低比活放射性标记的探针

概述:

NEB HiScribe T7 高效 RNA 合成试剂盒可在体外高效合成多种类型的 RNA,包括内部标记的RNA 及共转录带帽结构 RNA。利用 T7 RNA 聚合酶,该试剂盒可以从少量样本得到高效转录,单次反应可获得高达 180 μg 的产物,或利用帽类似物合成带帽 RNA,产量高达 30-40 μg。利用该试剂盒得到的 RNA 适用于多种下游应用,如 RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗等。

HiScribe T7 高效 RNA 合成试剂盒剂型灵活,使用单独的 NTP,有利于用户灵活建立反应。而 HiScribeT7 快速高效 RNA 合成试剂盒,其预混液的剂型便于快速建立反应。后者还含 DNase I 和 LiCl,可去除 DNA 模板和快速纯化 RNA。

HiScribe T7 高效 RNA 合成试剂盒组分:

 – T7 RNA 聚合酶混合液

– T7 反应缓冲液(10X)
– ATP、GTP、UTP、CTP(100 mM)
– FLuc 对照模板

HiScribe™ T7 快速高效 RNA 合成试剂盒 货 号 #E2050S-NEB酶试剂

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HiScribe™ T7 快速高效 RNA 合成试剂盒             货   号                  #E2050S

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#E2050S
50 次反应
3,069.00

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特性:

 合成长链或短链 RNA 转录产物

 掺入经修饰的核苷酸
 掺入经标记的核苷酸
 利用帽类似物合成带帽 RNA
 合成高比活或低比活放射性标记的探针

概述:

NEB HiScribe T7 高效 RNA 合成试剂盒可在体外高效合成多种类型的 RNA,包括内部标记的RNA 及共转录带帽结构 RNA。利用 T7 RNA 聚合酶,该试剂盒可以从少量样本得到高效转录,单次反应可获得高达 180 μg 的产物,或利用帽类似物合成带帽 RNA,产量高达 30-40 μg。利用该试剂盒得到的 RNA 适用于多种下游应用,如 RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗等。

HiScribe T7 高效 RNA 合成试剂盒剂型灵活,使用单独的 NTP,有利于用户灵活建立反应。而 HiScribeT7 快速高效 RNA 合成试剂盒,其预混液的剂型便于快速建立反应。后者还含 DNase I 和 LiCl,可去除 DNA 模板和快速纯化 RNA。

HiScribe T7 快速高效 RNA 合成试剂盒组分:

 
– T7 RNA 聚合酶混合液
– NTP 缓冲液混合液
– FLuc 对照模板
– DNase I(无 RNase)
– LiCl 溶液

HiScribe™ T7 ARCA mRNA 试剂盒(加尾) 货 号 #E2060S-NEB酶试剂

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HiScribe™ T7 ARCA mRNA 试剂盒(加尾)                              收藏

HiScribe™ T7 ARCA mRNA 试剂盒(加尾)             货   号                  #E2060S

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相关产品

DNase I(无 RNase)
RNA 上样染料(2X)

特性

 合成带帽和尾的 mRNA
 掺入经修饰的核苷酸
 用 E. coli Poly(A) 聚合酶合成 Poly(A)尾
 包括模板去除和 mRNA 纯化试剂 

概述

大多数真核 mRNA 的高效翻译需要在 5´ 末端有一个 7-甲基鸟苷帽结构, 3´ 末端有一个 Poly(A)尾。用 DNA模板编码的 Poly(A)尾, HiScribe T7 ARCA mRNA 试剂盒(加尾)可以快速体外合成带帽带尾的 mRNA。使用 T7 RNA 聚合酶通过共转录,将抗- 反向帽类似物(ARCA, NEB #S1411)加到 mRNA 上。利用 ARCA/NTP 混合液、 T7 RNA 聚合酶混合 液和适当的 DNA 模板,很容易建立转录反应。试剂盒也可以将 5mCTP、 Pseudo-UTP 和其它修饰的 核苷酸掺入 mRNA。经 DNase I 短暂温育可以去除模板 DNA, Poly(A)聚合酶为加帽的 mRNA 加 Poly(A)尾。试剂盒合成的 mRNA 可以用于细胞转染、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗。

HiScribe T7 ARCA mRNA 试剂盒(带尾)组成

– T7 RNA 聚合酶混合液
– ARCA/NTP 混合液
– DNase I(无 RNase)
E. coli Poly(A) 聚合酶
– Poly(A) 聚合酶反应缓冲液
– LiCl 溶液
– CLuc 对照模板 

优势

• 快速建立反应体系和简单的操作流程
• 可以引入 5mCTP、Pseudo-UTP 和其它经修饰的 CTP 和 UTP
• 高质量的各种组分确保 mRNA 的完整性 

HiScribe™ T7 ARCA mRNA 试剂盒 货 号 #E2065S-NEB酶试剂

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HiScribe™ T7 ARCA mRNA 试剂盒             货   号                  #E2065S

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#E2065S
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相关产品

DNase I(无 RNase)
RNA 上样染料(2X)

特性

 以编码 Poly(A)尾的 DNA 为模板, 合成带帽的 mRNA
 掺入修饰的核苷酸
 包括模板去除和 mRNA 纯化试剂 

概述

大多数真核 mRNA 的高效翻译需要在 5´ 末端有一个 7-甲基鸟苷帽结构,3´ 末端有一个 Poly(A) 尾。HiScribe T7 ARCA mRNA 试剂盒可以用来合成带帽的 mRNA。使用 T7 RNA 聚合酶通过共转录,将抗-反向帽类似物(ARCA,NEB #S1411)加到 mRNA 上。利用 ARCA/NTP 混合液、T7 RNA 聚合酶混合液和适当的 DNA 模板,很容易建立转录反应。试剂盒也可以用于将 5mCTP、Pseudo-UTP 和其它修饰的核苷酸引入 mRNA。试剂盒合成的 mRNA 可以用于转染、体外翻译和 RNA 疫苗。试剂盒包含 DNA 模板去除和 mRNA 快速纯化的 DNase I 和 LiCl。

HiScribe T7 ARCA mRNA 试剂盒组成

– T7 RNA 聚合酶混合液
– ARCA/NTP 混合液
– DNase I(无 RNase)
– LiCl 溶液
– CLuc 对照模板 

优势

• 快速建立反应体系和简单的操作流程
• 可以引入 5mCTP、Pseudo-UTP 和其它修饰的 CTP 和 UTP
• 高质量的各种组分确保 mRNA 的完整性 

HiScribe™ SP6 RNA 合成试剂盒 货 号 #E2070S-NEB酶试剂

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#E2070S
50 reactions
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特性

 合成长链或短链 RNA 转录产物

 掺入经修饰的核苷酸
 掺入经标记的核苷酸
 利用帽类似物合成带帽 RNA
 合成高比活或低比活放射性标记的探针

概述:

HiScribe SP6 RNA 合成试剂盒利用 SP6 RNA 聚合酶进行 RNA 体外转录。该试剂盒适用于高效合成 RNA 转录子,并可引入帽类似物(试剂盒中不包含)或经修饰的核苷酸(试剂盒中不包含)以获得带帽、生物素标记或染料标记的 RNA。试剂盒同样适用于合成高比活的放射性 RNA 作为探针或靶标。

利用该试剂盒得到的 RNA 适用于多种下游应用,如RNA 结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析或凝胶迁移滞后实验用探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射和体外翻译等。
 
对于 25 μl 反应体系,试剂盒有足够 50 次反应使用的试剂量。使用 1 μg SP6 对照模板 DNA,一次标准反应 RNA 产量 ≥ 80 μg。每个试剂盒可生成 ≥ 4 mg 的 RNA。

HiScribe SP6 RNA 合成试剂盒组分:

 – SP6 反应缓冲液(10X)

– ATP(Tris)、GTP(Tris)、UTP(Tris)、
   CTP(Tris),(50 mM)
– SP6 对照模板
– SP6 RNA 聚合酶混合液
– DNase I(无 RNase)
– LiCl 溶液

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m7G(5´ )ppp(5´ )A
#S1405S 1 μmol . . . . . . .¥1,899
#S1405L 5 μmol . . . . . . .¥7,589

HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG) 货 号 #E2080S-NEB酶试剂

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HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)                              收藏

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#E2080S
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产品特点

·使用 1 µg 对照模板,单次反应可转录高达 90 µg Cap-1 mRNA

·独立包装的 NTP 适用于全部/部分修饰 NTPs 替换
·试剂盒包含模板去除和 RNA 纯化试剂
·试剂盒包含线性对照模板,用于验证 CleanCap® Reagent AG 的 RNA 合成效果

产品概述

 对于大多数真核生物来说,mRNA 需要 5’端带有 7-甲基鸟苷(m7G)帽结构,3’端带有 poly(A)尾才能有效翻译。HiScribe T7 mRNA合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)优化了 RNA 合成配方,利用三核苷酸帽结构类似物技术,通过一步共转录加帽即可获得带有天然的 Cap-1 结构的 mRNA,且不会影响 RNA 产量。使用含 T7 启动子序列、AG 起始的目标序列和 poly(A)尾编码序列的 DNA 模板,即可转录带有 5’-m7G Cap-1 和 poly(A)尾的 mRNA,该 mRNA 能够有效翻译并能逃避细胞先天免疫反应。

 
HiScribe T7 mRNA合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)包含独立包装的 NTP 和 CleanCap Reagent AG,适用于全部/部分修饰 NTPs 替换,试剂盒总产量为 1.8 mg mRNA。使用该试剂盒合成的 Cap-1 mRNA 适用于多种应用,包括:转染、显微注射、体外翻译、临床前 mRNA 治疗研究以及 RNA 结构和功能分析。
 
该试剂盒可完成 20 次共转录反应(20 μl 体系)。使用 1 μg CLuc AG 对照模板 DNA 进行标准反应,可转录≥90 μg RNA。每个试剂盒的产量≥1.8 mg RNA。
 
图 1:CleanCap Reagent AG 分子结构
 
HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)            货   号                  #E2080S
图 2:使用 CleanCap Reagent AG 时,启动子和起始序列示意图
 
HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)            货   号                  #E2080S
 

图 3:CleanCap Reagent AG 比 ARCA 的mRNA 合成产量更高

HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)            货   号                  #E2080S

所有反应均使用 5 mM CTP、5 mM UTP 和 6 mM ATP 进行。标准 IVT 反应使用 5 mM GTP,不添加帽结构类似物。ARCA 反应使用 4:1 的 ARCA:GTP(4 mM:1 mM)。含 CleanCap Reagent AG 的 IVT 反应使用 5 mM GTP 和 4 mM CleanCap Reagent AG,反应体系分别参照以下说明书配制:标准 mRNA 合成和 HiScribe T7 mRNA合成试剂盒(含 CleanCap Reagent AG))。反应在 37℃ 下孵育 2 小时,通过 NanoDrop 检测纯度和定量。